防癌茶方3种中药多糖及其复合多糖的抗氧化活性研究

目的 提取枸杞多糖(LBP)、黄芪多糖(APS)、红枣多糖(ZJP),混合制成复合多糖(PM),研究3种多糖及复合多糖的抗氧化作用.方法 进行DPPH自由基清除、超氧阴离子自由基清除、羟基自由基清除能力检测.建立H2Q2氧化损伤的人正常肝细胞(L-Q2)和人肝癌细胞(HepG2)模型,多糖与损伤细胞共孵育后使用MTT法检测细胞活力,评价多糖对细胞抗氧化损伤活性.H2O2氧化损伤L-Q2和HepG2细胞后检测丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性.结果 4种多糖均具有一定的抗氧化活性,但弱于相同浓度的抗坏血酸(VC).在H2Q2氧化损伤的细胞模型中,复合多糖显示了在较低浓度即具有良好的保护作用,在质量浓度分别为80 μg/mL和160μg/mL时,L-Q2细胞和HepG2细胞存活率最高.4种多糖均能显著降低氧化损伤细胞的MDA水平,细胞SOD和GSH-Px活力均显著升高.结论 枸杞多糖、黄芪多糖、红枣多糖及其复合多糖均具有一定的抗氧化作用,较低浓度的复合多糖对氧化损伤的细胞有更好的保护作用.     

对叔丁基杯[4]芳烃酸偶合低相对分子质量聚乙烯亚胺作为非病毒转基因载体的体外研究

目的合成对叔丁基杯[4]芳烃酸偶合低相对分子质量聚乙烯亚胺聚合物作为非病毒转基因载体,并评价其毒性、压缩DNA的能力,携带报告基因转染细胞的能力。方法采用新方法合成对叔丁基杯[4]芳烃酸偶合聚乙烯亚胺聚合物,通过核磁共振方法表征。将合成的新聚合物与DNA混合,得到新聚合物/DNA复合物,用琼脂糖电泳试验测定不同N/P比值形成复合物时对质粒DNA电泳的阻滞情况,评价其压缩DNA能力。透射电镜法检测复合物的大小,MTT法检测其对细胞的毒性作用,使用新聚合物携带报告基因转染细胞,并与PEI25000比较转染率。结果新聚合物压缩质粒DNA的能力随N/P比值增大而增强,在N/P比为6时可以完全阻滞质粒DNA的电泳,在N/P比为60时,复合物粒径约291 nm,复合物的表面电荷约14.6 m V。细胞毒性试验表明新聚合物与PEI25000相比毒性明显下降,携带报告基因转染MCF-7细胞转染效率与PEI25000相近。结论对叔丁基杯[4]芳烃酸聚乙烯亚胺新聚合物具有较强压缩质粒DNA能力,对细胞毒性低,转染效率高,是一种可应用于基因治疗的新型非病毒载体。