胃癌细胞外泌体调控M2型巨噬细胞极化及对胃癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探究胃癌细胞外泌体调控M2型巨噬细胞极化及对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:差速离心法提取胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901外泌体,透射电镜和Western blot鉴定外泌体,将U937细胞与PMA共孵育诱导U937细胞分化为巨噬细胞的同时分别与PBS、GES-1 exo、MGC-803 exo、SGC-7901 exo、IL-4孵育48 h,流式细胞术检测孵育后各组细胞CD206和HLA-DR表达,qRT-PCR检测CCL17、CXCL8、IL-10、TGF-β、TNF-α、IL-6、IL-1β表达,Western blot检测p-NF-κB、NF-κB、IκBα表达水平,将各组诱导后的U937细胞与MGC-803、SGC-7901共培养后,收集MGC-803、SGC-7901细胞,MTT检测各组细胞的增殖能力,Transwell小室法检测各组细胞的迁移能力。结果:差速离心法提取的外泌体符合外泌体的形态特征,并且在激光共聚焦显微镜下观察到外泌体可被U937细胞摄取,与MGC-803 exo、SGC-7901 exo共孵育后的U937细胞CD206显著高表达,HLA-DR低表达（P＜0.05）,CCL17、CXCL8、IL-10、TGF-β表达显著上调（P＜0.05）,TNF-α、IL-6、IL-1β表达显著下调（P＜0.05）,NF-κB磷酸化水平显著增加（P＜0.05）,IκBα表达显著增加（P＜0.05）,并且与MGC-803 exo、SGC-7901 exo诱导极化后的巨噬细胞共培养组MGC-803、SGC-7901细胞增殖和迁移能力显著增强（P＜0.05）。结论:胃癌细胞能够通过激活NF-κB信号通路促进M2型巨噬细胞极化进而诱导MGC-803、SGC-7901细胞增殖和迁移能力的增强。     

罗汉果醇通过激活AMPK信号通路调控肝细胞癌HepG2 细胞的脂代谢

[摘要] 目的：研究罗汉果醇(MO)对肝细胞癌HepG2 细胞脂代谢的调控作用及其分子机制。方法：采用油酸(OA)诱导肝细胞癌HepG2 细胞脂肪累积,建立脂肪变性细胞模型。运用CCK-8 法检测MO对HepG2 的细胞毒性,筛选其无明显细胞毒性的实验工作浓度。不同工作浓度MO作用后运用油红O染色法观察模型细胞内脂质累积情况,测定细胞内甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）含量。运用高通量转录组测序方法筛选参与脂代谢的关键基因,运用qPCR检测模型及给药细胞SREBP-1c、FASN mRNA的表达、WB法检测p-AMPKα、SREBP-1c、FASN等蛋白的表达水平。结果：运用OA诱导的模型HepG2 细胞内脂质大量累积,TG、TC含量显著升高。OA诱导后参与肝癌细胞脂代谢的关键基因SREBP-1c、FASN mRNA表达升高;p-AMPKα 蛋白表达降低,SREBP-1c、FASN等蛋白的表达显著升高。工作浓度MO干预后,细胞内脂质累积显著减少、TG和TC含量降低,SREBP-1c、FASN mRNA表达降低,p-AMPKα 蛋白表达升高而SREBP-1c、FASN等蛋白的表达明显降低。结论：MO能够通过激活HepG2细胞中AMPK信号通路相关因子SREBP-1c、FASN的表达抑制脂肪酸合成,从而发挥调节脂代谢的作用。     

