玉竹提取物A对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的：探讨玉竹提取物A对小鼠免疫性肝损伤的保护作用，探讨其发挥此作用的可能的机制。 方法：①实验于2004-06／10在锦州医学院免疫实验室完成。选用健康雄性昆明小鼠50只。普通级。将50只健康雄性昆明小鼠随机分为5组：正常对照组、模型对照组、玉竹提取物A 0．5g／kg组、玉竹提取物A 1g／kg组、玉竹提取物A2g/／kg组，每组10只。②玉竹提取物A是玉竹的干燥根茎经水醇法提取而得。（固正常对照组和模型对照组小鼠腹腔注射生理盐水，玉竹提取物A0.5，1，2g／kg组小鼠分别腹腔注射相应浓度的玉竹提取物A，每次每只0．5mL，3次／d，连续注射4d。最后一次注射后8h，除正常对照组注射生理盐水外，其余各组均尾静脉注射20mg／kg的刀豆蛋白A0．5mL，制备免疫性肝损伤模型。（4）注射刀豆蛋白A8h后摘眼球取血低温保存，取肝待行光镜检查，以观察肝脏组织病理学改变（常规苏木精-伊红染色），取脾待行淋巴细胞增殖实验（采用四甲基偶氮唑盐法）和流式细胞术以检测T淋巴细胞亚群。各组小鼠血清谷丙转氨酶活性检测按购自南京建成生物研究所的谷丙转氨酶试剂盒说明进行。⑤组间计量资料差异比较采用方差分析。 结果：昆明小鼠50只均进入结果分析。①肝脏组织病理学改变：模型对照组可见明显免疫性肝损伤病理改变。玉竹提取物A3个实验组小鼠肝损伤病理改变均不同程度的好于模型对照组。（2）玉竹提取物A对血清谷丙转氨酶活性的影响：模型对照组血清谷丙转氨酶活性明显高于正常对照组（t=13．8，P〈0．01）。玉竹提取物A3个实验组血清谷丙转氨酶活性低于模型对照组，尤以玉竹提取物A2g／kg组与模型对照组差异最明显（1=5．62，P〈0．01），且存在剂量依赖关系。（参玉竹提取物A对T淋巴细胞转化增值的影响：刀豆蛋白A刺激体外培养的各组脾淋巴细胞，模型对照组的刺激指数明显高于正常对照组（t=9．02，P〈0．01），玉竹提取物A3个实验组的刺激指数明显低于模型对照组（t=6．99-11．06,P〈0．01），且存在剂量依赖关系。④玉竹提取物A对脾组织T淋巴细胞亚群的影响：各组，CD4^＋T，CD8^＋T淋巴细胞的数量和比例差异不明显（P〉0．05）。 结论：①玉竹提取物A具有抑制肝细胞破坏及改善肝脏微循环的作用。②玉竹提取物A可以显著抑制T淋巴细胞的转化增殖，并呈剂量依赖关系，玉竹提取物A发挥肝保护作用的一个机制可能就是显著抑制T淋巴细胞的转化增殖，减少肝损伤细胞因子的释放，抑制活化增殖的T琳巴细胞对肝细胞的直接细胞毒作用。③在肝损伤的早期可能只是大量免疫细胞聚集于肝脏并且各种分泌及破坏功能增强，而非其数量明显增加。     

