G6PD缺乏症单细胞SNaPshot基因诊断方法的建立

目的建立有效可行的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症单细胞基因诊断技术。方法获取正常人及G6PD基因突变杂合子的单个淋巴细胞,采用多重巢式PCR结合多重SNaPshot技术对G6PD基因突变高发的四个外显子上的12个突变位点进行基因诊断。结果共检测了58个正常和108个杂合子单淋巴细胞,扩增效率为90.97%,等位基因脱扣率为8.08%。结论所建立的多重巢式PCR结合SNaPshot技术可在单细胞水平上快速、准确地检测12个G6PD基因突变位点,可望在临床上实现G6PD缺乏症的植入前遗传学诊断。     

造血干细胞移植病人营养支持的研究

[目的]探讨肠外营养支持对白血病病人造血干细胞移植期间的营养状态的影响。[方法]分析12例白血病病人在造血干细胞移植期间接受胃肠外营养支持治疗后临床症状、体重、血清白蛋白、血糖、血尿素氮及肌酐等指标的变化，并与同期未行胃肠外营养支持治疗的10例病人相关指标进行比较。[结果]接受胃肠外营养支持组(PN组)病人移植期间体重下降较对照组病人少，血清白蛋白水平则较对照组高。[结论]胃肠外营养支持对造血干细胞移植病人平稳度过预处理期、放疗、化疗后应激反应期与促进造血功能的恢复有十分重要的意义。     

地鳖虫纤溶活性蛋白组分的提取及对肿瘤细胞的抑制作用

目的探讨地鳖虫纤溶活性蛋白组分的提取及对肿瘤细胞的抑制作用。方法使用硫酸铵沉淀、DEAE离子交换层析和SephadexG75凝胶层析的方法，从地鳖虫体内提取出纤溶活性蛋白并检测其活性，研究其体外抗肿瘤的作用；并通过噻唑蓝（MTT）法和流式细胞术检测地鳖虫纤溶活性蛋白对2种肿瘤细胞（人食管癌细胞株Eca109和人宫颈癌细胞株HeLa）的增殖抑制及周期的影响。结果（1）地鳖虫体内存在具有纤溶活性的纤溶活性蛋白；（2）地鳖虫纤溶活性蛋白对肿瘤细胞的增殖抑制率与剂量和时间密切相关；（3）随着地鳖虫纤溶活性蛋白浓度的增加，G1期细胞数量明显减少，G2／M期的细胞数量有所增加。结论地鳖虫纤溶活性蛋白具有体外抑制肿瘤细胞的作用。     

革兰阴性杆菌高产AmpC酶的检测及耐药性分析

目的：了解革兰阴性杆菌高产AmpC酶检出的情况及其对10种常用抗菌药物的耐药性分析。方法：对我院2001～2004年临床标本分离出的273株革兰阴性杆菌，用粗提酶头孢西丁三维试验检测高产AmpC酶并分析其对10种常用抗菌药物的耐药性。结果：273株革兰阴性杆菌中，高产AmpC酶菌株共74株．检出率为27．1％；除对亚胺培南、头孢吡肟耐药性较低外，它们对其他抗菌药物高度耐药，耐药率大多数高于80％；产AmpC酶菌株耐药性明显高于非产酶菌株。结论：高产AmpC酶的革兰阴性杆菌日益增多．耐药性强，临床治疗应首选碳青霉烯类抗生素和第四代头孢菌素。     

多重耐药肺炎克雷伯菌基因型和整合子的分析

目的了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况。方法设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因特异性引物,并将聚合酶链反应（PCR）扩增获得哥内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型。结果该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX—M-3型编码基因序列的同源性为100％,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性。结论Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及临床意义

