HBP、IL-6、 WBC对细菌性尿路感染的诊断价值

目的:研究尿液中肝素结合蛋白(HBP)和白介素6(IL-6)及白细胞计数(WBC)对细菌性展路感染(UTI)的辅助诊断价值。方法:将我院2017年10月~2018年10月期间治疗的50例展路感染患者作为研究组A,并选择50例非尿路感染,但出现其他疾病感染患者作为研究组B,同时选择我院同期健康体检者50例作为对照组,观察三组入选者HBP、IL-6、WBC水平,并记录研究组A患者治疗前后情况,同时分析三项指标的诊断效能。结果:三组患者在IL-6上无差异,研究组A患者治疗前后IL-6无差异,P>0.05,研究组A在HBP、WBC上高于研究组B、对照组,而HBP、WBC在治疗1周、出院时均低于入院时,差异有统计学意义,P<0.05。HBP的AUC为0.745,P值为0.000,cut-off值为63.21,YI为0.425;IL-6的AUC为0.542,P值为0.115;WBC的AUC为0.796,P值为0.000,cut-off值为115.69,YI为0.412。结论:对于细菌性展路感染患者,可实施HBP、WBC进行检测,有利于临床判断患者病情,并及时采取治疗措施,值得应用。     

实时荧光定量PCR检测沙眼衣原体的研究

目的采用TaqMan探针建立检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法。方法根据沙眼衣原体外膜蛋白A的基因（ompA）序列设计引物和探针,以克隆的ompA部分基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量检测方法。结果建立的荧光定量PCR检测方法的最低检出限为5 copies/反应,检测线性范围100～107线性关系良好（r2=0.997）,比巢式PCR敏感100倍;且与鹦鹉热衣原体、淋球菌、解脲脲原体、大肠杆菌等病原菌DNA以及人基因组DNA均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。以巢式PCR作参比,建立的荧光定量PCR法检测沙眼衣原体的阳性符合率为100.00%,阴性符合率为95.09%,总符合率为96.81%。结论建立的检测沙眼衣原体实时荧光定量PCR具有特异性强和敏感性高的特点,可快速检测样本中微量沙眼衣原体DNA,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选。     

梅毒血清学诊断用抗原Gpd蛋白的重组表达及鉴定

目的 利用基因工程技术重组表达梅毒螺旋体Gpd蛋白,探讨其在梅毒血清学诊断中的应用.方法 PCR扩增Gpd基因序列,构建表达载体pET-28b-Gpd,将表达载体转化感受态细胞E.coli BL21(DE3)并以IPTG诱导蛋白表达,经镍柱亲和层析纯化后,利用质谱和免疫印迹法鉴定重组蛋白.以重组蛋白建立间接ELISA法,并检测20份TPPA阳性和20份TPPA阴性血清去评价其在梅毒血清学诊断中的应用.结果 PCR扩增出约1.1 kb的Gpd片段,成功构建重组质粒pET-28b-Gpd.表达的重组蛋白的相对分子质量约41×103,主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的40%.质谱和免疫印迹分析证实重组蛋白为Gpd蛋白,并能够与梅毒患者血清发生免疫学反应.间接ELISA法测定TPPA阳性血清和TPPA阴性血清的符合率分别为95%(19/20)和100%(20/20).结论 重组Gpd蛋白能够与梅毒患者血清发生特异性的免疫学反应,是一种可潜在应用于梅毒血清学诊断的新抗原.     

实时荧光定量PCR检测沙眼衣原体的研究

目的 采用TaqMan探针建立检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法.方法 根据沙眼衣原体外膜蛋白A的基因(ompA)序列设计引物和探针,以克隆的ompA部分基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量检测方法.结果 建立的荧光定量PCR检测方法的最低检出限为5 copies/反应,检测线性范围100107线性关系良好(r2=0.997),比巢式PCR敏感100倍;且与鹦鹉热衣原体、淋球菌、解脲脲原体、大肠杆菌等病原菌DNA以及人基因组DNA均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.以巢式PCR作参比,建立的荧光定量PCR法检测沙眼衣原体的阳性符合率为100.00％,阴性符合率为95.09％,总符合率为96.81％.结论 建立的检测沙眼衣原体实时荧光定量PCR具有特异性强和敏感性高的特点,可快速检测样本中微量沙眼衣原体DNA,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选.     

慢性乙肝患者血浆同型半胱氨酸测定及其与肝纤维化程度的相关性研究

目的探究慢性乙肝患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)测定及其与肝纤维化程度的相关性。方法选取2017年1月-2019年1月于我院接受治疗的60例慢性乙肝患者(观察组)及同期接受体检的30例自愿者(健康对照组)为研究对象。观察组患者根据肝纤维化程度分为S0期-S4期,分别比较观察组、健康对照组及观察组不同肝纤维化程度受试者血浆Hcy及肝纤维化指标[透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)]水平差异;经Spearman等级相关分析慢性乙肝患者肝纤维化程度与血浆Hcy水平、肝纤维化指标(HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C)的相关性。结果观察组患者血浆Hcy、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平均明显高于健康对照组(P均<0.05)。观察组不同肝纤维化程度患者分级相邻组间比较有统计学意义(P<0.05)。慢性乙肝患者血浆Hcy水平及HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平与肝纤维化程度呈正相关性(r=0.701,0.712,0.705,0.708,0.698,P均<0.05)。结论慢性乙肝患者体内血浆Hcy水平明显高于健康对照组,且随着肝纤维化程度加重,其血浆Hcy水平与肝纤维化指标均显著上升,与肝纤维化程度呈现正相关。     

