病原微生物胞内寄生机制的研究进展

近年来随着微生物学和免疫学的发展,病原菌胞内寄生的研究越来越受到广泛的重视。现对病原微生物胞内寄生的侵袭途径、胞内生境以及不同病原体胞内生存致病的特点,以及近年来国内外的主要研究进展做一综述。     

25OH-维生素D和大内皮素可增加糖尿病患者冠心病风险

目的本研究入选心血管疾病的高危人群,并将该人群分成伴糖尿病、伴前期糖尿病和不伴糖尿病三组,观察患者外周血维生素D与内皮素(ET)水平的关系,以及二者与冠心病的关系。方法入选2017年1月至12月来阜外医院就诊的有至少一个心血管危险因素的患者1747例,根据糖尿病状况将患者分成三组,即非糖尿病组、糖尿病前期组和糖尿病组。测定外周血25OH-维生素D(25OH-Vit D)与大内皮素(Big ET-1)水平,完善患者基本临床资料和诊断,进行相关统计学分析。结果糖尿病患者外周血25OH-维生素D的水平最低,为18.9 ng/ml(P0.001),而糖尿病前期和非糖尿病患者的25OH-维生素D水平无差异(22.2ng/ml和22.7 ng/ml,P=0.346)。糖尿病患者外周血Big ET-1水平为0.31 pmol/L,显著高于糖尿病前期患者和非糖尿病患者(0.27pmol/L和0.21 pmol/L,P0.01)。25OH-维生素D严重缺乏的患者伴有高Big ET-1水平(0.38 pmol/L),25OH-维生素D水平不足和缺乏的个体也伴有Big ET-1水平的轻度升高。进一步相关性分析发现25OH-维生素D和大内皮素水平在总体、糖尿病、糖尿病前期和非糖尿病不同血糖水平受试者中均显著负相关。通过Logistics回归分析发现,25OH-vit D和Big ET-1水平均异常可使冠心病风险增加2.7倍(P0.001),有一项水平异常者冠心病风险增加1.4倍(P=0.009)。结论不同糖尿病发展状态下外周血25OH-维生素D和大内皮素水平有显著差异,且二者具有显著关联性。25OH-Vit D和Big ET-1水平有一项以上异常可显著增加冠心病风险。     

pcDNA3转染HPV16E6基因对人宫颈癌细胞C33A细胞生长及周期的影响

目的 探讨HPV16E6对宫颈癌C33A细胞生长增殖的影响.方法 通过脂质体法将HPV16E6基因稳定转染宫颈癌C33A细胞,RT-PCR及Western blot分别检测转染细胞中HPV16E6 mRNA和蛋白表达水平,流式细胞仪检测HPV16E6基因转染对C33A细胞生长增殖与细胞周期的影响.结果 稳定转染获得了稳定表达pcDNA3-HPV16E6质粒的C33A细胞克隆(C33A-E6细胞,即pcDNA3/HPV16E6/C33A组)及稳定复制空载体质粒的细胞克隆(C33A-P细胞,即pcDNA3/C33A组),并将未转染的C33A细胞作为对照组.pcDNA3/HPV16E6/C33A组细胞的生长速度比pcDNA3/C33A组和对照组明显加快(P<0.05).在转染了HPV16E6基因的C33A细胞中,其DNA合成前期G1和静止期G0(G0/G1期)细胞百分率(39.3%)明显低于pcDNA3/C33A组(53.7%)和对照组(55.4%)(P<0.01);而处于S期细胞的百分率(38.3%)、DNA合成后期G2及分裂期M的细胞百分率(G2/M:32.9%),均明显高于pcDNA3/C33A组(S:29.4%;G2/M:17.0%)和对照组(S:28.0%;G2/M:16.6%)(P<0.01).pcDNA3/C33A组和对照组细胞周期的各期分布无明显差异(P>0.05).结论 HPV16E6可能通过某种途径参与了C33A细胞的周期调控,促进细胞分裂,从而促进C33A细胞的增殖.     

NDM1基因常规PCR与荧光定量PCR检测方法的建立及其检测结果比较

目的：建立NDM1基因常规PCR和荧光定量PCR（FQ-PCR）检测方法,并对其检测结果进行比较。方法：设计3对NDM1基因常规PCR与FQ-PCR引物,建立常规PCR与FQ-PCR反应体系和条件,比较2种检测方法的特异性、灵敏度和对模拟临床样品的检测效果。结果：成功建立NDM1基因常规PCR和FQ-PCR检测方法;特异性检测,常规PCR与FQ-PCR检测7种常见病原菌均为阴性;灵敏度检测,常规PCR检测限为10⁶ mL^-1 ,FQ-PCR检测限为10⁴ mL^-1;模拟临床样品检测,常规PCR和FQ-PCR检测结果一致。结论：常规PCR与FQ-PCR均有很好的特异性,FQ-PCR灵敏度比常规PCR高100倍。     

白色假丝酵母菌及其细胞壁蛋白质组学的研究进展

白色假丝酵母菌(Candida albicans)是人类正常的微生态共生菌,近20多年来,由于器官移植免疫抑制剂和广谱抗菌药物的使用、癌症放疗化疗的增多、各种生物装置的体内置入和导管的留置、广谱抗菌药物的滥用和艾滋病的流行等,使得免疫功能低下者不断增多,深部真菌感染作为一种并发病,感染率大幅上升,已成为这些疾病患者死亡的主要原因.     

Ring-Box 1基因负调控抗病毒天然免疫的初步研究

目的研究Ring-Box 1基因(RBX1/ROC1)对视黄酸诱导基因-I(retinoic acid inducible gene I,DDX58/RIG-I)抗病毒感染信号通路功能的影响,寻找抗病毒治疗的潜在靶标。方法利用PCR扩增RBX1/ROC1基因,将其插入p CDNA3载体,并且通过免疫印迹检测质粒在细胞中的表达;利用荧光素酶报告基因检测RBX1/ROC1基因对DDX58/RIG-I信号通路的影响。结果本研究成功构建Flag-RBXI/ROC1真核表达载体并在HEK293细胞中得到了表达;通过荧光素酶报告基因分析发现RBX1/ROC1基因抑制DDX58/RIG-I信号通路。结论 RBX1/ROC1是宿主天然免疫DDX58/RIG-I抗病毒感染信号通路的负调控分子,为寻找抗病毒靶点打下基础。