不育相关泛素特异性蛋白酶USP26的分子克隆及活性分析

目的 对克隆泛素特异性蛋白酶26(ubiquitin-specific protease 26,usp26)基因进行表达和活性测定.方法 采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),从小鼠全血中扩增获得usp26基因并测定序列.将基因片段与pGEX-6p-1拼接,应用异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)使蛋白表达并利用Ub-Met-β-gal鉴定活性.用多重比对方法分析人类、小鼠及褐家鼠usp26基因编码氨基酸序列的差异.结果 本实验克隆出usp26基因.构建出pGEX-usp26质粒,该质粒表达出GST-USP26结合蛋白并测得其活性.三个种属含有相同的赖氨酸结构域(Cys box)与组氨酸结构域(His box)特征部位氨基酸.结论 usp26基因克隆并表达成功,完成活性测定,为进一步探索usp26在男性不育机制方面的作用提供了一种活性研究方法.     

阿司匹林和氯吡格雷抵抗机制及应对方略

随着 CURE,CREDO 研究结果的公布,阿司匹林和氯吡格雷双联抗血小板成为治疗冠心病和经皮冠状动脉介入（percata-neous coronary intervention,PCI）术后长期抗血小板治疗是一种重要的治疗策略。然而,这一策略最近又暴露出了很多问题,在临床上有部分患者接受上述双联抗血小板药物治疗后仍有心肌梗死,猝死等心血管恶性事件的发生。因此,正确认识和处理阿司匹林和氯吡格雷抵抗具有重要的临床意义。     

医院信息化:临床决策支持系统构建

临床决策支持系统是医院信息化的一部分,本文提出一种基于电子病历的冠心病临床决策支持系统,对系统的结构及功能进行设计,包括前端显示、数据库模块、服务器功能模块,介绍系统的工作流程。通过该系统可以返回与待诊治病例相似度高的已治愈病例,不仅有助于医生实现个性化诊疗,同时对临床路径的发展具有推动作用。     

大鼠心脏移植物排斥反应时心肌瞬时外向钾电流与心肌细胞动作电位变化的研究

目的:通过复制大鼠心脏移植模型,研究心肌瞬时钾电流在心脏移植物排斥反应时的变化,及动作电位变化。方法:复制大鼠腹部心脏移植模型,对照组(n=20)为Lewis-Lewis同基因移植,实验组(n=20)为Brown Norway-Lewis异基因移植。于移植后第2~4天处死大鼠,取心脏移植物进行病理检查并利用全细胞膜片钳技术记录心肌细胞动作电位(AP)、心肌瞬时外向钾电流(I_(to))及内向整流钾电流(Ik_1)。结果:大鼠腹部心脏移植模型复制成功,组织学可见对照组心脏移植物在移植后无明显排斥反应,而实验组在移植后第2、4天有轻度到中重度排斥反应;在移植后第2天,两组心肌细胞瞬时外向钾电流(I_(to))密度无明显差异;第4天,实验组较对照组Ito密度显著下降,内向整流钾电流(Ik_1)显著下降(P0.05)。在移植后第2、4天,实验组较对照组心肌细胞动作电位时程(APD)均显著延长(P0.01)。结论:在大鼠心脏移植物排斥反应发生时,心肌细胞APD明显延长,I_(to)及Ik_1密度均显著下降。     

浅析医用加速器辐射剂量测量仪的现状及发展

医用加速器是放射治疗肿瘤的主要仪器,其输出剂量的准确性对临床治疗肿瘤具有重要意义.本文分析比较几种周内常用的医用加速器的辐射剂量测量仪,论述了不同辐射剂量测量仪的工作原理、功能特性及优缺点,不同辐射剂量测量仪的综合应用与研究进展,为放疗基础和临床治疗的安全准确性提供了理论依据.     

心房颤动犬能量代谢变化及曲美他嗪干预研究

目的 研究慢性心房颤动(房颤)犬心房能量代谢的变化,探讨曲美他嗪对房颤能量代谢和内皮功能的影响.方法 18只健康杂种犬,随机分为窦性心律组、心房起搏组和曲美他嗪组,每组6只犬.心房起搏组以400次/min快速起搏心房6周,建立房颤犬动物模型;曲美他嗪组给予曲美他嗪5 mg·kg-1·d-1口服,随后以400次/min快速起搏心房6周.采用高效液相色谱测定心肌组织磷酸肌酸(CrP)、三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)含量,计算总腺苷酸池(TAN);用Western blot定量、免疫组化定性检测左房内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达,酶联免疫吸附定量检测血浆血管性血友病因子(vWF)含量,采用硝酸还原酶法测定血浆NO2-/NO3-(NOx)含量.结果 与窦性心律组相比,心房起搏6周后,心房肌CrP(P<0.01)和CrP/ATP(P<0.05)显著降低,而ATP、ADP、AMP和TAN无明显变化(P>0.05),内皮细胞功能标志物血浆vWF明显增高,NOx降低,心房eNOS蛋白表达减少.曲美他嗪治疗6周,心房肌CrP、CrP/ATP、ATP、ADP、AMP和TAN差异均无统计学意义,但eNOS蛋白表达上调(P<0.05),血浆vWF含量降低(P<0.01),NOx增加(P<0.05),内皮细胞功能改善.结论 房颤早期可出现能量代谢失衡,但随着持续时间延长,能量供求能重新达到平衡.曲美他嗪对房颤能量代谢无明显影响,但能通过一氧化氮途径改善内皮细胞功能.     