尿液足细胞标志蛋白在糖尿病患者早期肾功能损害中的诊断价值

目的通过对118例糖尿病(DM)和糖尿病肾病(DN)患者尿液中足细胞标志蛋白(PCX)及肾功能指标的检测和分析,探讨PCX在糖尿病患者早期肾功能损害中的诊断价值。方法采用免疫比浊法定量检测各组患者和健康者尿液中PCX水平,同时检测所有受试者血液中常用肾功能指标,并对结果进行统计学分析比较。结果患者尿液中PCX与血中胱抑素C(Cys C)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿微量清蛋白(mAlb)水平呈正相关,且随血糖水平升高,以上指标均有上升趋势,DM、DN组尿液中PCX水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。DM组患者PCX的异常检出率明显高于其他几项指标;DM组PCX异常检出率为18.3%,DN组为70.7%,二者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PCX在DM早期肾功能损害中具有较好的诊断价值。     

肠型脂肪酸结合蛋白对腹膜透析相关腹膜炎患者的早期诊断价值

目的探讨肠型脂肪酸结合蛋白(IFABP)对腹膜透析相关腹膜炎患者的早期诊断价值。方法回顾性收集2016年10月至2019年1月该院肾内科拟诊腹膜透析相关腹膜炎患者,记录患者入院时腹透液常规检查与IFABP水平及相关临床资料,运用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价各指标的诊断效能。结果共纳入163例研究对象包括非腹膜炎患者123例,腹膜炎患者40例。腹膜炎组腹膜透析时间、腹透液白细胞计数、中性粒细胞百分比和IFABP水平高于非腹膜炎组,差异有统计学意义(P0.05)。IFABP水平对腹膜炎早期诊断价值最高,当IFABP水平最佳临界值为35ng/mL,诊断腹膜炎灵敏度为82.6%,特异度为86.8%。结论腹膜透析相关腹膜炎患者可能存在肠道屏障功能障碍,腹膜炎发生与IFABP水平相关,IFABP对于腹膜炎早期诊断具有一定的价值。     

脑脊液中肝素结合蛋白水平在颅内感染性疾病的应用价值

目的:探讨颅内感染性疾病中脑脊液中肝素结合蛋白(HBP)水平在临床应用价值.方法:回顾性分析我院2016年1月~2018年12月期间收入颅内感染性疾病患者总计80例,依据白细胞计数是否高于10×10^9/L作为依据分为两组,白细胞计数低于10×10^9/L32例为轻症感染组,白细胞计数高于10×10^9/L 48例为重症感染组,另选取同期收入非颅内感染者30例作为正常对照组,比较三组患者预后情况.结果:重症感染组HBP、WBC、中性粒细胞、TP水平高于轻症感染组、对照组,Giu水平低于重症感染组、轻症感染组,三组差异显著(P<0.05),HBP、WBC、TP、PCT及Glu曲线下面积(AUC)分别为0.906、0.694、0.703、0.711和0.369.HBP敏感度、阳性预测值、阴性预测值均高于WBC、cPCT、sPCT水平,TP特异度高于HBP、WBC及PCT水平,差异显著(P<0.05).结论:HBP作为颅内感染中理想诊断指标,对判断感染轻重程度起着重要临床意义,且升高幅度越高则感染程度越严重,与疾病预后相关.     

诱导HEK293细胞增殖中钙离子及TRPC6的变化及意义

目的建立AngⅡ诱导人胚肾细胞增殖模型,探讨增殖效果与Ca2+变化及TRPC6表达的关系。方法用不同浓度AngⅡ诱导细胞,在不同时间(0,6,12,24,48 h),予LOS干预24 h后用激光扫描共聚焦显微镜测Ca2+变化,RT-PCR、Western Blot检测TRPC6表达情况。采用MTT法及台盼蓝法检测细胞增殖及活性,确定最适浓度及时间构建增殖模型。结果 AngⅡ10-6mol/L诱导HEK293 24 h后细胞增殖及Ca2+升高明显,LOS干预后细胞增殖及Ca2+明显下降。TRPC6表达(+/-),胞膜、胞质定位不清。结论 HEK293细胞自身无明显表达TRPC6,可利用此表达系统进一步研究外源性TRPC6与Ca2+变化的关系。AngⅡ诱导HEK293细胞增殖与Ca2+升高有关,具有一定的时间和剂量依赖性。     

ELISA法检测乙肝表面抗原实验精密度研究

目的 探讨ELISA法检测HBsAg实验精密度的影响因素及实验精密度对检验结果的影响.方法 检测卫生部临检中心0.5ng/mL质控血清,计算精密度;比较手工操作与全自动酶免分析仪法检测的精密度;检测不同效价的阳性血清,比较精密度,并作统计学分析.结果 临界值附近的标本可能引起误判,手工操作与全自动酶免分析仪法检测实验精密度差异有统计学意义(t=4.72,P<0.01).结论 实验精密度的高低对酶免法检测HBsAg实验存在影响,检验结果的判定应设置灰区并进行复检或进一步检测.