某院结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药基因特征

目的了解某院结核分枝杆菌(MTB)利福平耐药相关基因rpo B及异烟肼耐药相关基因kat G、inh A的突变特征,为耐药结核病的预防和治疗提供科学依据。方法收集83例结核病患者痰标本,分离培养MTB,采用BD960液体法检测利福平、异烟肼耐药性,提取菌株DNA,采用聚合酶链反应扩增rpo B、kat G、inh A全基因,对扩增产物进行测序分析。结果 83株样本中,39株对利福平耐药,51株对异烟肼耐药。耐利福平菌株rpo B基因突变率为97.44%(38/39),531位点突变率60.53%(23/38),526位点突变率23.68%(9/38),32株出现多位点联合突变。耐异烟肼菌株kat G基因突变率为98.04%(50/51),共发现16种突变类型,其中以kat G 315位点突变为主,占70.00%(35/50),1株为kat G与inh A联合突变。结论该院耐多药MTB产生耐药性与rpo B和kat G基因突变相关,检测MTB耐多药相关基因突变可为早期快速诊断耐药结核病提供参考依据。     

基因芯片技术在结核分支杆菌耐药突变基因检测中的应用

目的通过基因芯片检测系统，快速检测临床样品中结核分支杆菌耐药突变情况。方法根据结核分支杆菌标准株H37Rv序列，设计了覆盖rpoB、katG，inhA基因突变区的系列寡核苷酸探针，制作膜芯片，检测临床样品中结核分支杆菌基因突变情况，以此判断耐药结果。结果在305例临床病例中，共检出阳性病例125例，其中阳性敏感病例64例，阳性突变病例61例，阳性率为40．98％，在125例阳性样品中，共发现有8种突变类型，其中10例531L，占7．94％，19例315M，占阳性样品中总数的15．08％。结论PCR与膜芯片杂交技术可临床检测结核分支杆菌对利福平和异烟肼的耐药性，并具有快速、简便、敏感的特点。     

脓肿型分枝杆菌肺部感染胸片和CT表现

目的：探讨脓肿型分支杆菌病的胸部X线和CT影像学表现。方法：回顾性分析18例经临床确诊为脓肿型分枝杆菌感染患者的X线、CT表现。结果：胸片异常征象：斑点状、细网状阴影16例（89%,16/18）,空洞8例（44%,8/18）,肺叶体积缩小8例（44%,8/18）,实变4例（22%,4/18）,支气管扩张8例（44%,8/18）。CT异常征象：支气管扩张12例（66.7%,12/18）,其中表现为柱状支气管扩张9例（50%,9/18）,囊状支气管扩张5例（27.8%,5/18）,静脉曲张型支气管扩张3例（16.7%,3/18）;直径小于10mm结节17例（94.4%,17/18）,树丫征15例（83.3%,15/18）;直径大于10mm结节13例（72.2%,13/18）,肺叶实变6例（33.3%,6/18）,段或亚段实变9例（50%,9/18）,空洞9例（50%,9/18）,肺体积缩小7例（38.9%,7/18）。结论：脓肿型分枝杆菌感染的胸片和CT表现主要为小结节样斑片状、细网状影、支气管扩张和空洞形成。     

145株非结核分枝杆菌对10种药物的耐药性分析

目的了解我院非结核病患者分离的非结核分枝杆菌对10种药物的耐药状况。方法用MB/Bact 240分枝杆菌培养仪和改良罗氏管对患者的多种标本进行分枝杆菌分离培养鉴定,对分离到的分枝杆菌采用绝对浓度法对10种抗结核药物,利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素,利福喷丁、丙硫异烟肼、氧氟沙星、卷曲霉素、卡那霉素和对氨基水扬酸进行药物敏感性试验。结果 1722例患者的标本非结核分枝杆菌培养阳性145株,对10种药总耐药率97.2%（141/145）,单耐药率最高为异烟肼、链霉素和对氨基水扬酸,最低为氧氟沙星。结论非结核分枝杆菌耐药情况十分严重,应加强抗结核药物的耐药性监测;根据药敏试验选择科学有效的化疗方案。     