玉竹提取物A对小鼠单核细胞体外诱生血栓素B2分泌量的影响

目的观察小鼠单核细胞在体外经内毒素刺激分泌血栓素B2的情况,及不同浓度玉竹提取物A对其分泌量的影响。方法实验于2004-06/2004-08在锦州医学院免疫实验室进行。选择普通级健康雄性昆明小鼠36只,随机分为正常对照组、模型对照组、玉竹提取物A500m g/L组、玉竹提取物A1000m g/L组、玉竹提取物A1500m g/L组,玉竹提取物A2000m g/L组共6组,每组6只。36只小鼠摘眼球取血,分离外周血单核细胞,分置24孔培养板中,每孔0.5m L。每组设6个平行孔,大肠杆菌内毒素为终浓度。正常对照组每孔加完全16400.5m L;模型对照组同样每孔加完全16400.5m L;同时4个实验组的单核细胞内分别加入相应浓度的玉竹提取物A;另取两个24孔培养板,每孔只加单核细胞悬液1m L。上述分离之单核细胞培养3d后换液1次,除正常对照组外,将10m g/L的大肠杆菌内毒素10μL加入其余5组,共育2h;同时取只加单核细胞悬液的后两板,每组加大肠杆菌内毒素浓度分别为0.01,0.1,1,10,100,400mg/L,各10μL,共育2h。然后收集每孔上清液,放免分析法测定上清液中血栓素B2含量。观察体外给予不同浓度大肠杆菌内毒素,对血栓素B2分泌量的影响;不同浓度玉竹提取物A对同一浓度大肠杆菌内毒素刺激的血栓素B2分泌量的影响。结果36只小鼠均进入结果分析。①大肠杆菌内毒素维持在0.01,0.1,1,10mg/L时,其刺激小鼠外周血单核细胞合成血栓素B2水平呈剂量依赖关系,即随大肠杆菌内毒素浓度增加,血栓素B2合成水平亦升高(800,950,1180,1500ng/L),大肠杆菌内毒素为10m g/L时,刺激血栓素B2合成速率达峰值;当内毒素刺激量增至100,400m g/L时,血栓素B2合成水平不再升高,而呈下降趋势(1100,900ng/L)。②当用10m g/L的大肠杆菌内毒素分别刺激除正常对照组外的其余5组的单核细胞时,模型对照组血栓素B2分泌量明显高于正常对照组[(1382±98),(823±78)ng/L,t=10.93,P<0.01],4个浓度(500,1000,2000,4000m g/L)玉竹提取物A组血栓素B2的量明显低于模型对照组[(805±75),(812±77),(817±81),(783±70),(1382±98)ng/L,t=11.45,11.20,10.88,12.18,P<0.01],与正常对照组(823±78)ng/L无显著差异。结论内毒素体外可以刺激单核细胞分泌血栓素B2,且刺激量为10mg/L时,单核细胞合成血栓素B2最旺盛;不同浓度玉竹提取物A体外均可显著抑制血栓素B2的分泌,但随着药物浓度的增大,其抑制作用并未增强。     

玉竹多糖干预后衰老模型鼠抗氧化系统及免疫功能的变化

目的:观察具有扶正固本,养阴润燥和滋补强壮功效的百合科黄精属植物药玉竹的提取物玉竹多糖对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠血清中超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的抗氧化系统作用及免疫功能的影响,探讨玉竹多糖抗衰老的可能作用途径。方法:实验于2004-07/2005-05锦州医学院免疫教研室完成。①取昆明小鼠50只,随机分为5组:正常对照组、衰老模型组和低、中、高剂量玉竹多糖治疗组。除正常对照组外,其余各组每只颈背部皮下注射50g/LD-半乳糖0.5mL,连续6周。同时低、中、高剂量玉竹多糖治疗组分别腹腔注射0.5,1,2g/kg剂量的玉竹多糖(玉竹为百合科黄精属植物药,药用根茎,由锦州医学院免疫教研室采摘,经中国医科大学免疫教研室潘兴瑜教授乙醇回流脱脂、水提纯、浓缩、醇沉、除蛋白、离心、真空干燥等程序,得到玉竹多糖;玉竹产自锦州凌海市温滴楼乡岩井寺工区)溶液0.5mL,正常对照组和衰老模型组小鼠给予腹腔注射生理盐水0.5mL。②给药6周后,麻醉下将小鼠摘除眼球取血,常规分离血清,在4℃下3000r/min离心5min,取上清待测。用分光光度计检测小鼠血清中超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平,并将小鼠称质量并剖取小鼠胸腺和脾脏,用电子天平称质量,以脏器湿质量(mg/g)表示小鼠脾指数和胸腺指数,用MTT法测定脾淋巴细胞转化指数,用免疫荧光法测定脾T淋巴细胞亚群,观察玉竹多糖对免疫功能的影响。③多组间样本均数比较采用方差分析。结果:昆明种小鼠50只均进入结果分析。①衰老模型组小鼠血清中超氧化物歧化酶活性明显低于正常对照组,丙二醛水平明显高于正常对照组(P<0.05)。高剂量玉竹多糖治疗组小鼠血清中超氧化物歧化酶活性明显高于衰老模型组,丙二醛水平明显低于衰老模型组(P<0.01,0.05);中、低剂量玉竹多糖治疗组与衰老模型组血清中超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平比较,差异不明显(P>0.05)。②衰老模型组小鼠胸腺指数和脾指数明显低于正常对照组(P<0.01,0.05);低、中、高剂量玉竹多糖治疗组的胸腺指数和脾指数均明显高于衰老模型组(P<0.05～0.01),以中剂量玉竹多糖治疗组作用最明显(P<0.01);3个剂量玉竹多糖治疗组之间胸腺指数和脾指数差异不明显。③衰老模型组小鼠脾T和B淋巴细胞转化刺激指数均明显低于正常对照组(P<0.05,0.01);高剂量玉竹多糖治疗组小鼠脾T淋巴细胞转化刺激指数和各剂量玉竹多糖治疗组小鼠脾B淋巴细胞转化刺激指数明显高于衰老模型组(P<0.05)。④各组小鼠脾脏中CD4 细胞数差异不明显(P>0.05);正常对照组和各剂量玉竹多糖治疗组小鼠脾脏中CD8 细胞数明显多于衰老模型组(P<0.05～0.01),CD4 /CD8 比值则明显低于衰老模型组(P<0.01)。结论:①玉竹多糖可能通过提高衰老小鼠血清超氧化物歧化酶活性,增强对自由基的清除能力,抑制脂质过氧化,降低丙二醛含量,从而减轻衰老小鼠机体组织损伤程度,以延缓衰老。②玉竹多糖对亚急性衰老小鼠免疫器官的功能具有一定的调节作用,可改善机体的免疫失衡状态,从而增强机体的细胞及体液免疫功能,延缓衰老。     