顺铂分次给药联合多西他赛治疗老年晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的 探讨顺铂分次给药联合多西他赛在晚期老年非小细胞肺癌中的近期疗效及不良反应.方法 将老年非小细胞肺癌患者136例随机分为实验组（69例）和对照组（67例）.两组患者均接受多西他赛方案＋页铂方案化疗,多西他赛剂量均为75 mg/m2d1,顺铂剂量均为75 mg/m2,21d为一个周期,每个患者至少接受两个周期化疗,实验组顺铂采用分次给药法,将顺铂总量分为3d给药完毕,而对照组顺铂则为第1天给药.两个周期后观察两组患者的临床有效率及疾病控制率及早期、延迟性不良反应.结果 实验组的临床有效率为33.33％,对照组为37.31％,差异无统计学意义（P＞0.05）.实验组与对照组的疾病控制率分别为94.20％和95.52％,差异亦无统计学意义（P＞0.05）.早期呕吐的发生率,实验组与对照组分别为37.68％和56.72％,其差异有统计学意义（P＜0.05）.延迟性呕吐发生率,实验组与对照组分别为47.83％和65.67％,差异亦有统计学意义（P＜0.05）.但两组的肌酐增高、转氨酶增高、骨髓抑制、听力下降等不良反应发生率比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 顺铂分次给药联合多西他赛治疗晚期老年非小细胞肺癌疗效好,不良反应较轻,临床上值得推荐使用.     

CVP序贯CHOP方案治疗晚期弥漫大B细胞淋巴瘤的临床疗效

摘要目的比较CVP序贯CHOP方案与CHOP方案治疗晚期弥漫大B细胞淋巴瘤的疗效和不良反应。方法晚期弥漫大B细胞淋巴瘤患者25例,根据临床评估情况分为A组（化疗风险大）10例,B组15例。A组给予CVP序贯CHOP方案治疗,B组给予CHOP方案治疗,共6～8周期。观察疗效、不良反应及生存情况。结果A、B两组总缓解分别为7,11例,缓解状况相似;B组中有2例发生Ⅳ级白细胞减少,并因此调整药物剂量及延长治疗周期,两组其他不良反应情况相似;随访1年后,两组生存状况相似。结论对化疗风险大的晚期弥漫大B细胞淋巴瘤患者可采用CVP序贯CHOP方案治疗,疗效与CHOP方案相当,化疗耐受性更好。     

长春瑞滨联合顺铂治疗蒽环类和紫杉类耐药晚期乳腺癌的临床观察

目的 观察长春瑞滨联合顺铂（NP）治疗蒽环类和紫杉类耐药的晚期乳腺癌的疗效及不良反应.方法 43例蒽环类和紫杉类治疗后失败的晚期乳腺癌患者接受NP方案化疗：长春瑞滨25 mg/m2 d1,8;顺铂20～25 mg/m2 d1～3;每21d为一个周期.患者最多接受6个周期化疗或至疾病进展.结果 43例患者共完成148个周期化疗,中位化疗周期3个周期,均可评价疗效和不良反应.其中完全缓解3例（7.0％）,部分缓解18例（41.9％）,稳定16例（37.2％）,进展6例（14.0％）,总缓解率为48.8％,肿瘤控制率为86.0％.不良反应有骨髓抑制、胃肠道反应、肝肾功能损害及外周神经炎等,多为Ⅰ～Ⅱ级毒性反应,Ⅲ～Ⅳ级毒性反应有白细胞减少、血小板减少及恶心呕吐.结论 NP方案治疗蒽环类和紫杉类耐药的晚期乳腺癌疗效较好,其不良反应可以耐受,可推荐作为耐药晚期乳腺癌的解救方案.     