女性泌尿生殖道支原体感染及耐药性分析

目的通过分析本院2008年女性泌尿生殖道解脲脲支原体(Uu)和人型支原体(Mh)感染状况及耐药性变迁,为临床提供最新的流行病学资料及用药指导。方法采用法国生物梅里埃公司Mycoplasma IST2支原体鉴定及药敏试剂盒,检测本院妇产科送检的女性泌尿生殖道分泌物,分析支原体培养和药敏试验结果等资料。结果 1041例患者总检出率58.6%(610/1041),其中Uu阳性519例(49.9%);Mh阳性10例(1%);Uu+Mh阳性81例(7.8%)。610例患者支原体对9种抗生素敏感性依次为原始霉素(99.8%)、交沙霉素(99.5%)、强力霉素(96.1%)、四环素(93.4%)、克拉霉素(83.8%)、阿奇霉素(75.9%)、红霉素(73.4%)、氧氟沙星(27.9%)和环丙沙星(21.8%)。结论支原体(尤其是Uu)感染已成为女性泌尿生殖系统炎性反应的主要病原体之一,且耐药性变异十分明显,治疗支原体感染应选择原始霉素、交沙霉素、强力霉素等敏感率高的药物及药敏试验显示敏感的药物,喹诺酮类药物耐药率较高,应引起临床重视。     

2004～2008年泌尿生殖道支原体感染流行病学及耐药性变异分析

目的分析本院2004～2008年泌尿生殖道炎性反应患者支原体感染及耐药性变异状况,为临床提供最新的流行病学资料和用药指导。方法采用法国生物梅里埃公司Mycoplasma IST2支原体鉴定及药敏试剂盒,检测本院妇产科和皮肤科送检的泌尿生殖道分泌物,回顾性分析支原体培养和药敏试验结果等资料。结果 5年检测疑似支原体感染患者5 175例,支原体总检出率为43.2%～50.1%;其中解脲脲原体(Uu)、人型支原体(Mh)、混合型(Mh+Uu)检出率分别为35.0%～40.7%、0.6%～1.1%、5.6%～8.9%。Uu在5年间对DOT、JOS、CLA和PRI敏感率非常高且稳定;对TET敏感率较高且呈上升趋势;对ERY和AZI敏感性较弱且呈减弱趋势;对OFL和CIP敏感率最低。Mh在5年间对DOT、JOS和PRI敏感率最高;对TET敏感性较高;对OFL和CIP敏感性较低;对ERY、AZI和CLA敏感率最差。结论近5年,支原体在本地的流行病学变化较小,女性较男性更易感染,且Uu感染维持在1个较高的水平,应引起有关监控部门重视;泌尿道支原体感染经验治疗应使用DOT、JOS和PRI,使用其他药物时应有药敏试验结果作依据。     

风湿性心脏病慢性心力衰竭夜间加重的临床分析

风湿性心脏病(简称风心病)在我国仍是引起充血性心力衰竭的首位病因。收集我院1997年1月～1998年5月风心病110例资料,分析慢性心力衰竭(简称慢性心衰)经临床有效控制后夜间病情复发的病因,现报道如下。1　临床资料110例风心病慢性心衰患者,其中经临床有效控制后夜间病情明显加重8例。男女各4例,年龄29～55岁。根据临床症状、心脏杂音、心脏Ｘ照片和彩色超声心动图等检查明确诊断。8例患者中单纯二尖瓣狭窄1例,二尖瓣狭窄合并关闭不全3例,二尖瓣狭窄合并主动脉关闭不全2例,主动脉关闭不全合并二尖瓣关闭不全1例,二尖瓣狭窄继发肺动脉关闭不全…     

