球体形成实验联合药物筛选建立耐顺铂胰腺癌干细胞株

目的 探索建立顺铂耐药人胰腺癌干细胞株,并进行初步鉴定.方法 通过球体形成实验联合顺铂药物筛选建立耐顺铂胰腺癌干细胞株;MTT法计算耐药指数;免疫荧光半定量检测OCT-4、SOX-2表达水平,检测干细胞标记物;免疫荧光半定量检测MUC-1表达水平,检测细胞分化能力;通过流式细胞仪测量侧群细胞和表面特异抗原标记（CD44＋/CD24＋）检测肿瘤干细胞含量.结果 耐顺铂干细胞株的耐药指数是亲代株PANC-1的71.5倍;干细胞标记物的免疫荧光检测发现,耐药株中OCT-4、SOX-2、MUC-1均有不同程度的表达;耐药干细胞株及亲代株SP细胞比例分别为（25.1±1.1）％和（7.8士0.9）％,差异有统计学意义（t=6.89,P＜ 0.01）;耐药株及亲代株中CD44＋/CD24＋表型的细胞亚群分别占（20.8±1.3）％和（2.4±0.8）％,差异有统计学意义（t=16.13,P＜ 0.01）.结论 球体形成实验联合顺铂药物筛选能建立耐顺铂胰腺癌细胞株,该细胞株能高效富集胰腺癌肿瘤干细胞.     

腹腔镜胃癌根治术不同气腹压力对肠道的影响

目的探讨腹腔镜胃癌根治术中不同CO2气腹压力对肠黏膜损伤及肠功能恢复的影响。方法前瞻性将2011年6月至2012年6月间上海第二军医大学长征医院胃肠外科收治的早期和局部进展期远端胃癌患者48例入组,根据患者意愿分为开腹胃癌D：根治术（12例,开腹组）：腹腔镜胃癌根治术加D2淋巴结清扫术36例（LG组）,按气腹压力低、中、高设为8～10mmHg（LP组）、11—13mmHg（MP组）和14—16mmHg（HP组）,随机将腹腔镜手术患者分到各组,每组12例。对比分析LG组中3种不同气腹压力组与开腹组的并发症发生情况和手术前后肠黏膜的病理形态、血浆D．乳酸水平及肠道功能恢复情况。结果LG组中3种不同气腹压力组与开腹组患者术前各基本参数比较,差异无统计学意义（均P〉0．05）。术后并发症发生率LG组（8．3％）低于开腹组（41．7％,P〈0．05）。开腹组术后肠黏膜损伤不明显;LG组中,LP组、MP组和HP组术后肠黏膜损伤程度分别为0～1级、1～2级和2-3级,HP组明显较LP组和MP组黏膜损伤程度严重（P〈0．05）。手术前血浆D．乳酸水平各组间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;而术后各组分别与术前比较,差异均具有统计学意义（P〈0．05）;但HP组术后血浆D哥L酸检测水平最高,与其他3组比较,差异均具有统计学意义（P〈0．05）。且HP组术后肠鸣音出现时间、排气时间及进食时间均较其他3组长,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论腹腔镜胃癌根治术安全微创优势明显,但较高气腹压力不利于术后肠黏膜和肠功能的恢复,术中应在保证手术视野清晰的情况下尽量降低气腹压力。     

肝移植术后胆道并发症的Clavien分级及高危因素分析

目的 探讨肝移植术后胆道并发症(biliary complication,BC)发生高危因素及Clavien 分级在BC分类中的意义.方法 逐步回归法筛选BC发生的高危因素;对BC进行Clavien分级,筛选ClavienⅢb级以上BC发生的高危因素.结果 14.4％ (26/181)的肝移植患者发生BC,其中ClavienⅢb级以上BC占84.6％ (22/26).BC组的回归分析表明:T管留置(P=0.0090,OR=31.177),术后1d肝动脉阻力指数(RI1d)(P=0.0094,OR＜0.001),术后1周肝动脉阻力指数(RI1w)(P=0.0013,OR＞999.999)的差异有统计学意义,且对该疾病的发生作用显著.ClavienⅢb 以上BC组的回归分析表明:RI1d(P=0.0065,OR＜0.001)、RIlw(P=0.0022,OR＞999.999)的差异有统计学意义,且对该疾病的发生作用显著.结论 Clavien分级系统对胆道并发症的分类具有重要指导意义.T管的放置增加了BC发生的风险,但并不会增加ClavienⅢb以上BC的发生.术后肝动脉血流异常的存在是BC尤其是ClavienⅢb以上BC发生的独立危险因素.     

