地戈辛和生物素标记进行原位PCR方法的比较

由于不同的B细胞克隆可发生不同类型的重链基因重排 ,因此 ,通过检测免疫球蛋白重链基因重排可鉴别细胞的来源 ,也可诊断B系淋巴细胞性肿瘤。本文介绍应用免疫球蛋白重链第三互补决定区引物 ,分别用生物素和地戈辛标记进行原位PCR ,检测了 15例恶性淋巴瘤患者的外周血淋巴细胞     

南宁市小儿肺炎支原体抗体水平调查

肺炎支原体(MP)已证实是呼吸道感染的常见病原之一,在60年代以前曾认为MP是一种病毒,1962年Chnock在人工培养基中培养成功,并证实能引起非典型肺炎,而定名为肺炎支原体[1]。MP感染不但能引起上呼吸道炎症、肺炎,而且能引起严重并发症及后遗症[2,3]。     

贫血患儿红细胞免疫功能观察

为了解贫血患儿的红细胞免疫功能,对 ８５例贫血患儿（缺铁性贫血 ２９例、急性白血病 ２６例、地中海贫血 １８例、再生障碍性贫血 １２例）进行了红细胞 Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ）和红细胞免疫复合物花环率（ＲＢＣ－ＩＣＲ）测定。结果显示所有贫血患儿ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ均显著低于对照组儿童（Ｐ＜０．０１）,缺铁性贫血和再生障碍性贫血患儿 ＲＢＣ－ＩＣＲ与对照组比较无明显差异（Ｐ＞０．０５）,急性白血病患儿 ＲＢＣ－ＩＣＲ高于对照组（Ｐ＜０．０５）,地中海贫血患儿 ＲＢＣ－ＩＣＲ则显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。贫血患儿容易感染可能与红细胞免疫功能低下有关。     

荧光定量PCR快速诊断21三体综合征

目的　建立荧光定量PCR技术检测 2 1三体综合征。方法　采用PCR方法同时扩增位于 2 1号染色体上的人肝型磷酸果糖激酶基因 (humanliver typephosphofructokinasegene ,PFKL CH 2 1)和位于 1号染色体上的人肌型磷酸果糖激酶基因 (humanmuscle typephosphofructokinasegene ,PFKM CH1) ,使用SYBRGreenⅠ荧光染料处理产物、琼脂糖电泳后在凝胶成像系统进行分析 ,得出扩增产物的荧光强度对比值。用此方法检测 2 6例 2 1三体综合征患儿及 2 0名正常人。结果　 2 6例 2 1三体综合征患儿PFKL CH2 1/PFKM CH 1扩增产物的荧光强度对比值为 1.5 8± 0 .17,而正常人为 1 0 0± 0 .0 5 ,两者差异有显著性。结论　SYBRGreenⅠ荧光定量PCR技术检测 2 1三体综合征具有准确、快速、安全、实用等特点 ,有较高的临床使用价值。     

间期细胞原位PCR检测B细胞系恶性淋巴瘤

目的：应用原位PCR技术检测B细胞系恶性淋巴瘤。方法：采用免疫球蛋白重链（IgH)基因第三互补决定区（CDR－Ⅲ）的引物，dig-11-dUTP标记物，应用直接原位PCR技术检测Ⅲ-Ⅳ级恶性淋巴瘤的间期淋巴细胞，结果：在初诊的15例恶性淋巴瘤患中，12例检测到IgH基因重排；4例临床表现呈现淋巴瘤性白血病患，治疗后骨髓完全缓解，2例间期细胞原位PCR仍显示有IgH基因重排，6个月复发，结论：间期细胞原位PCR技术能敏感、准确地检测Ⅲ级以上的恶性淋巴瘤，并帮助预测复发，为一有效的基因诊断方法。     

