两种快速方法联合检测结核分枝杆菌耐药性

目的建立联合检测结核分枝杆菌耐药性试验方法,以提高耐药检测方法的灵敏度和特异度。方法对126株已知耐药浓度的结核分枝杆菌耐药株和敏感株分别采用硝酸盐还原试验(Nitrate Reductase Assay,NRA)和反向斑点杂交试验(reverse-dot blot hybridization,RBH),检测其对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)和乙胺丁醇(EMB)的耐药性,并将结果与绝对浓度法结果相比较。结果硝酸盐还原试验和反向斑点杂交试验联合检测与绝对浓度法比较具有高度的一致性(P﹥0.05),异烟肼灵敏度95.5%,特异度100%;利福平灵敏度100%,特异度98.1%;链霉素灵敏度93.2%,特异度92.7%;乙胺丁醇灵敏度94.1%,特异度94.6%。结论硝酸盐还原试验和反向斑点杂交试验联合检测可作为快速结核分枝杆菌耐药性试验方法。     

BACTEC MGIT 960仪在肺结核病诊断中的应用

[目的]探讨BACTEC MGIT 960仪在肺结核病诊断中的应用。[方法]应用BACTEC MGIT 960仪对肺结核病人的痰标本进行培养，并与BACTEC TB 460仪、改良罗氏培养法及涂片抗酸染色法进行对照。[结果]BACTEC MGIT 960仪阳性率为31．96％，与BACTEC TB 460仪的阳性率接近，比改良罗氏培养法及涂片抗酸染色法高。[结论]BACTEC MGIT 960仪能显著缩短（初代阳性平均分离时间为11．6d，比BACTEC TB 460仪快1．9d，比改良罗氏培养法快9．1d。）报告时间，且阳性检出率高。     

反向斑点杂交技术检测结核分枝杆菌3种耐药相关基因

目的:观察膜反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌(MTB)对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)耐药性的效果.方法:用ropB、katG、inhA、rpsL基因的寡核苷酸探针与结核分枝杆菌PCR产物进行反向斑点杂交,并将结果与绝对浓度法药敏试验结果进行比较.结果:INH、RFP和SM的耐药基因检测灵敏度分...     

44株嗜麦芽窄食单胞菌的耐药分析

目的了解我院分离的嗜麦芽窄食单胞菌的耐药特点。方法收集我院2006年6月至2007年7月住院病人痰标本中分离的44株嗜麦芽窄食单胞菌，进行16种常见抗菌药物的敏感试验。结果嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明和左氧氟沙星的敏感率最高，为86．36％，其他14种抗生素敏感率均低于50％，美罗培南和亚胺培南的耐药率均为100％。结论嗜麦芽窄食单胞菌是一种高度耐药的细菌，应尽早根据药敏情况选择用药。     

硝酸盐还原试验与反向斑点杂交试验联合检测结核分枝杆菌耐药性

目的 联合检测结核分枝杆菌耐药性,以提高其灵敏度和特异性.方法 对126株已知耐药浓度的结核分枝杆菌耐药株和敏感株分别采用硝酸盐还原试验( Nitrate Reductase Assay,NRA)和反向斑点杂交试验(reverse-dot blot hybridization,RBH),检测其异烟肼(INH)和对利福平(RFP)的耐药性,并将结果将与绝对浓度法结果相比较.结果 硝酸盐还原试验和反向斑点杂交试验联合检测与绝对浓度法比较有高度的一致性(P＞0.05),异烟肼灵敏度95.5％,特异性100％;利福平灵敏度100％,特异性98.1％.结论 硝酸盐还原试验和反向斑点杂交试验联合检测可作为快速结核分枝杆菌耐药性试验方法.     

DNA芯片技术检测结核分枝杆菌耐药基因

目的应用DNA芯片杂交技术快速检测临床分离株中结核分枝杆菌对异烟肼（INH）、利福平（RIF）、链霉素（SM）和乙胺丁醇（EMB）的耐药性,并评价其临床应用价值。方法采用DNA芯片技术,将固定于硝酸纤维素膜上的四种药物常见耐药基因的特异性探针,与结核分枝杆菌临床分离株生物素标记的聚合酶链反应产物进行杂交,共对97株临床分离株进行检测,并将结果与绝对浓度法药敏试验结果进行比较。结果INH、RIF、SM和EMB的耐药基因检出的灵敏度分别为89．6％、98．6％、81．8％和88．2％,特异度分别为93．3％、100％、100％和100％。结论简便快速敏感的DNA芯片杂交方法适用于临床批量结核分枝杆菌耐药性的初筛。     

