六味地黄丸通过MAPKKK1、KLF4抑制三阴乳腺癌的作用机制

目的 探讨六味地黄丸通过丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶1（MAPKKK1）、锌指转录因子4（KLF4）抑制三阴乳腺癌的作用机制。方法 400只SPF级11.5月龄昆明种雌性种鼠，每3 d触诊乳腺部位1次，自发瘤小鼠随机分为模型组（给予生理盐水）、紫杉醇组（0.025 g·kg^-1·d^-1腹腔注射21 d）、六味地黄丸高、中、低剂量组（7.2、3.6、1.8 g·kg^-1·d^-1灌胃），饲养至濒死期剥离瘤组织，测瘤体积、质量、计算抑瘤率及发瘤小鼠生存期（6个月后未发瘤小鼠设为正常组）；选用SPF级SD大鼠制备不同浓度六味地黄丸含药血清用于培养细胞，沉默MDA-MB-231细胞中MAPKKK1，免疫荧光及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测MAPKKK1和KLF4蛋白表达。结果 体内实验表明，与正常组比较，模型组肿瘤组织MAPKKK1、KLF4蛋白表达显著下降（P<0.01）；与模型组比较，各用药组肿瘤组织体积明显减小、质量明显降低（P<0.05，P<0.01），抑瘤率升高，发瘤小鼠生存期明显延长（P<0.05），MAPKKK1蛋白表达显著升高（P<0.01），紫杉醇组及六味地黄丸高剂量组KLF4蛋白表达显著升高（P<0.01）。体外实验表明，与正常大鼠血清比较，各用药组MDA-MB-231细胞中MAPKKK1、KLF4荧光强度明显增强，紫杉醇组及六味地黄丸高、中剂量组MAPKKK1蛋白表达明显升高，紫杉醇组及六味地黄丸高剂量组KLF4蛋白表达显著升高（P<0.01）。沉默MAPKKK1后，与阴性质粒组（未沉默MAPKKK1）比较，阳性质粒组（沉默MAPKKK1）中MAPKKK1及KLF4荧光强度明显减弱（P<0.05），蛋白表达显著降低（P<0.01）；与阳性质粒组比较，各用药组MAPKKK1及KLF4荧光强度均有明显增强，蛋白表达均有明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论 六味地黄丸抑制三阴性乳腺癌的生长，其可能的分子机制是通过上调MAPKKK1的表达，从而激活KLF4的表达。     

针刺血海穴对反复力竭游泳大鼠血清IFN-γ和IL-4影响的研究

目的 探讨针刺血海穴对反复力竭游泳大鼠血清IFN -γ和IL -4影响.方法 将24只大鼠随机分成对照组(A组),反复力竭模型组(B组),反复力竭模型+针刺血海组(C组),B、C组在每天按递增负荷进行游泳训练,C组在游泳任务完成后20 min对血海穴位进行针刺,B、C组在完成相应运动后8h采集外周血和脾脏,并记录大鼠状态和力竭游泳时间,采用ELISA法测试血清IFN - γ、IL -4含量,对脾脏进行称重.结果 C组力竭游泳时间显著优于B组;B组的脾脏指数显著低于A组(P＜0.01),而C组与A组没有差异;B组和C组的IFN -γ水平显著低于A组(P＜0.01),C组的IL-4水平显著低于A组(P＜0.05)和B组(P＜0.01),B组的IFN -γ/IL-4则显著低于A组(P＜0.05).结论 针刺血海穴可以纠正疲劳导致的Th1/Th2平衡向Th2漂移,维持其平衡,并通过调理脏腑功能,可加速疲劳的恢复,增强机体抗疲劳的能力.     

不同体质血清影响A549肺癌细胞增殖的机理

目的探讨阴虚、阳虚和平和质3种体质血清对A549肺癌细胞生长的影响,并探讨其部分机理。方法 A549肺癌细胞经平和、阴虚、阳虚体质血清培养24,48,72 h,用MTT、流式细胞的方法分别测定平和、阴虚、阳虚体质血清对A549细胞增殖、细胞周期的变化,并用RT-PCR的方法对周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4(CDK4)及P16基因表达的mRNA量的分析。结果细胞培养72 h,阴虚、阳虚体质血清中的A549细胞MTT吸光度值(A)明显高于平和质;流式细胞的结果表明阴虚、阳虚体质血清培养的A549细胞的S期细胞明显高于平和质(P<0.05),而细胞周期G0/G1期的细胞低于平和质((P<0.05);RT-PCR的结果显示,CyclinD1和CDK4基因表达mRNA量均明显高于平和质((P<0.05),而P16基因表达产物均低于平和质((P<0.05)。结论阴虚、阳虚体质血清均可促进A549细胞增殖,可能的机理是提高CyclinD1、Cdk4的表达,降低P16的表达,促进细胞周期从G0/G1向S推进,从而促进细胞增殖。     