精讲免疫学绪论中的一些体会

免疫学在生命科学和医学中有着重要的作用和地位,通过掌握免疫学的基本理论和技术,为诊断、预防和治疗某些免疫相关疾病奠定基础.在医学和生物学专业的本科教育阶段,医学免疫学现已成为一门重要的主干课程.由人民卫生出版社发行的<医学免疫学>(第3版、第4版和第5版)教材均以独立一章来介绍绪论(或概论)部分.绪论部分不仅介绍"免疫"的概念、免疫系统功能以及免疫学发展简史,也用较多笔墨阐述免疫系统的组成,固有免疫与适应免疫应答特点.教学实践中体会到精讲免疫学绪论对本科免疫学教学的意义.     

趋化因子诱骗受体D6的研究进展

趋化因子诱骗受体D6是非典型的趋化因子受体之一,与典型的趋化因子受体结构相似,可以高亲和性结合炎性CC趋化因子,但无法传递信号,不能趋化及活化细胞。其主要功能是对炎性CC趋化因子内化并清除,在控制炎症、调节免疫等方面发挥作用。该文对其结构特点、表达特点、基本功能及与疾病关系的研究现状予以综述。     

人趋化因子诱骗受体D6基因真核表达载体的构建及鉴定

目的构建并鉴定人趋化因子诱骗受体D6基因的真核表达载体。方法 PCR扩增目的基因片段,与载体分别双酶切后连接,产物转化入JM109感受态细菌,筛选阳性克隆酶切鉴定并测序。结果构建的pCDNA3.1-hD6-his真核表达载体序列正确。结论成功构建了人趋化因子诱骗受体D6的真核表达载体。     

膜型凋亡诱导配体脱落可能参与肺腺癌对TRAIL耐受

TRAIL可选择性、高效地诱导肿瘤细胞凋亡,虽然肺腺癌等部分肿瘤对TRAIL耐受,但其高效、低毒的优势吸引人们不断探索增敏策略.TRAIL与功能性受体DR4、DR5在细胞膜脂筏内组装为死亡诱导信号复合物(DISC);而诱骗受体DcR1和DcR2通过竞争结合TRAIL阻断凋亡.肺腺癌A549对TRAIL高度耐受,除DcR1外,MMP-2可能通过酶切跨膜型TRAIL的脱落而降低DISC组装,从而参与其耐药.阐明膜结合型TRAIL脱落机制可能为提高肺腺癌对TRAIL的敏感性提供新策略.     

吉林省高等职业教育集团化发展的SWOT分析

我国的职业教育集团产生于20世纪90年代初。进入21世纪,教育集团开始进入快速发展轨道,尤其2009年年初教育部要求大力推进职业教育集团化办学以来,     

自身免疫性肝炎研究进展

自身免疫性肝炎是一种多致病原因性疾病,其确切的发病机制尚不明确,近年来随着免疫学、分子生物学的发展,对自身免疫性肝炎的发病机制有了一些新的认识和较大的进展,同时推动了自身免疫性肝炎的治疗研究进展.本文就以上两方面的研究进展做一综述.