镁钙离子诱导的人凝血因子Ⅸ、蛋白C的构象变化及其与相应特异单抗的连接状态

用圆二色光谱、荧光光谱及紫外差光谱研究镁钙离子诱导的ＦⅨ、ＰＣ的构象变化并通过蛋白负染电镜及荧光偏振实验观察了各构象与ＦⅨ、ＰＣ特异单抗的连接状况。ＦⅨ、ＰＣ在镁钙离子诱导下，其３种光谱均发生显著变化，并且与缓冲液中的金属离子浓度有关。ＦⅨ、ＰＣ的特异单抗仅与ＦⅨ、ＰＣ的某种特定构象发生连接反应。     

44种牙膏卫生现状的调查

牙膏是人们清洁口腔、保护牙齿的日常必需品,目前国内有关其卫生状况报导甚少。为了保护广大群众的健康,促进我国牙膏质量的进一步提高,1987年4月,我们对44种国产牙膏进行了卫生学检测和评价。材料和方法一、牙膏:按随机原则,先后3次在绵阳城区的五个商店中,抽样44种共计130支牙膏备检。二、检验方法 (一) 细菌:按中华人民共和国国家标准(1985)的《食品卫生检验方法》测定。     

人EGFR配体结合区在Pichia酵母中的表达

目的采用基因工程方法构建基因工程菌制备人EGFR配体结合区蛋白。方法 自人肿瘤细胞SK中获取人EGFR cDNA,构建pPIC9K酵母表达栽体,采用Piehia酵母真核表达系统表达目的蛋白。结果SDS-PAGE及Western-blot结果显示目的蛋白已成功表达。结论在Piehia酵母中成功表达人EGFR配体结合区蛋白。     

转基因羊奶中促红细胞生成素的提纯

目的从pBLG-hEPO转基因母山羊的羊乳中提纯促红细胞生成素(EPO)。方法经过酸沉淀预处理、SPSepharose FF阳离子交换树脂、butyl FF 16/10疏水交换树脂、Superdex 75 26/60分子筛色谱4步分离,从转基因羊乳中纯化出EPO。结果经SDS-PAGE检测,得到的EPO相对分子质量约为32 000,全程回收率为10.1%,ELISA和蛋白质印迹实验证明其具有天然EPO抗原性。结论此工艺可用于快速分离转基因羊乳中EPO。     

EGFR单抗与肿瘤治疗进展

表皮生长因子受体(EGFR)是原癌基因cerbB1的表达产物。通过与其配体结合而表现出生物学效应，其过表达和突变体借助于信号转导使细胞生长失控和恶性化，从而导致肿瘤的发生。基于此优点成为目前肿瘤治疗的新靶点。制备出针对对其的特异性抗体将给肿瘤治疗带来新的希望。     

抗rhEPO单克隆抗体的制备及初步应用

目的 :研制抗人促红细胞生成素的特异性单克隆抗体 (mAb) ,对其生物学特性进行初步鉴定 ,并用于转基因羊乳中重组人促红细胞生成素 (rhEPO)的提纯。方法 :以自制的rhEPO粗品免疫BALB/c小鼠 ,制备抗rhEPO的mAb。以Westernblot和间接ELISA法 ,对所获mAb进行初步鉴定。以纯化的mAb同预活化的Sepharose 4B偶联 ,制得mAb亲和层析柱 ,并用于转基因羊乳中rhEPO的提纯。结果 :获得两株可分泌特异性抗rhEPO的mAb的杂交瘤细胞株 (1E7和 2E6 )。Ig亚类 (型 )的鉴定分别为IgG1和IgG2b ,轻链均为κ型。用Westernblot证实 ,获得的mAb可特异性地识别rhEPO。用自制的免疫亲和层析柱用于转基因羊乳中rhEPO的提纯 ,具有很好的吸附作用 ,回收率达 70 %。结论 :成功地获得两株可分泌特异性抗rhEPO的mAb的杂交瘤细胞。用自制的免疫亲和层析柱提纯转基因羊奶中的rhEPO具有较高的吸附效率     

重组人血管内皮生长因子165在Pichia酵母中的表达

目的：采用基因工程方法构建基因工程菌制备人VEGF165蛋白。方法：自人肿瘤组织中获取人VEGF165 cDNA，构建pPIC9K酵母表达载体，采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白。结果：SDS-PAGE及Westem-blot结果显示目的蛋白已成功表达。结论：在Pichia酵母中成功表达人VEGF165。     

EGF受体与肿瘤治疗进展

单克隆抗体治疗是近几年来兴起的又一项治疗肿瘤的方法,以其独到之处引起人们的关注,应用于临床后亦取得良好的治疗效果。恶性肿瘤一直是威胁人类健康的重要疾病,其五年生存率一直比较低下,因此寻找最佳治疗方法不仅是临床医生努力的方向,也是基础医学工作者努力的方向。单克隆抗     

人脑发育过程中髓鞘碱性蛋白基因的表达

为探索人脑髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）基因表达的时空秩序与髓鞘发生和形成之间关系，采用３２Ｐ－和生物素标记鼠ＭＢＰｃＤＮＡ和地高辛标记人ＭＢＰｃＲＮＡ探针，对发育过程中人脑进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交和原位杂交研究。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点分析结果显示：１６周胎龄脑ＭＢＰｍＲＮＡ表达已明显，Ａ５９０值近２．０／μｇＲＮＡ，随发育逐渐增加，至成年其表达增至９倍（Ａ５９０值为１８／μｇＲＮＡ）。８～２５周胎龄脊髓和延脑切片以及２０、２２和２５周胎龄桥脑、中脑、丘脑、小脑和大脑切片原位杂交结果表明：在８～９周胎龄人脑脊髓前角和近延脑第四脑室底区域中，其散在细胞的核周胞浆内有ＭＢＰｍＲＮＡ表达信号，该阳性细胞比少突细胞大，而且胞浆丰富，它们究竟是神经元或胶质前体仍待鉴定。在２０周胎龄期，ＭＢＰｍＲＮＡ表达在脊髓和延脑区骤增，并沿少突细胞突起延伸呈网状；此期桥脑该基因表达已明显，在其他脑区该表达信号也有散在分布     

转基因山羊乳中EPO活性检测

目的　对转基因山羊乳中 EPO的生物学活性进行检测。方法　用网织红细胞法检测体内生物活性,用ELISA法和 MTT法检测体外生物活性。结果　羊乳中 EPO体内生物学活性明显低于其体外生物学活性。结论推测我们所得的重组EPO的N糖基高分支的比例小及唾液酸化程度偏低,造成其体内生物活性下降。