腰椎椎间融合固定术治疗退变性腰椎间盘突出症临床观察

目的探讨腰椎后路椎弓根钉内固定、椎间融合术,治疗退变性腰椎间盘突出症的近远期疗效。方法对采用腰椎后路椎间融合固定治疗退变性腰椎间盘突出症79例的临床资料进行分析。结果随访时间9～24个月,术后腰椎JOA评分22～29分,平均26分,治疗后评分改善优良率达86.7%。Denis腰痛分级评分:P1 36例(46%),P2 24例(30%),P3 19例(24%)。结论腰椎后路椎弓根钉内固定、椎间融合术,治疗退变性腰椎间盘突出症的近远期疗效满意。     

慢性肾脏病住院患者白蛋白尿与心血管疾病相关性研究

目的：研究慢性肾脏病（CKD）住院患者白蛋白尿与心血管疾病（CVD）的相关性,探讨白蛋白尿对非糖尿病CKD患者CVD的预测价值。方法：回顾性分析1245例非糖尿病CKD患者的一般情况、生化指标、心电图、胸部X线、心超及CVD的危险因素。结果：（1）1245例患者中CKD1、2、3、4、5期分别为304例（24.4%）、281例（22.6%）、372例（29.9%）、157例（12.6%）、131例（10.5%）;CKD1～5各期有蛋白尿者分别为208例（68.8%）、194例（69%）、269例（72.3%）、117例（74.5%）、106例（80.9%）。（2）与CKD1期患者相比,CKD2～5期患者年龄、SBP、DBP、Scr、UA明显升高,eGFR、Hb、Alb明显降低（P〈0.05）;CKD3期患者TG、LDL升高,HDL降低（P〈0.05）;CKD4、5期患者TC、LDL、HDL降低;TG升高（P〈0.05）。（3）与CKD同期非白蛋白尿组相比,白蛋白尿组CKD1～5期患者Scr、UA明显升高,Alb明显降低（P〈0.05）;CKD2～5期患者SBP、DBP明显升高,eGFR、Hb明显降低（P〈0.05）;CKD4、5期患者TC、HDL降低,TG、LDL升高（P〈0.05）。（4）CKD患者CVD发病率从CKD1～CKD5期逐步升高（P〈0.05）,白蛋白尿患者CVD发病率以及胸部X片、心电图、心超异常阳性率升高更加明显（P〈0.05）。（5）Logistic回归分析显示CVD与年龄、SBP、UA、TG、白蛋白尿呈现正相关,与GFR、Hb呈现负相关（P〈0.05）。结论：非糖尿病CKD患者CVD发病率随CKD进展而增高,与白蛋白尿密切相关,白蛋白尿是CVD患者心血管疾病危险标志。     

慢性肾脏病患者血清1,25（OH）2D水平与蛋白尿及尿炎症细胞因子相关性研究

目的：探讨慢性肾脏病（CKD）1～4期患者血清1,25（OH）2D水平与蛋白尿、尿炎症细胞因子的关系。方法：对我科115例CKD1～4期患者及20例健康对照者进行血清1,25（OH）2D、血CRP,尿TGF-β1、MCP-1、TNF、IL-6,24h尿蛋白定量检测;分析血清1,25（OH）2D水平与以上指标相关性。结果：（1）CKD组患者血清1,25（OH）2D水平低于对照组（P〈0.05）;血CRP,尿MCP-1、TGF-β1、IL-6、TNF水平,24h尿蛋白定量高于对照组（P〈0.05）。（2）与GFR≥60ml·min^-1·1.73m^-2患者比较：GFR〈44ml·min^-1·1.73m^-2患者CRP,尿MCP-1、TGF-β1、IL-6、TNF水平、24h尿蛋白定量升高（P〈0.05）;血清1,25（OH）2D水平降低（P〈0.05）;而GFR45～59ml·min^-1·1.73m^-2患者与GFR≥60ml·min^-1·1.73m^-2患者比较,两组间差异无统计学意义（P〉0.05）;（3）单因素相关分析显示CKD患者血清1,25（OH）2D与年龄（r=-0.442）、收缩压（r=-0.464）、舒张压（r=-0.399）、GFR（r=0.902）、Scr（r=-0.430）、PTH（r=-0.341）、UA（r=0.237）、24h尿蛋白定量（r=-0.372）及尿TGF-β1（r=-0.894）、MCP-1（r=-0867）、TNF（r=-0.899）、IL-6（r=-0.934）水平相关（P〈0.05）。多元回归分析显示血清1,25（OH）2D与GFR呈正相关;与24h尿蛋白定量,尿MCP-1、IL-6,血Scr、PTH呈负相关。结论：CKD1～4期患者存在1,25（OH）2D水平降低,并与蛋白尿及尿炎症细胞因子水平密切相关。     

