NURR1基因修饰C17.2神经干细胞移植治疗脑梗死

目的:比较C17.2神经干细胞和NURR1基因修饰的C17.2神经干细胞移植治疗对脑梗死模型鼠神经功能缺损的改善效果,观察细胞移植后与宿主脑组织的整合、存活、移行及分化情况。方法:实验于2005-06/12在中山大学附属第二医院林百欣实验中心完成。①实验材料:选取清洁级健康SD雄性大鼠78只,随机数字表法分为模型对照组、神经干细胞组、转基因神经干细胞组,26只/组。条件永生化神经干细胞系C17.2由哈佛大学儿童医院Even Synder教授惠赠。pAdeasy-NURR1重组复制缺陷性腺病毒由本实验室成功构建。Dil18荧光染料(Chemicon公司产品)。②实验方法:收集C17.2神经干细胞和pAdeasy-NURR1 C17.2神经干细胞,各分为两管,一管加入Dil18荧光示踪剂。各组大鼠均采用线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,3d后进行细胞移植,以江湾Ⅱ型脑立体定向仪进行立体定位,选择缺血半暗区3个位点为移植区:前囟头侧1mm,旁开2mm,深度1.2mm;前囟尾侧3mm,旁开1.5mm,深度1.2mm;前囟尾侧6mm,旁开2mm,深度1.2mm。模型对照组每位点注射单纯培养液2μL;神经干细胞组取6只每位点移植Dil18标记的C17.2神经干细胞悬液2μL,剩余20只每位点移植C17.2神经干细胞悬液2μL;转基因神经干细胞组取6只每位点移植Dil18标记的pAdeasy-NURR1 C17.2神经干细胞悬液2μL,余20只每位点移植pAdeasy-NURR1 C17.2神经干细胞悬液2μL。③实验评估:各组大鼠分别在移植前1d及移植后1周、2周、1个月进行神经功能缺损评分。移植后1周、2周、1个月进行荧光示踪检查及神经元特异烯醇化酶免疫组化检测。移植后6个月行组织学检查。结果:移植后1周,模型对照组死亡1只,神经干细胞组死亡2组,转基因神经干细胞组死亡2只,均淘汰并予以补充。①神经功能缺损评分:移植前1d各组大鼠神经功能缺损评分基本相似(P>0.05)。移植后1周、2周、1个月神经干细胞组、转基因神经干细胞组神经功能缺损评分均明显低于模型对照组(P<0.05);转基因神经干细胞组下降趋势较神经干细胞组更为显著(P<0.05)。②Dil18荧光细胞示踪结果:移植后1周荧光示踪细胞主要在针道内,少数细胞开始移行至周围神经组织。移植后2周,细胞移行至更远距离,并明显向梗死灶方向移行,细胞有突触样结构与周围细胞形成联系。移植后1个月细胞向周围扩散,甚至在远隔部位也可见荧光细胞。③神经元特异烯醇化酶免疫组化检测结果:移植后2周、1个月,转基因神经干细胞组神经元特异烯醇化酶阳性细胞数均明显高于神经干细胞组(P均<0.05)。④细胞组织学检查:移植后6个月,各组大鼠注射针道周围脑组织仍呈正常的层次和结构,未见有明显异型细胞增生。结论:①NURR1基因修饰的C17.2神经干细胞移植治疗局灶性脑梗死能显著改善神经功能缺损,效果优于C17.2神经干细胞。②移植后供体细胞存活并向注射针道周围神经组织移行,促进神经干细胞向神经元方向的分化。     

Nurr1的研究进展

Nur相关因子1(Nurr1)属于孤儿核受体的超家族,人类Nurr1基因位于2号染色体,有8个外显子,在中枢神经系统内有广泛表达,与中脑多巴胺能神经元的发生、发育和存活有密切关系.本文对Nurr1的分子结构、分布、生理功能以及与多巴胺能神经元显型的关系作一综述.     