肝移植术后胆道并发症的早期发现与诊断

目的探讨肝移植术后胆道并发症(biliary complication,BC)早期发现线索及诊断方法。方法分析BC的时间特点及临床表现,对BC患者与未发生BC患者的早期有关指标变化进行统计学分析。结果 181例肝移植中发生BC 26例(14.36%),其中22例(87.9%)BC发生于术后1年内。BC的临床表现多样,主要为胆道梗阻和感染症候群,其ALP、GGT增加幅度较TBIL、ALT更为明显,术后早期肝动脉阻力指数(HARI)出现偏高或偏低。结论临床表现、发生时间、肝功能中TBIL、ALT和ALP、GGT增幅分离现象以及术后早期HARI的异常有助于BC的早期发现和诊断。     

siRNA沉默Annexin-1基因对膀胱癌T24细胞生物学特性的影响

目的观察RNA干扰技术沉默Annexin-1基因表达对膀胱癌T24细胞增殖能力的影响。方法针对Annexin-1基因不同部位设计并化学合成3对不同的靶向小干扰RNA(siRNA),脂质体介导瞬时转染膀胱癌T24细胞,转染后应用半定量RT-PCR和Western印迹法检测Annexin-1mRNA和蛋白的改变,透射电镜观察细胞凋亡情况,用MTT法检测沉默Annexin-1表达对膀胱癌T24细胞增殖的影响。结果转染siRNA后膀胱癌T24细胞Annexin-1mRNA和蛋白水平显著下降(P0.05),转染siRNA沉默Annexin-1基因表达后膀胱癌T24细胞出现典型凋亡细胞,增殖能力显著下降(P0.05)。结论 RNA干扰Annexin-1基因后其mRNA和蛋白水平显著下降,诱导了膀胱癌T24细胞凋亡,并且抑制细胞的增殖。     

无痛肠镜检查中纳布啡联合异丙酚麻醉效果和安全性评价

目的探讨纳布啡联合异丙酚在无痛肠镜检查中的麻醉效果与安全性。方法选择四川省都江堰市中医医院2018年3月至2019年3月收治的拟行无痛肠镜检查患者84例,根据随机数字表法分为对照组与观察组,各42例。对照组患者采用芬太尼联合异丙酚麻醉,观察组患者采用纳布啡联合异丙酚麻醉。比较两组患者麻醉诱导前5 min(T0)、睫毛反射消失时(T1)、检查开始即刻(T2)、镜身过脾曲时(T3)、镜身过肝曲时(T4)、术毕时(T5)、术毕后5 min(T6)及术毕后10 min(T7)7个时刻的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、呼吸频率(RR)、血氧饱和度(SpO2)及术毕清醒后60 min内的疼痛与镇静情况;比较两组患者异丙酚用药量与相关时间,术中与术后不良反应发生情况,镜检前后6 h炎性因子水平。结果T0~T7,两组患者各时点的MAP和HR水平组内比较差异有统计学意义(P<0.05),两组患者各时刻点的MAP,HR,RR,SpO2水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05);术毕清醒后60 min内,两组患者各时点的视觉模拟评分及Ramsay镇静评分均呈下降趋势(P<0.05),且观察组明显低于对照组(P<0.05);两组患者异丙酚维持用量、麻醉诱导时间、检查时间比较差异无统计学意义(P>0.05)別观察组患者异丙酚诱导用量、单位时间用量均少于对照组麻醉苏醒时间短于对照组(P<0.05);术中及术毕清醒后60 min内,观察组恶心呕吐、躁动不安、呼吸抑制的不良反应发生率低于对照组(P<0.05);镜检后6 h,两组患者的C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α及γ-干扰素水平均较镜检前6 h升高,但观察组均低于对照组(P<0.05)。结论0.1 mg/kg纳布啡联合异丙酚用于无痛肠镜检查的麻醉效果较好,对机体的炎性应激相对较轻,安全性高。     