Ⅱ~Ⅲ期结肠癌患者DNA错配修复状态与其临床特征及预后的关系

目的：分析Ⅱ~Ⅲ期结肠癌患者DNA错配修复(MMR)的状态与患者临床特征及预后的相关性。方法选取2007年1月至2010年6月我院肿瘤内科收治的308例行肿瘤根治术Ⅱ~Ⅲ期结肠癌患者的组织标本,以免疫组织化学法检测MLH1、MSH2、MSH6、PMS2的表达,将其结果分为MMR缺失(dMMR)组及MMR完整(pMMR)组,比较两组患者的临床特征及预后,并采用Cox比例风险模型分析MMR状态与结肠癌预后的相关性。结果本组结肠癌dMMR的发生率为20.8%(64/308),pMMR为79.2%(244/308)。dMMR组患者中,年龄≤60岁、Ⅱ期、低分化癌、近端结肠癌及含黏液分泌癌患者的比例较pMMR组显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。dMMR组患者的复发转移率及病死率分别为18.8%(12/64)、12.5%(8/64),明显低于pMMR组的31.6%(77/244)、23.0%(56/244),差异均有统计学意义(P<0.05);dMMR组患者的5年无病生存率及5年总生存率分别为82.8%(53/64)、87.5%(56/64),明显高于pMMR组的69.3%(169/244)、77.0%(188/244),差异均有统计学意义(P<0.05)。经Cox比例风险模型分析结果提示,结肠癌MMR状态是影响患者无病生存时间及总生存时间的一个独立因素(P<0.05)。结论结肠癌不同MMR状态有着不同的临床特征,dMMR更多发生在年龄≤60岁、Ⅱ期、低分化癌、近端结肠癌及含黏液分泌癌的患者中,其可作为预测结肠癌预后较好的一个标志物。     

山奈酚通过调控miR21抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖的研究

摘要 目的：研究山奈酚(Kaempferol, KA)对非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法：运用CCK-8细胞活力检测法研究不同浓度的山奈酚对非小细胞肺癌A549细胞存活率的影响,筛选给药浓度;将A549细胞分为对照组及药物组,考察不同浓度山奈酚对A549细胞中miR21表达的影响;运用miR21 precursor转染A549细胞使miR21在A549细胞中高表达,不同浓度山奈酚给药作用后运用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR21、c-Myc、Cyclin D1 mRNA的表达水平,Western Blot法检测PTEN、p-AKT(Thr308)、c-Myc、Cyclin D1等蛋白的表达。结果：不同浓度山奈酚对非小细胞肺癌A549细胞增殖均具有一定的抑制作用;30 、60 μmol/L的山奈酚给药作用24h均能够降低A549细胞中miR21的表达,结果具有统计学意义;运用miR21 precursor转染A549细胞后,c-Myc、Cyclin D1 mRNA的表达水平显著升高,miR21、p-AKT(Thr308)等蛋白的表达升高,PTEN蛋白表达降低,不同浓度的山奈酚给药作用均能降低miR21, c-Myc、Cyclin D1 mRNA的表达及p-AKT(Thr308)、 c-Myc、Cyclin D1等蛋白的表达,升高PTEN蛋白表达。结论：山奈酚能够通过调控miR21/PTEN/AKT信号通路抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖。     