目的探讨T淋巴细胞亚群在乙型肝炎患者外周血中的变化及其临床意义。方法采用多参数流式细胞仪检测乙型肝炎病毒携带者40例(病毒携带组)、慢性乙型肝炎30例(慢性组)、乙型肝炎肝硬化15例(肝硬化)及30例健康人(对照组)的外周血T淋巴细胞CD3及其亚群(CD4、CD8),并将结果进行比较。结果与对照组比较,三组乙型肝炎患者的CD3、CD4及CD4/CD8比值均降低,差异有统计学意义(P<0.05),CD8明显增高(P<0.05)。结论乙型肝炎患者细胞免疫功能紊乱,T细胞亚群的变化程度与病情进展有相关性。     

D-Dimer水平在恶性肿瘤晚期合并DIC中的变化

目的探讨血浆D-二聚体(D-Dimer)水平在恶性肿瘤歇脚期合并DIC患者中的变化及意义。方法检测35例恶性肿瘤晚期合并DIC患者(肿瘤组)及30例正常人(对照组)血浆中D-Dimer的水平。结果与正常对照组比较,肿瘤组D-Dimer水平均明显增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论血浆D-Dimer水平可作为恶性肿瘤患者DIC的诊断及预后判断的一项早期实验室指标。     

单克隆抗体法隐血试验纠正尿液分析仪BLO指标的实验研究

目的　了解单克隆抗体法隐血试验在纠正尿液分析仪BLO结果的作用。方法　通过对142份晨尿标本进行尿十项(主要是BLO)、沉渣镜检及单克隆抗体法隐血试验检测，筛选出三项检查结果不一致标本35例，并分组比较，重点探讨纠正方法。结果　单克隆抗体法隐血试验可准确纠正BLO对游离血红蛋白的检测误差。结论　单克隆抗体法隐血试验结合尿沉渣镜检能对BLO检测结果起到监控作用。     

白介素-17、-23在结核性脑膜炎中的免疫致病机制探讨

目的：探讨白介素（IL）-17、-23在结核性脑膜炎（TBM）中的致病机制及其对TBM诊断和预后的意义。方法：用双抗体夹心法检测18例TBM患者（TBM组）血清及脑脊液（CSF）中IL-17、-23因子水平。并对IL-17、-23与TBM组CSF中各参数的相关性进行分析。结果：TBM组血清和CSF中IL-17水平分别为83.8±5.9和106.4±8.8;IL-23水平分别为103.1±7.1和172.8±8.3,与对照组比均有统计学意义（P〈0.01）。且IL-17、-23升高水平与TBM组CSF中的WBC数量正相关。结论：IL-17、-23在TBM的免疫致病机制中起着重要作用。     

亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中Ⅰ类整合酶基因的研究

目的了解我院临床分离的耐亚胺培南（IMP）的铜绿假单胞菌（PA）中Ⅰ类整合酶基因（intIl）和耐消毒剂-磺胺相关基因（qacE△1-sulI）的存在状况,追溯我院耐亚胺培南铜绿假单胞菌（IRPA）的来源及其耐药机理。方法采用VITEK-AMS60全自动微生物仪进行菌株鉴定和药敏试验,随机挑选自临床分离的60株铜绿假单胞菌（其中30株IMP耐药的PA,30株IMP敏感的PA）。采用聚合酶链反应（PCR）技术及序列分析法检测I类整合子遗传标记（intI1和qacE△1-sulI）基因。结果IMP耐药组对抗生素的耐药率明显高于IMP敏感组;30株IMP耐药的PA中有23株（76．7％）intI1阳性。11株（36．7％）qacE△1一sulI阳性;另30株IMP敏感的PA中有12株（40．O％）intll阳性,3株（10．0％）qacE△1-sulI阳性．阳性基因主要来自神经外科,其次是神经内科和外科ICU病房。结论I类整合子遗传标记基因（intIl和qacE△l-sulI）与PA的耐药和多重耐药具有相关性,特别是IRPA中intIl基因携带率很高,提示intIl基因可能是PA耐IMP及多重耐药的一个重要原因．临床应合理使用抗生素,减少耐药菌株的产生,同时对重点科室的感染控制措施。加强对耐药基因在病原菌种属间传播和扩散的监测工作．