柯萨奇病毒B3的多克隆抗体制备

目的制备柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)的多克隆抗体。方法针对CVB3基因的VP1区设计特异性引物,RT-PCR扩增VP1基因并将其克隆到pGEX-6p-1中,经IPTG诱导表达后,以GST-VP1融合蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。采用ELISA、Western blot以及间接免疫荧光检测多克隆抗体的效价和特异性。结果 ELISA检测血清的效价不低于1∶64 000,Western blot和间接免疫荧光显示该抗体具有良好的特异性。结论成功制备了效价较高的CVB3多克隆抗体,可应用于CVB3蛋白的检测。     

柯萨奇病毒B3的TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

目的:建立一种检测柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3)的实时荧光定量RT-PCR方法,为临床CVB3的快速、准确检测提供一种新的方法。方法:针对CVB3基因的VP4区和管家基因β-actin的核苷酸序列分别设计了特异性的引物和TaqMan荧光探针,以重组质粒pMD18-T-CVB3为标准品,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并构建CVB3的荧光定量RT-PCR标准曲线。结果:建立的方法在1.0×101～1.0×108copies/μl模板范围内具有良好的线性关系(r2>0.999),扩增效率高于98.0%,至少可检测10 copies/μl的阳性标准品。用CVB3感染HeLa细胞来模拟实际样品,灵敏度可达到1.0×101copies。结论:建立的荧光定量RT-PCR具有较高的敏感性、特异性和重复性,可作为CVB3的快速诊断方法,为CVB3感染的临床治疗提供快速可靠的诊断依据。     

大剂量异烟肼中毒致癫痫持续状态8例

我院自1993年3月～1995年3月，共收治30例异烟讲中毒，其中8例致癫病持续状态，均抢救成功，现报告如下。1一般资料8例中男2例，女6例。年龄18～54岁。既往否认有癫病病史及精神病病史。有肺结核病史5例，均系统抗结核治疗6个月～12个月痊愈停药。服毒量sog～且5．09其中2例混合服用维生素B5400mg，1例混合国用安定250mg。全部患者均出现全身反复抽搐，人院时昏迷5例，入院后相继出现意识丧失3例。伴尿便失禁及舌咬伤4例。口吐粉红色泡沫痰．双防病布中小水泡音5例。球结膜充血，水肿6例，5例来稍血白细胞升高，6例肝功异常及心电图示表性…     

组织芯片在法医病理学教学中的应用

组织芯片技术虽然出现较晚,但至今已经在基础医学研究、药物研发、疾病诊断等各个领域有了广泛应用.鉴于其突出的优点,如果把这一新技术应用到法医病理学教学中,必然会起到良好的效果.就传统法医病理学教学切片应用中存在的问题、组织芯片技术的优势及其在法医病理学教学中的应用前景等问题进行了初步探讨.     

高迁移率族蛋白1在人类心肌梗死后的表达

目的 通过应用人心肌梗死标本,研究心肌梗死后高迁移率族蛋白1(High-mobility group box 1,HMGB1)的表达.方法 根据心肌梗死时间,将标本分为心肌梗死<1 d组、1～3 d组和3～7 d组,另取正常标本设为对照组.应用免疫组化方法检测HMGB1的表达,并用Image-Pro Plus图像分析系...     

案例教学法在法学专业法医物证学教学中的应用

法医物证学是就涉及法律问题的生物性检材进行检验,解决个人识别和亲权鉴定问题的法医学分支学科,是法医学研究的主要内容之一。由于法医物证学涉及医学、生物学、生物化学、分子生物学、免疫学、物理学、化学等多学科内容,而这些学科所涵盖的知识并不在法学专业学生掌握范围之内,因此在教学中难以提高学生学习的主动性。在传统讲授的基础上采用了案例教学法,发现案例教学法可有效激发学生的学习兴趣,培养思维能力,提高其创新能力、理论联系实际的能力,培养了学生分析问题、解决问题的能力,实现了学与用的结合。