染矽尘大鼠BALF中炎性细胞改变研究

[目的]探讨不同染尘剂量大鼠矽肺模型支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞的变化规律,为矽肺的发病机制提供可靠依据。[方法]2009年5～8月采用一次性气管内灌注二氧化硅(SiO2)粉尘的方法制作大鼠矽肺模型。大鼠随机分为对照组和模型组(15、30、60mg/ml),分别在1、3、7、14、21、28d将大鼠处死,采用在体全肺灌洗法收集BALF,光学显微镜下计数白细胞总数,瑞士吉姆萨染色法进行白细胞分类计数。[结果]模型组大鼠BALF中白细胞总数在大鼠染尘1、3、21、28d较对照组均增高,其中高剂量组和中剂量组较对照组差异有统计学意义(P<0.05);在7、14d仅高剂量组较对照组差异有统计学意义(P<0.05)。各剂量组在大鼠染尘1、3、7、14、21、28d,巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均较对照组增高,巨噬细胞在染尘1、3、7、21、28d均增高;中性粒细胞在1～14d显著增高(P<0.05),淋巴细胞在7～28d明显增高(P<0.05);各剂量组在染尘1、3、7、14、21、28d尘细胞数均增高。[结论]染尘大鼠早期主要表现为炎症反应,炎症细胞(巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和尘细胞)呈规律变化,且尘细胞具有较好的剂量-反应关系,对矽肺的预防和早期诊断具有很大的意义。     

染矽尘大鼠早期单核细胞趋化因子-1和巨噬细胞炎性蛋白-1α变化规律研究

目的探讨染尘大鼠早期单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)的变化规律与炎性细胞及矽肺的关系。方法168只Wistar大鼠随机分为对照组、低、中、高剂量组,每组42只,染尘剂量分别为15、30、60mg/ml。一次性气管内注入染尘建立大鼠矽肺模型,每组分6个时间点(第1、3、7、14、21、28天)分别取7只大鼠处死,收集支气管肺泡灌洗液,采用ELISA试剂盒测定MCP-1、MIP-1α浓度。结果不同染尘剂量间MCP-1、MIP-1α的差异均有统计学意义(P<0.01)。在各时间点剂量组与对照组相比较,2种因子的浓度均有不同程度的升高,差异有统计学意义(P<0.05)。总体观察染尘第28天显示,MCP-1浓度在早期高于后期,MIP-1α在第14天出现高峰,并且MIP-1α与MCP-1、TNF-α、IL-1、IL-6、TGF-β均呈正相关(P<0.01)。BALF中巨噬细胞和中性粒细胞与MCP-1均呈正相关(P<0.05)。结论大鼠肺组织中炎性细胞和细胞因子的改变与MCP-1和MIP-1α趋化因子的改变趋势一致,推断在2种趋化因子的作用下,肺组织中炎性细胞和细胞因子发生相应改变。MCP-1和MIP-1α作为矽肺早期检测生物标志物具有可行性。     

矽肺病患者痰液的诱导方法

[目的]通过优化痰液诱导和处理条件,探讨适宜的痰液诱导和处理方法。[方法]以不同浓度的高渗盐溶液、不同诱导时间对40例Ⅰ期矽肺患者进行雾化痰液诱导;用不同稀释倍数的0.1%二硫苏糖醇（DTT）及不同的水浴时间对痰液进行处理。[结果]3%、4%、5%浓度高渗盐水诱导成功率分别为80.00%、82.50%、60.00%;而6%浓度仅为22.50%,明显低于3%、4%、5%溶液（P〈0.01）;4%、5%之间的差异有统计学意义（P〈0.05）;3%、4%之间的差异无统计学意义（P〉0.05）。3%浓度高渗盐水诱导时间25、30 min的成功率分别为77.50%、92.50%。痰液37℃水浴30、40、50 min溶解状况明显优于20 min,差异有统计学意义（P〈0.05）;而30 min、40 min、50 min水浴差异无统计学意义（P〉0.05）。4倍DTT与2倍体积DTT稀化对痰液溶解状况及痰液中IL-6和TNF-α水平均无明显影响（P〉0.05）。[结论]以3%、4%的高渗盐水雾化吸入20、30 min痰液诱导满意率较高且得到的痰液质量较佳,经过水浴30-40 min,加入2倍或4倍0.1%DTT处理的稀化程度较好。     