1684株结核分支杆菌单一、联合药敏试验结果分析

目的了解长沙市结核分支杆菌耐药情况。方法采用绝对浓度法进行结核分支杆菌药敏试验。结果1 684株结核分支杆菌药敏试验显示:单一药敏试验耐药率高低次序是:RFT(15.50%)、SM(12.59%)、RFP(10.69%)、INH(8.37%)、PZA(6.47%)、PAS(2.79%)、EMB(2.32%)、KM(1.72%);总耐药率为26.03%。结论长沙市结核分支杆菌总的耐药率低于全国平均水平。     

硝酸盐还原试验、DNA线性杂交检测结核分枝杆菌耐药性的比较

目的比较生物化学检测方法和基因检测方法在结核分枝杆菌耐药性检测中的优劣,以提高耐药性检测方法的准确度。方法以绝对浓度法为“金标准”,对已知耐药浓度的耐药结核分枝杆菌菌株及敏感株采用硝酸盐还原试验（Nitrate Reducrase Assay,NRA）、DNA线性杂交法（Applicating Line Probe Assay LiPA）检测其对利福平（RFP）、异烟肼（INH）、链霉素（SM）和乙胺丁醇（EMB）的耐药性。结果硝酸盐还原试验与绝对浓度法比较,异烟肼（INH）耐药菌株符合率为77．6％,敏感菌株符合率为86．6％;利福平（RPF）耐药菌株符合率为95．8％,敏感菌株符合率为92％;链霉素（SM）耐药菌株符合率为84．1％,敏感菌株符合率为100％;乙胺丁醇（EMB）耐药菌株符合率为94．1％,敏感菌株符合率为85．7％。DNA线性杂交与绝对浓度法比较,异烟肼（INH）耐药菌株符合率为89．6％,敏感菌株符合率为93．3％;利福平（RPF）耐药菌株符合率为98．6％,敏感菌株符合率为100％;链霉素（SM）耐药菌株符合率为78．3％,敏感菌株符合率为100％;乙胺丁醇（EMB）耐药菌株符合率为88．2％,敏感菌株符合率为100％。硝酸盐还原试验与DNA线性杂交比较,异烟肼（INH）耐药菌株符合率为80．6％,敏感菌株符合率为82．9％;利福平（RPF）耐药菌株符合率为100％,敏感菌株符合率为100％;链霉素（SM）耐药菌株符合率为97．2％,敏感菌株符合率为96．7％;乙胺丁醇（EMB）耐药菌株符合率为100％,敏感菌株符合率为83．5％。结论硝酸盐还原试验和DNA线性杂交法检测匀可作为快速结核分枝杆菌耐药性试验方法,两方法具有一致性。     

1465份血液普通细菌培养的病原菌分布及耐药性分析

目的探讨引起血液感染的病原菌的分布情况以及耐药率。方法血液培养标本用BACTEC9120全自动血液培养仪进行培养，阳性标本用德灵MicroScan Walk-Away96全自动微生物鉴定仪进行鉴定和药敏试验。结果在1465份血液培养标本中分离出病原菌154株，阳性检出率为10．53％。病原菌以革兰阳性球菌居首位（51．30％），革兰阴性杆菌次之（30．52％），真菌（15．58％），革兰阳性杆菌（2．60％）。分离率居前十位的为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、白色念珠菌、肺炎克雷伯菌、热带念珠菌、溶血葡萄球菌、肺炎链球菌、甲型副伤寒沙门菌。结论血液培养病原菌以革兰阳性球菌为主，革兰阴性杆菌次之；革兰阳性球菌对万古霉素、吗啉恶酮及奎奴普丁／达福普丁的耐药率最低；而革兰阴性杆菌对亚胺培南耐药率较低。     

四种中药抗结核分枝杆菌药物敏感性的初步研究

目的初步探讨四种中药抗结核分枝杆菌的药物敏感性。方法对长沙市中心医院2009年1月-2010年3月确诊的结核病患者培养分离结核分枝杆菌,进行药物敏感性试验。采用改良罗氏培养基制备四种中药药物培养基,未加中药的改良罗氏培养基作为对照,分别观察结核分枝杆菌在四种中药药敏培养基上的生长情况。结果 1号中药培养基检测临床分离株79株,中药药物敏感性试验38株敏感,敏感率为48.10%;2号中药培养基检测临床分离株78株,中药药物敏感性试验62株敏感,敏感率为79.49%;3号中药培养基检测临床分离株41株,中药药物敏感性试验36株敏感,敏感率为87.80%;4号中药培养基检测临床分离株34株,中药药物敏感性试验31株敏感,敏感率为91.18%。四种中药对结核分枝杆菌药物敏感性不同,以3号和4号的抗菌效果最佳(χ2=35.82,P0.01)。结论 2号、3号和4号中药培养基均显示出良好的抑菌效果,其中3号和4号中药效果更好。可以进行临床用药进一步证实2种药在人体内对结核分枝杆菌的作用。