血小板活化因子水解酶基因突变与原发性肾病综合征的相关性

目的研究血小板活化因子水解酶（PAF—AH）基因突变与不同类型原发性肾病综合征（PNS）的相关性。方法94例PNS患儿，依据对激素治疗的效应分为激素敏感型NS（SSNS）组37例,激素耐药型NS（SRNS）组26例，激素依赖型NS（SPNS）组31例，239例健康对照组儿童作为对照，应用聚合酶链反应（PER）及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析的方法检测其PAF—AH基因第9外显子-994位点基因型及等位基因频率，同时对各种PAF—AH基因型的PNS患儿的病情反复情况进行对比分析。结果NTNS患儿血浆型-PAF—AH基因-994位点基因突变频率显著高于STNS及健康对照组；所有PNS及SSNS、SRNS与健康对照组儿童比较，PAF—AH基因．第9外显子-994位点基因突变频率差异无统计学意义，SDNS组突变频率显著高于健康对照及SSNS组；PAF—AH基因第9外显子-994位点基因GT型或TT型第1年内反复次数显著高于GG型者。结论血浆型PAF—AH基因第9外显子-994位点基因突变的PNS患儿在临床类型上多为NTNS，且易于在以后的治疗中出现依赖倾向。     

原位聚合酶链反应检测在B细胞系非霍奇金病中的作用

目的 探讨用原位聚合酶镇反应(PCR)检测B细胞系非霍奇金病的意义。方法 用免疫球蛋白重链(IgH)第三互补决定区引物，生物素标记扩增产物直接原位PCR扩增15例非霍奇金病患儿外周血淋巴细胞。结果 15例非霍奇金病中，12例检测到特异性基因重排，4例呈现淋巴瘤性白血病，治疗后骨髓完全缓解，2例间期细胞原位PCR仍显示有IgH基因重排，分别于3个月及6个月复发。结论 原位聚合酶镇反应检测非霍奇金病不失为一种简单、快速、灵敏的方法，并能帮助预测复发。     

应用SYBR Green I荧光染色同源基因定量聚合酶链反应快速诊断21-三体综合征

目的　建立一个快速、准确诊断 2 1 三体综合征 (2 1 三体 )方法。方法　取 2 6例 2 1 三体患儿及 2 0例正常人DNA标本 ,引用一对引物同时PCR扩增两个同源基因片断 :2 1号染色体长臂的人肝型磷酸果糖激酶基因 (PFKL CH2 1)及 1号染色体的人肌型磷酸果糖激酶基因 (PFKM CH1) ,用SYBRGreenI荧光染色 ,琼脂糖凝胶电泳、凝胶成像系统分析软件测光密度进行定量分析。结果　 2 4个PCR循环检测两个同源基因扩增产物光密度之比 :病例组为 1.6 1± 0 .18;正常人组为 1.0 1± 0 .0 6 ,两组比值分布无重叠区 ,诊断结果与染色体核型分析一致 ,约 4h可完成。结论　SYBRGreenI荧光同源基因定量PCR方法省时、简单、快捷、准确诊断 2 1 三体 ,为临床及产前诊断 2 1 三体提供一种新的诊断方法。     

125例唐氏综合征高危孕妇中筛查出1例9qh+、2例inv(9)

唐氏综合征(Down's Sydrome,DS)又称先天愚型,是一种发生于胎儿的遗传性疾病.我们利用时间分辨荧光免疫分析法及AFP、Free-β-HCG试剂盒对1 773例孕妇行产前DS筛查,检出1例9号染色体长臂次溢痕增加(9qh )、2例9号染色体臂间倒位[inv(9)]的胎儿,现报告如下.     

定量PCR诊断Down''''s综合征方法比较

目的 比较两种染料进行定量PCR检测Down’s综合征时的特点。方法 采用PCR方法同时扩增人肝型磷酸果糖激酶基因(PEKL—CH21)和人肌型磷酸果糖激酶基因(PEKM—CHI)，分别用SYBR Green I和银染两种染料处理扩增产物，琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳-银染后在凝胶成像系统进行分析，得出扩增产物的荧光强度对比值。以吸光度理论比值为标准，分别比较两种荧光染料的敏感性、特异性。结果 SYBR Green I和银染两种染料进行定量PCR诊断26例Downs综合征患者和20例正常人其敏感性、特异性均为100％，两种染料检测结果无差别。结论 SYBR Green I是一种敏感、特异、实用、低毒的荧光染料。