70例经皮肾活检临床病理分析

分析我院2010年3月~2014年6月70例肾活检患者临床表现、病理类型和并发症的特点。结果 70例肾活检病例中原发性肾小球疾病59例(84.29%),继发性肾小球疾病9例(12.86%),肾小管间质疾病2例(2.86%)。原发性肾小球疾病以膜性肾病多见,占45.76%,其次为微小病变,占18.64%;继发性肾小球疾病以狼疮性肾炎最多见(44.44%),其次为乙肝相关性肾炎和糖尿病肾病(各占22.22%)。出现并发症15例(21.4%),其中镜下血尿12例(17.14%),肾周血肿2例(2.86%),腰痛1例(1.43%)。超声引导下经皮肾活检并发症少,安全有效,临床与病理紧密结合,对明确诊断,指导治疗,评估预后有重要意义。     

骨髓间充质干细胞干预对缺血再灌注诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的：观察骨髓间充质干细胞（mesenchymal stemcells,MSCs）对缺血再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）诱导的急性肾损伤模型小鼠肾小管上皮细胞（renal tubular epithelial cells,RTECs）凋亡的保护作用及机制。方法：Percoll密度梯度离心结合贴壁培养法有效分离出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞（mMSCs）。雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组（15只）、I/R组（15只、夹闭双侧肾蒂30min开放）、I/R＋mMSCs组（15只、夹闭双侧肾蒂30min开放的同时尾静脉注射mMSCs）。造模并干预后,于1d、2d、3d、7d、14d分别处死部分小鼠,留取动脉血及肾组织,检测血尿素氮（BUN）及肌酐（Scr）,制作肾组织切片行HE染色进行肾小管损伤程度评分,TUNEL法检测RTECs的凋亡,Western Blot法检测建模后第2天肾小管组织中Caspase-3、Bcl-2蛋白水平的表达。结果：I/R后小鼠的BUN及Scr均显著高于正常对照组,但同一时间点I/R＋mMSCs组小鼠的BUN及Scr水平较I/R组为低,以术后第7天差异最为显著（P〈0.01）,肾小管损伤程度评分也有着显著降低。TUNEL检测表明I/R可诱导RTECs发生明显的凋亡,以术后第2天凋亡指数（apoptosis index,AI）最高（46.71±11.20）（P〈0.01）,而mMSCs干预可显著降低各时间点RTECs的凋亡水平（P〈0.05或P〈0.01）,至14d时AI基本恢复至对照组水平。Western blot进一步显示：I/R＋mMSCs组小鼠的肾组织中Caspase-3蛋白水平明显下降（1.16±0.33,P〈0.01）,而Bcl-2水平却有明显增高（0.94±0.27,P〈0.01）。结论：移植的MSCs对I/R诱导的肾损害小鼠RTECs凋亡具有抑制作用,从而有利于肾小管损伤的早期恢复,其保护机制可能与抑制Caspase-3表达,上调Bcl-2表达有关,但其细胞学和分子机制还有待进一步研究。     

急性肾损伤微环境对培养骨髓间充质干细胞分化及分裂增殖的影响

目的:观察体外模拟急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的微环境下,小鼠骨髓间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,mMSCs)分化及分裂增殖情况。方法:采用夹闭雄性C57BL/6小鼠双侧肾蒂30min再开放30min的方法制作缺血再灌注(I/R)性AKI鼠模型,即刻取双侧肾脏皮质制作I/R肾脏匀浆上清。抽取C57BL/6小鼠的骨髓,经Percoll密度梯度离心联合贴壁培养法分离纯化出mMSCs,以流式细胞仪鉴定。取扩增3代的mMSCs分组培养:(1)对照组:含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基;(2)干预组:含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基+I/R肾脏匀浆上清。诱导1d、3d、5d、7d后倒置显微镜下观察细胞形态学变化;透射电镜观察细胞超微结构;流式细胞仪检测角蛋白18(cytokeratin18,CK18);CCK-8法检测培养mMSCs的增生;TUNEL法检测mMSCs凋亡。结果:分离获得的P3-mMSCs高表达CD29和CD44,低表达CD34和CD45。与对照组长梭形细胞相比,干预组第3天可见部分细胞为椭圆形、短梭形,至第7天大部分细胞呈圆形、椭圆形、短胖梭形;透射电镜也观察到胞质内开始出现较多的粗面内质网、溶酶体、线粒体。流式细胞仪检测发现,对照组mMSCs内仅有极微量CK18表达,而干预组CK18阳性表达率显著增加。经I/R肾脏匀浆上清干预后,不同时间点mMSCs的增殖效应均显著减弱,而TUNEL检测显示胞核染色阳性的细胞百分比有显著升高(P0.01)。结论:体外模拟的AKI微环境可诱导mMSCs部分分化为肾小管上皮样细胞,但同时也会导致培养的mMSCs凋亡,增殖能力减弱,进而减少了可肾向分化的mMSCs数量,推测这可能是MSCs体内移植促肾修复能力有限的原因之一。     