牛珀至宝丹对休克大鼠5-羟色胺、组胺的影响

内毒素休克是严重危害患者生命的急症之一,目前尚无特效药物治疗。近年来,我们以中药制剂牛珀至宝丹为主,治疗感染性休克取得明显疗效。为了探讨其作用机制,我们观察了该制剂对内毒素休克大鼠血清5-HT、组胺的影响。     

GABAB受体对牛横酸调节突触体氨基酸释放的影响

目的 牛磺酸（Tau）调节大鼠大脑皮层突触体Asp、Glu、GABA的释放的机制尚不清楚,本研究从GABA受体的角度进行探讨。方法 将phaclofen、biculline、baclofen加入悬浮有突触体的KRB液中,氨基酸测定采用Dans-C1柱前衍生,高效液相测定。结果 Tau对GABA释放的抑制作用能有效被Phaclofen所拮抗,而它们对Glu Asp的释放均无影响。结论 Tau抑制去极化引发GABA的释放是通过激发突触体前膜GABAB受体而起作用的。同时还作用于Asp、Glu神经末梢的突触体前膜,从而抑制去极化引发的Asp、Glu的释放。     

GABA_B受体对牛磺酸调节突触体氨基酸释放的影响

目的　牛磺酸 (Tau)调节大鼠大脑皮层突触体Asp、Glu、GABA的释放的机制尚不清楚 ,本研究从GABA受体的角度进行探讨。方法　将 phaclofen、biculline、baclofen加入悬浮有突触体的KRB液中 ,氨基酸测定采用Dans Cl柱前衍生 ,高效液相测定。结果　Tau对GABA释放的抑制作用能有效被Phaclofen所拮抗 ,而它们对GluAsp的释放均无影响。结论　Tau抑制去极化引发GABA的释放是通过激发突触体前膜GABAB 受体而起作用的 ,同时还作用于Asp、Glu神经末梢的突触体前膜 ,从而抑制去极化引发的Asp、Glu的释放。     

肾阳虚对大脑神经递质、胆碱酯酶的影响

为探讨中医“肾”对大脑的影响,在建立肾阳虚模型的基础上,对脑内某些递质进行了观察。结果发现：肾阳虚大鼠下丘脑内单胺类递质及大脑皮层内兴奋性ＡＡ均有不同程度的改变,说明肾阳虚的变化,可能与某些递质有关,为一步阐述肾与脑关系的机理起到关键性作用。     

4-氨基吡啶对牛磺酸调节突触体氨基酸释放的影响

牛磺酸 (ｔａｕｒｉｎｅ ,Ｔａｕ)是中枢神经系统中最丰富的氨基酸 (ＡＡ)之一 ,其作用与ＧＡＢＡ类似也是一种神经调质 ,能调节突触体ＡＡ的释放[1] 。 4 氨基吡啶 (4 ａｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ ,4 ＡＰ)是一种非选择性Ｋ 通道的阻滞剂 ,导致钙通道的开放 ,诱发神经末梢释放神经递质[2 ] ,尼莫地平 (Ｎｉｍ )是一种Ｃａ2 通道的拮抗剂 ,它们能否影响牛磺酸调节突触体ＡＡ的释放 ,尚未见报道。本文以 4 ＡＰ和Ｎｉｍ为工具药 ,探讨牛磺酸调节突触体ＡＡ释放的机理。材料和方法试剂　 4 氨基吡啶 (4 ＡＰ)、尼莫地平、谷氨酸脱氢酶 (…     

滋阴经方经TGF-β途径抑制小鼠自发乳腺癌生长的机理

目的观察滋阴经方-六味地黄丸对荷瘤小鼠乳腺癌的影响及部分机理。方法以清洁级昆明雌性小鼠种鼠自发乳腺癌为模型,用六味地黄丸治疗直至濒死期,肿瘤病理分析用HE染色,TGF-β(Transforming Growth Factor-β)、磷酸化胞外调节蛋白激酶(p–ERK1/2,phospho-ERKp44,p42)基因表达的产物用RT-PCR及Western bloting方法测定。结果六味地黄丸高、低剂量组的瘤质量明显低于对照组(P<0.05),瘤块中TGF-β、p-ERK基因表达产物也明显低于对照组(P<0.01)。结论六味地黄丸可通过TGF-β信号转导途径抑制乳腺癌的生长。