白介素-1受体拮抗剂基因多态性与散发性帕金森病的关系

目的探讨白介素-1受体拮抗剂（IL-1RA）基因多态性与帕金森病（PD）的关系。方法本实验用PCR-片段长度多态性分析法检测了89例中国散发性帕金森病病人和67例正常对照的白介素-1受体拮抗剂基因多态性。结果与对照组相比,PD组中IL-1RA基因VNTR多态性的A2等位基因有增加的趋势,但两者差异无统计学意义（P〉0.05）。帕金森病合并痴呆组（PDD组）中IL-1RA基因A2等位基因频率较非痴呆组（PDND组）有显著性增加（P〈0.05）,而且在PDD组中,IL-1RA基因A2/A2纯合子和A1/A2杂合子基因型频率较PDND组有显著性增加（P〈0.05）。结论IL-1RA基因多态性可能与我国人散发性帕金森病的发病无关,而与帕金森病并发痴呆发病过程中有关。     

外源性碱性成纤维细胞生长因子对放射诱导神经干细胞凋亡的抑制效应

背景：已证实放射性神经干细胞损伤是放射性脑损伤的可能途径之一,而碱性成纤维细胞生长因子对放射性损伤具有保护作用,但其机制尚不清楚。 目的：观察外源性碱性成纤维细胞生长因子对放射诱导C17.2神经干细胞凋亡的抑制作用。 设计、时间及地点：随机分组设计,对比观察,于2006-11/2008-06在中山大学附属第二医院林百欣实验中心完成。 材料：C17.2神经干细胞系为小鼠小脑祖细胞永生化后构建的神经干细胞系。 方法：以直线加速器进行总量为8 Gy外照射C17.2神经干细胞建立离体放射性损伤模型,以1×107 L-1的细胞浓度接种C17.2神经干细胞悬液至96孔板,每孔加细胞悬液200 μL,按0,25,50,100 μg/L(0 μg/L作对照)分别加入碱性成纤维细胞生长因子干预。 主要观察指标：四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性并拟合生存曲线,流式细胞仪检测细胞凋亡率。 结果：随碱性成纤维细胞生长因子浓度升高,C17.2神经干细胞增殖比明显增加(P < 0.01),呈现明显剂量-效应关系。碱性成纤维细胞生长因子浓度为100 μg/L时活性最强,未显示细胞毒性。流式细胞仪检测结果显示：对照组细胞凋亡率高于25,50 μg/L碱性成纤维细胞生长因子组(P < 0.01),25,50,100 μg/L碱性成纤维细胞生长因子组组间相比,差异具有显著性意义(P < 0.05~0.01)。 结论：外源性碱性成纤维细胞生长因子对放射诱导的C17.2神经干细胞凋亡具有明显抑制作用。     

特发性高嗜酸粒细胞综合征并发动眼神经麻痹一例报告

特发性高嗜酸粒细胞综合征 (ｉｄｏｐａｔｈｉｃｈｙｐｅｒｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＩＨＥＳ)并发动眼神经麻痹未见报道 ,我院收治 1例。患者 ,男性 ,49岁 ,因四肢远端渐进麻木、无力伴低热 4周入院。患者于 4周前因受凉感冒后感到右大腿酸痛 ,次日感右侧手脚麻木伴低热 (37 8°Ｃ)、咳嗽。 2ｄ后上述症状加重 ,同时感左脚也开始麻木 ,曾去广州市第二人民医院 ,予抗炎、镇咳等对症处理后无明显好转 ,且渐感到四肢远端乏力 ,以致起病 3周后不能独立行走 ,又去广州医学院第一附属医院神经科以“吉兰 巴雷综合征”给予对症治…     

急性放射性脑损伤鼠模型的建立

背景：目前国内外关于放射性脑损伤动物模型的研究均处于探索中，尚未形成成熟的模型制作方法。目的：建立急性放射性脑损伤的鼠模型，为进一步研究放射性脑损伤正确有效的预防措施提供实验依据。设计：以实验动物为研究对象，随机对照观察研究。单位：一所大学医院动物实验室。材料：实验于2001-06／2002—08在中山大学附属第二医院实验室完成。SD大鼠60只，体质量(300&;#177;30)g，雌雄各半，空白对照组20只，实验组40只。方法：SD大鼠头部接受^60Coγ射线照射，7Gy／次，1次／d，连续照射6d，总剂量42Gy。照射结束后每日观察大鼠摄食、饮水量及次数，自主活动情况．有无出现神经系统症状与体征，每周检查并记录大鼠头部照射区毛发与皮肤情况、体质量变化，照射结束后第3，7，14，30天断头取脑，行病理组织学检查。主要观察指标：①一般情况观察。②照射后脑组织病理改变。结果：照射第3天起即出现每日摄食、饮水量减少；照射第1，2天，自主活动较对照组增多，第3天起活动渐减少；无异常神经系统体征；随观察时间延长体质量增长较对照组慢，但差异无显著性意义；所有大鼠均于照射后约2周时出现照射野轻度脱毛；照射后出现脑组织神经元变性坏死。结论：该模型制作方法切实、可靠，较好地模拟放射性脑损伤的过程，可用于预防或减轻放射治疗对脑组织损伤的实验研究。     

