同型半胱氨酸诱导培养的人脐静脉内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白1α

探讨同型半胱氨酸是否可诱导人脐静脉内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 1α ,使培养的人脐静脉内皮细胞暴露于不同浓度的同型半胱氨酸 ,采用逆转录聚合酶链反应和免疫细胞化学方法观察其巨噬细胞炎性蛋白 1α的表达。结果发现 ,培养的人脐静脉内皮细胞可表达巨噬细胞炎性蛋白 1α。暴露于同一浓度 (0 .1mmol L)同型半胱氨酸 ,分别孵育 4、8和 16h ,其巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA表达水平分别是对照组的 2 .0 8倍、3.2 6倍和 3.35倍 ;免疫细胞化学发现 ,上述各组巨噬细胞炎性蛋白 1α蛋白表达的平均吸光度值分别是 0 .0 71± 0 .0 0 6、0 .0 81± 0 .0 0 6和 0 .12 8± 0 .0 0 9,均显著高于对照组 (0 .0 4 9± 0 .0 0 5 ,P <0 .0 1)。暴露于不同浓度 (0 .1mmol L、0 .5mmol L和 1mmol L)的同型半胱氨酸 ,孵育 8h后 ,各组巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA表达水平分别是对照组的 2 .0 8倍、4 .35倍和 4 .5 7倍 ,巨噬细胞炎性蛋白 1α蛋白表达的平均吸光度值分别是 0 .0 81± 0 .0 0 6、0 .110± 0 .0 0 9和 0 .118± 0 .0 0 8,均显著高于对照组 (0 .0 4 9± 0 .0 0 5 ,P <0 .0 1)。结果提示 ,同型半胱氨酸可诱导人脐静脉内皮细胞表达高水平的巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA和蛋白。     

辛伐他汀对高脂血症大鼠胸主动脉壁白介素-2、RANTES和趋化因子受体1表达的影响

目的探讨辛伐他汀对高脂血症大鼠胸主动脉壁白介素-2(IL)-2、RANTES和趋化化因子受体(CCR)-1 mRNA和蛋白表达的影响。方法将30只健康8周龄SD雄性大鼠随机分为对照组、高脂饮食组和辛伐他汀组,每组10只。对照组用普通饲料喂养,高脂饮食组用高脂饲料喂养,辛伐他汀组以高脂饮食饲料喂养4 w后,每天以5 mg/kg的辛伐他汀灌胃,并继续给予高脂饮食饲料。两个月后心脏采血处死大鼠,取胸主动脉。采用酶法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量。用HE染色方法观察胸主动脉病理形态学改变,采用免疫织化和RT-PCR方法检测各组动脉壁细胞IL-2、RANTES和CCR-1蛋白及mRNA的表达情况。结果高脂饮食组大鼠血清TC、TG含量明显高于对照组(均P0.01)和辛伐他汀组(均P0.01)。对照组胸主动脉内膜光滑,内皮细胞排列整齐。高脂饮食组动脉内膜脂质浸润,粗糙,隆起,有泡沫细胞形成,细胞排列紊乱,辛伐他汀组介于二者之间。高脂饮食组大鼠动脉壁IL-2、RANTES和CCR-1蛋白及mRNA表达水平均显著高于对照组(均P0.01)和辛伐他汀(均P0.05)。结论高脂饮食能使SD大鼠发生高脂血症和动脉粥样硬化(AS)。高脂血症可能通过诱导大鼠胸主动脉血管壁细胞中IL-2、RANTES和CCR-1的表达引起AS的发生,辛伐他汀可以抑制这一过程。     