乳腺癌患者婆罗双树样基因4表达情况及PTEN/AKT/mTOR通路对乳腺癌阿霉素耐药性作用研究

目的探讨乳腺癌患者婆罗双树样基因4(SALL4)的表达情况,以及PTEN/AKT/mTOR通路对乳腺癌阿霉素耐药性的作用。方法选取海南省人民医院自2010年6月至2022年6月收治的90例乳腺癌手术患者为研究对象并提取患者乳腺癌组织及癌旁组织。采用免疫组织化学法检测乳腺癌组织的SALL4表达情况,计算阳性表达率。采用Western Blot和荧光定量聚合酶链反应法检测SALL4蛋白表达和mRNA表达。采用阿霉素处理人乳腺癌细胞MCF-7、其阿霉素耐药细胞MCF-7/ADR以及在MCF-7/ADR细胞中沉默SALL4构建的shSALL4-MCF-7/ADR细胞三种细胞,采用MTT法检测处理24、48 h后的IC50。采用Western Blot法检测MCF-7、MCF-7/ADR、shSALL4-MCF-7/ADR细胞的PTEN、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR蛋白相对表达量。比较乳腺癌及癌旁组织中的SALL4表达水平,不同病理特征乳腺癌患者的SALL4表达阳性率;分析SALL4对乳腺癌细胞阿霉素耐药性及PTEN/AKT/mTOR通路的影响。结果90例患者中,SALL4表达阳性34例,阳性表达率为37.78%(34/90)。乳腺癌组织中SALL4蛋白相对表达水平和SALL4 mRNA相对表达水平均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、病理类型、组织学分级、肿瘤大小及雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体、Ki67表达患者的SALL4表达阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);有淋巴结转移患者的SALL4表达阳性率高于无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。阿霉素处理24、48 h后的MCF-7/ADR细胞的IC50均高于MCF-7细胞,差异有统计学意义(P<0.05);在MCF-7/ADR细胞中沉默SALL424、48 h后的shSALL4-MCF-7/ADR细胞的IC50均较MCF-7/ADR细胞降低,差异有统计学意义(P<0.05)。MCF-7/ADR细胞的PTEN蛋白表达低于MCF-7细胞,p-AKT和p-mTOR蛋白表达高于MCF-7细胞,差异有统计学意义(P<0.05);沉默SALL4后,shSALL4-MCF-7/ADR细胞的PTEN蛋白表达升高,高于MCF-7/ADR细胞,p-AKT和p-mTOR蛋白表达下降,低于MCF-7/ADR细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SALL4在乳腺癌组织中的表达高于癌旁组织,且与淋巴结转移明显相关。沉默SALL4可抑制乳腺癌细胞的增殖活性,降低阿霉素的耐药性,且SALL4对乳腺癌细胞阿霉素耐药性的影响与PTEN/AKT/mTOR通路有关。     

PD-1基因多态位点rs2227982和rs10204525与肺癌关联性分析

目的:PD-1基因是肿瘤免疫调节的关键靶点，本研究探讨PD-1基因的多态性位点（rs2227982 和rs10204525）与肺癌发生的关系。方法:应用病例对照研究的方法，收集肺癌患者302例和健康对照320例，采用Taqman Genotyping方法对收集的样本进行基因分型，并分析其与临床特征关系。结果:发现携带rs2227982 C等位基因，增加肺癌发病风险［OR=1.31,95%CI（1.03~1.64）］（P=0.019），基因型分析发现在相加性模型(additive model)［OR=1.30，95%CI（1.04~1.62）］和隐性模型(recessive model)［OR=0.62,95%CI（0.42~0.97）］中与肺癌发生具有相关性。进一步通过调整吸烟、年龄和饮酒的影响后，rs2227982基因型仍与肺癌发生显著相关［OR=1.38，95%CI（1.08~1.77）］,P＜0.001。但rs2227982基因型与肺癌的病理类型和临床分期无关联,研究结果未发现rs10204525基因型与肺癌发生相关。结论:PD-1基因多态性与肺癌发生相关，rs2227982-CC基因型人群的肺癌发病率高于rs2227982-CT和rs2227982-TT基因型，通过多中心及大样本的验证，可作为潜在的遗传易感性分子标记。     

阿司匹林对人胶质瘤H4细胞株细胞周期的影响

［摘要］目的研究阿司匹林对人胶质瘤H4细胞株细胞周期的影响,探讨阿司匹林抗肿瘤的作用机制。 方法采用噻唑蓝（ MTT）法检测阿司匹林对人胶质瘤H4细胞株的增殖抑制作用。采用流式细胞仪检测H4细胞周期分布。Annexin V FITC/PI双染法检测H4细胞凋亡。Western blotting法检测阿司匹林处理前后p21和p27蛋白表达的变化。结果阿司匹林可抑制H4细胞增殖,呈时间和剂量依赖性;8 mmol&#8226;L 1阿司匹林组H4细胞的G0/G1期比例较对照组明显增加,诱导细胞凋亡,同时上调p21和p27蛋白的表达。结论阿司匹林可引起人胶质瘤H4细胞株周期阻滞及诱导细胞凋亡。上调p21和p27蛋白表达进而诱导细胞周期的阻滞可能是其作用机制之一。