病理组织中的病原学检查对结核病的诊断价值

目的探讨病理组织中的病原学检查对结核病的诊断价值。方法选择2016年5月至2019年5月深圳市第三人民医院收治的190例疑似或确诊为结核病患者的病理标本,将190份标本按照病理形态分为4组:组1为坏死性肉芽肿组(109份),组2为非坏死性肉芽肿组(20份),组3为普通炎症组(45份),组4为非结核病变组(16份)。比较各种病原学检测方法在4组病理标本中检出结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的阳性率,同时比较不同抗结核治疗时间对病原学检查结果的影响。统计学方法采用x²检验或Fisher确切概率法。结果在组1、组2、组3和组4患者的组织病理标本中抗酸染色的阳性率分别为17.4%(19/109)、5.0%(1/20)、4.4%(2/45)、0(0/16),MTB培养的阳性率分别为32.0%(32/100)、4/19、4.8%(2/42)、0(0/16),结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测体系(Mycobacterium tuberculosis/rifampin resistance real-time quantitative nucleic acid amplification detection system,Xpert MTB/RIF)检测的MTB阳性率分别为74.3%(81/109)、15.0%(3/20)、13.3%(6/45)、0(0/16),荧光定量聚合酶链反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测的MTB阳性率分别为63.0%(58/92)、0(0/15)、2.6%(1/38)、0(0/10),实时荧光核酸恒温扩增检测(simultaneous amplification and testing,SAT)的MTB阳性率分别为32.4%(24/74)、0(0/10)、0(0/15)、0(0/10),各种病原学方法检测4组标本中的MTB阳性率差异均有统计学意义(均P<0.05)。Xpert MTB/RIF检测组1标本中MTB的阳性率高于抗酸染色、MTB培养和SAT,差异均有统计学意义(x²=71.016、37.162、35.679,均P<0.01),但与FQ-PCR比较差异无统计学意义(x²=2.517,P=0.112),联合病原学检查MTB的阳性率为85.3%(93/109),高于Xpert MTB/RIF的74.3%(81/109),差异有统计学意义(x²=4.100,P=0.043)。各种病原学检查抗结核治疗时间≤1个月与>1个月的组1病理标本MTB阳性率分别为:抗酸染色为14.3%(7/49)比20.0%(12/60)(x²=0.612,P=0.434),MTB培养为48.9%(22/45)比18.2%(10/55)(x²=10.721,P=0.001),Xpert MTB/RIF为69.4%(34/49)比78.3%(47/60)(x²=1.131,P=0.287),FQ-PCR为55.0%(22/40)比69.2%(36/52)(x²=1.965,P=0.161),SAT为43.3%(13/30)比25.0%(11/44)(x²=2.736,P=0.098)。结论MTB病原学检查结果与典型的结核病病理形态学存在一致性。病理组织的各种病原学检查方法中以Xpert MTB/RIF检出率最高,且不受早期抗结核治疗时间的影响,而联合病原学检查能提高检出率,可在标本量足够时采用。     

荧光定量聚合酶链反应与免疫印迹法检测人巨细胞病毒

目的比较荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）与免疫印迹法（IBT）检测人巨细胞病毒效果。方法分别应用FQ-PCR和IBT检测疑似人巨细胞病毒（HCMV）感染小儿和成人各42例尿HCMV DNA和血清HCMV IgM。结果 42例疑似人巨细胞病毒感染小儿尿HCMV DNA阳性检出率为57.14%,血HCMV IgM阳性检出率为35.71%。前者的诊断阳性率高于后者,差异有统计学意义（χ^2=3.88,P〈0.05）;42例成人尿HCMV DNA阳性检出率为14.29%,血HCMV IgM阳性检出率为71.43%。后者的诊断阳性率显著高于前者,差异有统计学意义（χ^2=28,P〈0.005）;84例患者尿HCMV DNA阳性检出率38.10%,血HCMV IgM阳性检出率48.81%。2种方法检测HCMV活动性感染的差异无统计学意义（χ^2=1.96,P〉0.1）。结论 FQ-PCR检测HCMV DNA是早期诊断小儿HCMV感染的有效的方法;免疫印迹法检测血清HCMV IgM水平对于判断成人HCMV活动性感染具有一定意义;做人群HCMV普查时,免疫印迹法有较好的应用价值。     

93例非结核分枝杆菌肺病患者临床分析

目的 总结非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)肺病临床特点、菌种分布及对常用抗结核药物的药敏情况.方法 收集我院2009年12至2012年12月痰中分离的721株分枝杆菌,初步鉴定分出结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌,并分析其中93株NTM对应的93例患者的临床特点、菌种分布以及对10种抗结核药物药敏结果.结果 我院NTM肺病占全部痰分枝杆菌培养阳性患者的12.9％,该病临床多表现为咳嗽、咳痰90例(96.8％)、咯血40例(43.0％)、气喘30例(32.2％)等,影像学多表现为支气管扩张60例(64.5％)、空洞35例(37.6％)、斑片渗出30例(32.3％)等.NTM菌种包括:脓肿分枝杆菌41例(44.1％)、胞内分枝杆菌16例(17.2％)、堪萨斯分枝杆菌5例(5.4％)、鸟型分枝杆菌5例(5.4％)、戈登分枝杆菌3例(3.2％)、偶发分枝杆菌3例(3.2％),未做基因分型20例(21.5％).药敏试验提示大多数NTM对10种抗结核药物耐药,尤其是脓肿分枝杆菌对10种抗结核药物全部耐药.结论 NTM肺病发病率较高,临床医生应对NTM行菌种基因鉴定及药敏试验以指导治疗,目前对NTM病尚缺乏有效治疗药物,需要研究新型的抗NTM药物.