老年性皮肤瘙痒症的护理和预防

<正>老年性皮肤瘙痒症是常见的一种皮肤病,多见于60岁以上的老年人,冬季多发,男性高于女性。老年人皮肤分泌功能减退,皮脂腺及汗腺分泌减少,皮肤萎缩变薄,含水量降低,故皮肤干燥,甚至表皮脱落,使皮内神经末梢容易受到刺激而发痒,其瘙痒常为阵发性,以夜间为重,长期搔抓皮肤上出现抓痕、血痂,甚至可能导致皮肤感染[1]。本文通过总结108例老年性皮肤瘙痒症患者的护理和预防措施,现报告如下。     

医用一次性瓶袋可转换型输液器的研制及应用

目前,临床输注液体的包装更新换代,输注液体已换成袋包装,故临床中袋式与瓶式液体(或药物)交替输注存在以下题:①输注袋式液体时输液器不需排气管;②输瓶式液体时输器需排气管。为此,我们研制出一种医用一次性瓶袋可转换输液器,解决了目前临床瓶式输液与袋式输液互相转换出现问     

肾脏雌激素受体亚型表达分布及补肾中药防治肾损害的受体机制

目的:观察雌激素受体α和β在大鼠肾脏中的表达、分布情况,分析补肾中药防治肾损害的受体机制。方法:实验于2000-09/2002-07在河北医科大学生化实验室完成。选用健康雌性SD大鼠45只,按随机数字法分为3组,即正常对照组、肾脏损伤模型组及中药防治组,每组15只。肾脏损伤模型组和中药防治组大鼠每天腹腔注射1mL9g/L的灭菌AlCl3溶液复制肾脏损伤模型,正常对照组注射1mL灭菌生理盐水,每连续注射3d,间隔1d,共计72d。中药防治组大鼠每天灌胃1mL生药含量为2.6g/mL的补肾中药复方煎剂(由淫羊藿、熟地、制首乌、黄芪、当归、郁金、石菖蒲、茯苓和川芎9味中药组成,由石家庄乐仁堂药业有限公司提供,每付生药含量为125g),正常对照组和肾脏损伤模型组灌胃等量自来水。每连续灌胃7d,间隔1d,共计72d。应用免疫组织化学方法检测雌激素受体α和β在各组大鼠肾组织中的表达水平和分布区域,应用放射免疫分析法测定各组大鼠血清雌二醇水平。结果:45只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①雌激素受体亚型在各组大鼠肾组织中的表达和分布情况比较:正常对照组大鼠肾脏皮质和髓质的远曲小管和近曲小管上皮细胞胞浆中都有雌激素受体α和β阳性颗粒,两种受体亚型的髓质反应信号均比皮质强。肾脏损伤模型组大鼠肾脏皮质雌激素受体β反应信号减弱;髓质雌激素受体α反应信号增强。中药防治组大鼠肾水肿基本消失,皮质雌激素受体β反应信号增强至近正常水平,髓质雌激素受体α反应信号降低至近正常水平。②各组大鼠的血清雌二醇水平比较:肾脏损伤模型组大鼠血清雌二醇水平显著低于正常对照组[(19.0±0.6,40.0±0.1)pmol/L,P<0.01],中药防治组大鼠血清雌二醇水平与肾脏损伤模型组相近[(18.0±0.6)pmol/L,P>0.05]。结论:AlCl3导致肾水肿时,肾脏皮质雌激素受体β表达减弱,髓质雌激素受体α表达增强,血清雌二醇水平降低。补肾中药具有雌二醇样作用,通过拮抗皮质雌激素受体β表达减弱和髓质雌激素受体α表达增强而发挥其肾脏保护作用。     