染矽尘大鼠早期肺组织病理变化观察

目的探讨大鼠染矽尘早期肺组织病理改变。方法 Wistar大鼠随机分为对照组和15、30、60mg/ml染矽尘实验组,每组42只。一次性气管内注入染尘建立大鼠矽肺模型,每组分6个时间点(1、3、7、14、21、28d)分别取7只大鼠处死,取肺脏称重,福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,普通光镜下观察肺组织病理变化。结果各剂量染尘大鼠各时间点肺组织脏器系数均高于对照组(P<0.05),且随时间延长和染尘剂量增加其增高幅度增大(P<0.05);肺组织肉眼观察可见,随着染尘时间的延长,肺表面逐渐出现颜色变深、体积增大、不规则斑块增多、弹性减弱等症状;HE染色显示,大鼠染尘后28d内,肺组织以炎症反应为主伴发肺间质的弥漫性纤维化。实验大鼠炎症反应程度随染尘剂量的增加加重,在染尘后7～14d肺组织的炎症反应比较明显。肺间质纤维化程度随实验时间的延长及染尘剂量的增加有逐渐加重的趋势。结论矽肺早期炎症反应明显,主要表现为细胞浸润聚集,肺泡间隔增厚,纤维组织增生,肺泡正常组织发生改变。     

矽肺患者和接尘工人诱导痰中炎性细胞和一氧化氮衍生物测定

为探讨矽肺患者和接尘工人肺功能、诱导痰中白细胞和痰液处理后的上清液中NO衍生物含量变化及意义,选择80名矽尘接触工人为接尘组、84名矽肺患者为病例组、30名无矽尘接触史的后勤人员为对照组,进行肺功能测定和痰液诱导,测定诱导痰中一氧化氮代谢产物硝酸盐/亚硝酸盐(NO2-/NO3-)、硝化酪氨酸的含量,并进行炎性细胞分类计数。结果(1)接尘组和病例组白细胞总数显著高于对照组(P<0.05),中性粒细胞数低于对照组(P<0.05),而淋巴细胞数显著高于对照组(P<0.05);对照组、接尘组、病例组的尘细胞数逐步增多,经检验各组间差异有统计学意义(P<0.05)。(2)接尘组NO2-/NO3-水平明显高于对照组(P<0.05),病例组NO2-/NO3-水平明显高于接尘组和对照组(P<0.05);接尘组和病例组硝化酪氨酸水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)FVC、FEV1等肺功能测定结果显示矽肺组<接尘组<对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。提示矽尘暴露人群肺功能随着矽肺病变的进展呈逐渐下降趋势,NO在这... 更多还原     

细胞因子在矽肺发生发展中作用研究进展

尘肺病是中国最严重、发病最多的职业病,其中又以矽肺最为突出.矽肺是一种由游离二氧化硅含量较高的粉尘所引起的以肺组织弥漫性纤维化为主的疾病.目前虽无法用单一的机制来解释矽肺发病机制,然而公认的是在分子水平变化的起始阶段共同具有炎性因子的参与.随着对肺纤维化发生机制研究的不断深入,研究结果证实细胞因子在矽肺早期炎症和纤维化发生发展中起关键作用,是一类重要的炎性因子.现就近几年有关细胞因子在矽肺发生发展中作用研究进展进行综述.     

吸烟与职业接触粉尘对FEV1的影响

目的 探讨吸烟与粉尘对煤矿工人肺功能的影响.方法 选择187名煤矿接尘工人(接尘组)和102名非接尘人员(对照组)进行影响因素同卷调查和第1秒肺呼气量(FEV1)测定.结果 接尘组FEV1影响最大的为接尘时间(标准回归系数为0.2598,OR=2.666.95%可信区间1.450～4.901),其次为年龄、吸烟、体重指...     

呼吸系统疾病的无创检测技术

呼吸系统疾病通常被认为是由呼吸道的炎症引起的.检测气道炎症的方法有多种,纤维支气管镜黏膜活检或支气管肺泡灌洗技术(BAL),能够直接反映气道炎症,准确、可靠,但其对机体创伤较大,操作过程具有一定的危险性,患者的耐受性及可重复性差,因此主要用于科研,在临床上应用很少.