黄芪甲苷孵育的脂肪源性干细胞对顺铂诱导的急性肾损伤小鼠的保护作用

目的：建立顺铂诱导的急性肾损伤（AKI）小鼠模型,尾静脉输注人脂肪源性干细胞（hADSC）及黄芪甲苷孵育的人脂肪源性干细胞（Ast-hADSC）,探讨其对AKI小鼠肾损伤的修复作用.方法：应用PKH26标记hADSC及Ast-hADSC;雄性BALB/C裸鼠随机分为4组（normal组、model组、hADSC及Ast-hADSC干预组）,干预组及模型组腹腔注射顺铂建立AKI模型,于建模后24 h尾静脉输注100 μl hADSC及Ast-hADSC悬液,模型组给予等量生理盐水.分别留取建模后24 h及静脉输注后1 d、3 d、7 d、14 d小鼠血清及肾组织标本,检测血Scr、BUN水平,HE染色观察肾组织病理变化,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,激光共聚焦观察hADSC及Ast-hADSC 在小鼠肾组织的分布.结果：模型组小鼠Scr、BUN、肾组织病理改变及细胞凋亡区域均显著高于正常组及细胞干预组,其中Scr、BUN分别在第3天、第7天达到最高值,肾小管损伤严重;相同时间点Ast-hADSC组肾组织病理改变及细胞凋亡区域较hADSC组明显降低,至14 d可基本恢复至正常水平;激光共聚焦显示PKH26标记的hADSC及Ast-hADSC于14 d在小鼠肾组织有少量表达,其中少量红色荧光与肾小管上皮细胞呈融合状态.结论：hADSC移植可减轻AKI小鼠肾脏结构和功能的损伤;经Ast孵育后,可在一定程度上提高hADSC对受损肾组织的修复作用.     

低氧诱导因子1α基因修饰脂肪干细胞修复小鼠急性肾损伤

背景：干细胞移植为肾损伤的治疗提供了一个新的途径,治疗基因转染干细胞可增强对疾病的治疗效果。目的：探讨低氧诱导因子1α基因修饰的脂肪源性干细胞移植对急性肾损伤小鼠肾脏结构和功能的影响。方法：连续2d向BALB/C裸鼠腹腔注射10mg/kg顺铂诱导急性肾损伤小鼠模型。造模24h后经小鼠尾静脉注射含1×105个脂肪源性干细胞或转染低氧诱导因子1α的脂肪源性干细胞的细胞悬液,3d后留取小鼠血液及肾组织标本进行实验。以注射200μL生理盐水的急性肾损伤小鼠作为模型对照,以正常小鼠作为正常对照。结果与结论：脂肪源性干细胞干预后急性肾损伤小鼠血清肌酐、尿素氮水平降低,肾组织病理改变及肾小管上皮细胞的凋亡病变减轻,肾组织炎症因子RANTES、肿瘤坏死因子α表达降低,白细胞介素10表达升高;其中低氧诱导因子1α基因修饰的脂肪源性干细胞对肾组织细胞凋亡及炎症因子表达作用更明显。免疫荧光染色可见移植的脂肪源性干细胞的存活,但未见其向肾小管上皮细胞转化。结果表明脂肪源性干细胞移植可改善急性肾损伤小鼠的肾脏结构和功能,经低氧诱导因子1α基因修饰后的脂肪源性干细胞作用更显著。     

胶原材料在药物缓释和组织工程中的研究进展

目的介绍胶原材料在药物缓释和组织工程中的研究新进展. 方法广泛查阅近年相关文献并进行回顾与综合分析. 结果胶原材料在药物缓释与组织工程中的应用研究已取得明显进展,胶原材料已成为组织工程研究的热点之一.一些胶原基质新型药物缓释系统和新型组织工程材料已进入临床论证阶段,将促进胶原材料在组织修复中的临床应用. 结论胶原材料在药物缓释、尤其是组织工程领域具有广阔的应用前景.除将胶原适当交联处理或与其它天然或合成高分子复合外,今后的研究中还应注重利用化学修饰改善胶原性能,通过将性质不同的支链接枝到胶原大分子上,赋予胶原新的特性,从而研制出新一代组织工程材料.