慢性快速心房起搏心房颤动犬内皮型一氧化氮合酶mRNA表达变化的研究

为研究慢性快速心房起搏心房颤动(简称房颤)犬模型中心内膜内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达的变化,探讨其与心房结构重构、血栓形成的关系。13只健康犬随机分为假手术组和起搏组,应用埋藏式高频率心脏起搏器快速起搏心房(400次 /分) 6周,取左、右心房,左、右心耳及主动脉内膜。通过逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR),以β actin为内参照,测定犬心内膜eNOSmRNA表达的变化,同时检测血浆NO代谢产物硝酸盐 (NOx)的含量。结果:正常犬心脏eNOSmRNA表达存在差异,左房、左心耳明显高于右房、右心耳;起搏 6周后左房、左心耳eNOSmRNA表达起搏组明显低于假手术组,而右房、右心耳、主动脉无明显差别,血浆NOx起搏组亦明显低于假手术组。结论:正常犬心脏eNOS基因表达是不平衡的,左房明显高于右房。房颤犬eNOSmRNA表达降低可能是心房结构重构,血栓形成的重要因素之一。     

心房颤动患者左心房血栓形成的可能机制研究

目的研究慢性心房颤动(房颤)患者心房内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)蛋白表达和血浆一氧化氮(NO)、PAI-1、血管性血友病因子(vWF)含量的变化，探讨房颤血栓形成的可能机制。方法30例风湿性心脏病二尖瓣病变接受外科手术者，分为窦性心律组、阵发性房颤组和慢性房颤组，手术时取左右心房组织各100mg，通过Western blot检测eNOS和PAI-1蛋白表达数量，免疫组织化学方法检测蛋白表达位置，酶联免疫吸附双抗体夹心法检测血浆PAI-1和vWF水平，硝酸还原酶法测定血浆NO浓度。结果慢性房颤组和阵发性房颤组左心房eNOS蛋白表达明显下凋，PAI-1蛋白表达上凋，右心房无显著变化。慢性房颤组血浆vWF明显高于阵发性房颤组，阵发性房颤组明显高于窦性心律组；慢性房颤组和阵发性房颤组血浆PAI-1明显高于窦性心律组，NO明显低于窦性心律组。结论房颤能引起左心房心内膜功能受损，导致抗血栓物质eNOS蛋白表达下调，促血栓物质PAI-1蛋白表达上调，血栓形成与溶解平衡失调，这可能是房颤左心房血栓形成的重要原因。     

心肌声学造影在冠脉微循环病变中的临床应用

冠状动脉微循环功能障碍可发生于多种心血管疾病,且临床预后不良,准确评价冠脉微血管功能状态对疾病的诊断、治疗及预后评估具有重要意义。心肌声学造影是一种非侵入性成像新技术,能够在床旁快速准确评估心肌微循环灌注,具有较高的临床应用价值。本文将对心肌声学造影在冠脉微循环病变中的临床应用进展作一综述。     

同期实施不停跳冠状动脉旁路搭桥及肺叶切除术患者的围手术期护理

目的总结同期实施不停跳冠状动脉旁路搭桥及肺叶切除术患者围手术期的护理经验。方法回顾性分析2000年3月-2009年11月本院收治的10例肺部肿瘤合并冠心病同期实施不停跳冠状动脉旁路搭桥及肺叶切除术患者的临床资料,并总结护理要点。结果 10例患者术程顺利,手术时间4.2-7.9h,平均(5.9±1.5)h;住院天数12-34d,平均(20.0±9.2)d;术后发生心房颤动3例,低心排综合症1例,无1例死亡。所有患者心肺功能恢复良好,均痊愈出院。结论术前做好心理护理、功能锻炼和呼吸道准备,术后严密监测病情的变化,及时发现并发症并协助医生处理,是同期实施不停跳冠状动脉旁路搭桥及肺叶切除术取得成功的关键。