乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对内皮细胞增殖的影响及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的作用

目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Akt信号转导通路在此过程中的作用。方法低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes。采用MTT法分别检测50、100、200、400μg/ml Exosomes对HUVECs促增殖作用的影响,流式细胞仪测定200μg/ml Exosomes对HUVECs细胞周期的影响,Western blotting检测200μg/ml Exosomes诱导下HUVECs细胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达水平。结果乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes可促进HUVECs细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性。200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24h后,S期细胞比例(27.8%±3.37%)较对照组(15.34%±0.71%)增加(P<0.05),G1/S期细胞比例(2.22%±0.37%)与对照组(4.67%±0.47%)比较下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24、48、72h后,磷酸化ERK表达(0.3378±0.0415,0.4967±0.0511,0.9205±0.0462)与磷酸化Akt蛋白表达(0.4091±0.0361,0.5484±0.0382,0.7496±0.0481)与对照组(磷酸化ERK 0.1836±0.0324,磷酸化Akt 0.2582±0.0215)相比有所增加(P<0.05)。结论乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes能促进HUVECs的增殖,其机制可能与细胞周期改变,以及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的持续活化有关。     

人类基因组计划研究进展与分子病理学

人类基因组计划 (ｈｕｍａｎｇｅｎｏｍｅｐｒｏｊｅｃｔ,ＨＧＰ)是 2 0世纪末生命科学领域的最大科学工程之一 ,对医学亦具有重大的意义。科学上的每一重大进步都和先进技术的引入密不可分。细胞的发现与研究诞生了在医学中占统治地位的细胞病理学 ,那么现代分子生物学与基因工程技术的突飞猛进将给医学带来什么影响呢 ?毋用置疑 ,2 1世纪的医学将由细胞病理学逐步走向子病理学。　　ＨＧＰ已于 1 990年 1 0月在美国正式启动 ,其目的是要阐明人类基因组 (ｇｅｎｏｍｅ)ＤＮＡ约 3× 1 0 9个核苷酸碱基的序列 ,找出全部约 1 0万个基因 ,并确…     

小鼠可移植性肝癌(H615)与骨髓瘤细胞(NSl)染色体核型分析

H615瘤细胞含有正常数量的染色体,其众数为40,G、C显带均未见其结构异常。NSI体外培养细胞株染色体众数为65,有二种标记染色体,即中部着丝点染色体及微小染色体。中部着丝点标记染色体在G、C显带时均能证实是由二条端部着丝点染色体融合而成     

癌症患者血清α_1-抗胰蛋白酶、α_1-酸性糖蛋白和结合珠蛋白的变化

本文采用单向免疫扩散法对100例原发性肝癌、25例肺癌、25例卵巢癌、30例喉癌、87例鼻咽癌、139例良性疾患及60例正常献血员血清α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)、α_1-酸性糖蛋白(α_1-AG)和结合珠蛋白(HP)进行了定量测定,结果表明五类癌症患者血清三种糖蛋白成分均高于正常人和良性疾患,具有显著区别(p<0.001及p<0.05)。应用七类人群进行逐步判别分析,建立判别式,正常人、良性疾患及原发性肝癌的回代符合率在60％以上。这些实验资料均表明对癌症患者,特别是对原发性肝癌患者有较好的鉴别诊断价值     

单克隆抗体与基因探针在肿瘤诊断中的应用

一、肿瘤标志物研究的历史发展:数十年来人们致力于寻找恶性肿瘤所特有的成分。以期应用于肿瘤的诊断,但未能达到预期目的。经研究发现:有些成分虽非恶性肿瘤所独有,但其存在,对某种肿瘤性质的判明却有帮助,可视为肿瘤性质的标志,提出了肿瘤标志物的概念。肿瘤标志物研究的历史,可分为四个阶段:1.1846年本周氏蛋白的     

分子生物学技术在临床病理学中的应用

近年来,分子生物学和免疫学的发展为临床病理学提供了新的手段.重组DNA技术应用于临床病理学,代表了最新的基础研究向临床实验室的过渡,是特殊染色,酶组织化学,电镜,单克隆抗体,免疫组织化学及流式细胞计数器等技术的延伸和发展,构成了目前病理学论断与研究中最为先进而有力     

615小鼠可移植性肝癌(H615)的酶组织化学研究

H615系我国自行培育的一株615小鼠可移植性肝癌,其一般生物学特性类似分化较好的人类肝细胞性肝癌。本文研究其在酶组织化学上的特点,由此了解H615细胞-的代谢特性。实验用皮下接种H615(第35、38代)已二个月的615近交系小鼠,瘤块直径约为1.5～2cm,大部瘤组织尚未出现坏死。取带瘤动物8例及正1常615小鼠5例,同时处死解剖,取小块瘤组织与正常小鼠肝组织并行排列,于液氮中骤冷,恒冷切片(-15℃,8μ),贴于盖玻片上,吹干后保存于冰箱中,共进行了26种酶组织化学染色,其结果如下: 1.其含量较正常肝明显升高的酶有:已糖激酶(Meijar法)、磷酸葡萄糖异构酶(Meijar与     

茶叶有效成分抗肿瘤侵袭转移作用与相关机制探讨

目的：观察茶叶的有效成分表没食子儿茶素没食子酸酯［(-)-epigallocatechin-3-gallate (EGCG)］对人乳腺癌高转移细胞侵袭转移的影响作用及探讨其相关机制。 方法： 用免疫细胞化学法检测MUC1的表达，以人工重组基底膜侵袭小室(Transwell)及明胶酶谱法(PAGE)观察其对人乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231细胞侵袭转移能力的影响。 结果： 茶叶有效成分EGCG能降低MDA-MB-231细胞MUC1表达，明显抑制MDA-MB-231细胞侵袭基底膜的能力和Ⅳ型胶原酶的产生。 结论： 茶叶有效成分EGCG具有明显的抗癌侵袭转移作用，此与降低MUC1的表达相关。     

抗胶原单抗与肿瘤转移

近年来,随着细胞生物学研究技术的迅速发展,对细胞外间质有了更深入的了解,为研究肿瘤转移过程建立了一定的基础,特别是其相应单抗的研制成功,为该研究提供了有力的手段。细胞外间质可分成细胞间质与基底膜两大类型。由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ型胶原,弹力纤维,纤维连接蛋白,蛋白多糖,层粘连蛋白,内皮粘连蛋白及其他糖蛋白组成。它们构成了肿瘤细胞转移的重要屏障。近年对这些间质成分进行了深入研究并制成其特异性单克隆抗体,用以研究肿瘤转移时,细胞外间质成分的改变。其改变主要为两方面:一是恶性肿瘤细胞通过在基底膜上的粘附,癌细胞分泌间质蛋白酶如各型胶原酶,组织蛋白酶B、C、D及纤维蛋白溶酶原激活剂等,加上癌细胞的趋化与运动,进入合适的部位,形成浸润或转移灶。如能阻断上述机理,将有利于肿瘤的控制。二是引起肿瘤周围细胞外间质的反应性增生,其发生的确切机理尚待研究。