用序列特异性引物多聚酶链反应的方法进行大样本、多基因的多态性鉴定

目的:建立多个基因同时进行多态性分析的序列特异性引物多聚酶链反应的方法,以满足其在临床检验中进行基因多态性鉴定时的应用。方法:实验于2005-10/2006-05于河南省新乡医学院分子生物研究室完成。进行临床普通血液常规检测的患者血样200份(由新乡医学院第三附属医院提供),采用临床血样,提取DNA后采用多聚酶链反应扩增,并以扩增后的样品进行琼脂糖凝胶电泳,以是否出现相应的扩增条带作为基因分型的标准。应用优化后的序列特异性引物多聚酶链反应的方法分析以下基因的多态性:肿瘤坏死因子α-308A/G和-238G/A变异、白细胞介素6-174G/C变异、细胞色素P4502D6(CYP2D6)*10B外显子第188位的C/T变异。并由此优化序列特异性引物多聚酶链反应的方法,以达到应用同一个多聚酶链反应扩增程序,可同时对多个基因、多个临床样本的基因多态性同时进行分析,且基因型清晰,分型快速、准确。结果:①用20 g/L的琼脂糖凝胶电泳可看到每泳道内可有2条或1条扩增产物,其中阳性对照β珠蛋白基因的扩增片段长268 bp,此条带可以出现、减弱或者不出现。②其中肿瘤坏死因子α-308A/G存在G/G和A/G两种基因型;肿瘤坏死因子α-238G/A位点可检测到的基因型有G/A、G/G和A/A3型;白细胞介素6-174G/C变异位点可检测到的基因型均为G/G纯合子;细胞色素P4502D6*10B外显子第188位的C/T位点可检测到的基因型为C/C、C/T、T/T3型。结论:优化后的序列特异性引物多聚酶链反应适合对大样本,多个基因的单核苷酸位点变异进行多态性分析,快速、准确、成本低。     

β-淀粉样前体蛋白mRNA异构体在大鼠组织中差异性表达

β-淀粉样前体蛋白(APP)是细胞骨架蛋白的重要组成部分,具有多种异构体形式,不同的异构体可能具有不同的生物学作用和中间代谢途径并在疾病如阿尔茨海默病(AD)、肌萎缩侧索硬化症等的发生中发挥不同的作用。为此,我们用RT-多聚酶链反应(RT-PCR)检测了APP在大鼠端脑、脊髓和肾脏中的差异表达模式。     

针刺肥胖合并高脂血症大鼠时Bcl-2的变化对肝细胞凋亡的影响

观察针刺肥胖合并高脂血症大鼠时Bcl-2表达的变化对肝细胞凋亡的影响。方法:将50只SD雄性大鼠随机分为正常组(n=10)和高脂组(n=40),正常组用普通饲料喂养;高脂组用自制高脂致肥饲料喂养。造模12周,将高脂组符合肥胖合并高脂血症模型的动物20只再随机分为模型组和针刺组,每组10只。针刺组取足三里穴、内庭穴和天枢穴行针刺治疗。治疗14d,每天1次。观察大鼠体重、体长、Lee’s指数和血脂的变化;用HE染色法,在光镜下观察肝组织形态学变化;运用TUNEL方法检测肝细胞凋亡的情况;通过免疫组织化学方法检测肝组织Bcl-2蛋白表达的变化。结果:针刺组体重、体长较模型组体重明显下降(P<0.01);针刺组与模型组相比TC、TG、VLDL-C含量均显著降低(P<0.01),HDL-C含量显著升高(P<0.01);针刺组大鼠肝细胞凋亡指数则较模型组明显降低(P<0.01);针刺组与模型组比较,肝组织Bcl-2蛋白的阳性率明显升高,差异有显著性(P<0.01)。结论:针刺可以降低肥胖合并高脂血症大鼠的体重和Lee’s指数,起到减肥作用;针刺可以改善血脂代谢紊乱;Bcl-2表达改变在针刺降低肥胖合并高脂血症大鼠肝细胞凋亡中可能有重要作用。     

自体疣植入三角肌治疗扁平疣护理体会

1资料与方法 1.1临床资料36例扁平疣患者,男14例,女22例;年龄8～52岁,平均30岁.病程3个月～4年.皮损主要分布于颜面、颈部及手背等处.31例曾使用过病毒灵、板兰根、无环鸟苷等药物不规则治疗,皮损无改善.