初发脑梗死后急性期抑郁发病率及与相关因素的关系

目的:探讨初发脑梗死急性期抑郁发生率及与年龄、性别、梗死部位及日常生活活动能力的关系。方法:采用汉密顿抑郁量表及中国精神障碍分类与诊断标准第3版(CCMD-3)关于脑卒中后抑郁状态(post-strokedepression,PSD)的诊断标准对70例急性期脑梗死的患者进行评分及诊断,同时采用Barthel指数评定病情严重程度,并统计分析抑郁与年龄、性别、梗死部位及日常生活活动能力的相关性。结果:PSD总发病率为29%,其中轻度22%,中度4%,重度3%。病灶位于左侧、Barthel指数分值低与抑郁存在相关性(r=-0.8557,P<0.05),而与年龄、性别无关。结论:脑梗死急性期的抑郁原因可能是肢体瘫痪程度影响了患者的日常生活活动能力而引起的心理反应。     

阿尔茨海默病易患性与人类白细胞抗原的相关性研究

近年来 ,国外研究显示人类白细胞抗原 (ＨＬＡ)与散发性阿尔茨海默病 (ＳＡＤ)的发病有关 ,但是报道不尽一致 ,而国内目前尚缺乏这方面的研究。我们对此进行了研究 ,现报道如下。资料和方法 :ＳＡＤ组 44例 ,男性 11例 ,女性 33例 ,年龄(74.2± 2 .8)岁。全部病例从广州市精神病院中筛选 ,应用简易精神状态检查 (ＭＭＳＥ)量表及日常生活能力量表 (ＡＤＬ)初筛出有痴呆 ,Ｈａｃｈｉｎｓｋｉ缺血指数 <4分的患者 ,再根据美国国力神经病、语言机能紊乱和卒中研究所及阿尔茨海默病和相关疾病协会 (ＮＩＮＣＤＳ ＡＤＲＤＡ)临床诊断标准 ,把诊…     

美多巴新剂型治疗帕金森病运动波动的临床研究

目的　探讨美多巴（Ｍａｄｏｐａｒ）新剂型能否解决长期左旋多巴类药物治疗帕金森病人出现的症状波动等问题。方法　利用Ｍａｄｏｐａｒ缓释剂（Ｍａｄｏｐａｒ ＨＢＳ）和Ｍａｄｏｐａｒ“快”（ＤＭ ）对一组长期应用Ｍａｄｏｐａｒ 标准片而出现症状波动的帕金森病人进行了治疗观察。结果　ＤＭ 的作用很快，在０．５ｈ 内达到高峰，能很快缓解晨僵和下午“关”症状；Ｍ ａｄｏｐａｒ ＨＢＳ的作用明显长于普通片，使剂末现象和症状波动减轻。经过新剂型治疗后，多数病人原有的症状波动改善，Ｗｅｂｓｔｅｒ 评分明显下降。两种新剂型的主要副作用有：短时间的胃肠道反应和头晕等表现。结论　在长期Ｍａｄｏｐａｒ 治疗后出现症状波动的病人，可以配合Ｍａｄｏｐａｒ新剂型治疗。     

bFGF基因转染对放射诱导的C17.2神经干细胞凋亡的抑制作用

目的 观察外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因转染对放射诱导的C17.2神经干细胞(NSCs)凋亡的抑制作用,为探索治疗放射性脑损伤(RE)的新途径奠定实验基础.方法 以直线加速器照射C17.2 NSCs建立离体放射性损伤模型,流式细胞仪检测凋亡率和坏死率,MTT法检测细胞活性并拟合生存曲线.构建含bFGF片段的真核表达体pcDNA3.1-bFGF质粒后,脂质体法转染C17.2 NSCs,观察转染pcDNA3.1-bFGF质粒后细胞对放射的耐受情况,并与对照组比较.结果 转染pcDNA3.1-bFGF的C17.2 NSCs放射后凋亡率和死亡率均显著低于转染空质粒组和对照组(P＜0.05).结论 外源性bFGF基因转染对放射诱导的C17.2 NSCs凋亡具有明显抑制作用,对RE有潜在的治疗价值.