乳腺癌细胞中CD_(44)的表达及其反义寡核苷酸抑制乳腺癌细胞粘附侵袭的相关研究

乳腺癌是我国女性常见的恶性肿瘤,近年来发病率呈上升趋势，在上海已经成为女性恶性肿瘤之首，而且发病年龄趋于年轻化。远处转移是乳腺癌患者的主要死亡原因，CD44是一个近年来倍受关注的与肿瘤细胞侵袭转移相关的细胞表面粘附分子．它主要介导细胞与细胞，细胞与基质之间的粘附，进而参与肿瘤的侵袭和转移。我们尝试以CD44反义寡苷酸（antisense oligodexynucleotide，ASON）体外转染乳腺癌细胞系MCF-7，观察其对癌细胞粘附和侵袭能力的影响。     

血小板源性内皮细胞生长因子小干扰RNA质粒的构建和鉴定

目的构建针对血小板源性血管内皮生长因子（PDECGF）小干扰RNA（siRNA）表达质粒和阴性对照质粒pIASRC-PDECGF，并观察对PDECGF表达的影响。方法构建针对PDECGFsiRNA表达质粒pIASR-PDECGF和阴性对照质粒pIASRC—PDECGF，将沟建成功的质粒转染大肠癌细胞株GC7901，观察PDECGF蛋白表达的影响。结果成功构建针对PDECGF siRNA表达质粒pIASR-PDECGF。并发现它能够明显抑制PDECGF的表达。而阴性对照质粒则无此作用。结论血小板源性内皮细胞生长因子小干扰RNA能够特异性抑制PDECGF的表达。     

低分子右旋糖酐氨基酸预防腹部手术切口 脂肪液化临床效果观察

目的观察低分子右旋糖酐氨基酸预防腹部手术切口脂肪液化的临床效果。方法选取第二军医大学长征医院自2017年9月至2018年9月收治的行腹部手术的120例患者为研究对象,按照随机数字表法,将患者分入A组和B组,每组各60例。A组采用常规措施预防手术切口脂肪液化,B组在A组基础上注射低分子右旋糖酐氨基酸。比较两组患者的脂肪液化发生率、治疗有效率及平均切口愈合时间;在发生脂肪液化后,给予A组患者常规换药引流处理,给予B组患者常规换药引流+注射低分子右旋糖酐氨基酸,比较两组患者的脂肪液化切口干预后愈合时间。对所有患者随访2个月,观察预后情况。结果 A组未发生脂肪液化50例,轻度脂肪液化3例,重度脂肪液化7例,脂肪液化发生率为16.7%(10/60);B组未发生脂肪液化57例,轻度脂肪液化2例,重度脂肪液化1例,脂肪液化发生率为5.0%(3/60)。两组脂肪液化发生率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。B组平均切口愈合时间为(10.33±2.38)d,明显短于A组的(15.43±3.65)d,差异有统计学意义(P<0.05)。发生脂肪液化的患者在进行干预治疗后,B组脂肪液化切口干预后愈合时间为(6.02±1.98)d,明显短于A组的(9.64±3.54)d,差异有统计学意义(P<0.05)。A组治疗显效50例,有效3例,无效7例,有效率为88.3%(53/60);B组治疗显效57例,有效2例,无效1例,有效率为98.3%(59/60)。两组治疗有效率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对患者进行2个月随访,所有患者均切口愈合良好,未出现渗液现象。结论低分子右旋糖酐氨基酸有助于降低切口脂肪液化发生率,加快手术切口愈合。