小型船舶无害化卫生厕所的研发及其杀灭血吸虫虫卵的效果评估

目的 研发适宜小型船舶的粪便无害化卫生厕所,并对其杀灭血吸虫虫卵的效果进行评估。 方法 利用三格式厕所原理研发适宜小型船舶的粪便无害化卫生厕所,结合微生物菌剂能分解粪便形成强酸性环境的作用,对两者结合杀灭血吸虫虫卵的效果进行现场模拟试验。 结果 小型船舶无害化卫生厕所结合微生物菌剂能完全杀灭血吸虫虫卵,与对照组差异有统计学意义(P <0. 05)。 结论 研发的小型船舶无害化卫生厕所不需电源、使用简便、节能环保,符合《粪便无害化卫生要求》(GB 7959-2012)规定的血吸虫病卫生要求,对湖区小型船舶改厕工作具有推广应用价值。     

弓形虫新基因表位疫苗质粒的构建及鉴定

目的构建两个弓形虫新基因2B9G1、7C3-C3的表位疫苗质粒,为阐明表位疫苗的保护性奠定基础。方法采用生物信息学方法对新基因2B9G1、7C3-C3进行表位预测,PCR扩增基因中编码3个表位的片段W2b、W2a和W4a,连接入pcDNA3,转入DH5α,挑阳性菌落进行PCR、酶切和测序鉴定;同法将W2a、W4a分别克隆入pcDNA3-W2b载体中W2b片段下游,再将W4a克隆入pcDNA3-W2b2a载体中W2a片段下游。结果经PCR、酶切鉴定及序列测定,W2b、W2a和W4a 3个片段分别插入pcDNA3预期位置;W2a和W4a片段分别插入pcDNA3-W2b预期位置;W4a片段插入pcDNA3-W2b2a预期位置。结论成功构建单表位、双表位、多表位疫苗质粒pcDNA3-W2b、pcDNA3-W2a、pcDNA3-W4a、pcDNA3-W2b2a、pcDNA3-W2b4a、pcDNA3-W2a2b4a。     

弓形虫和乙型肝炎病毒混合核酸疫苗的研究I．pcDNA3-HBsAg—GRA1真核表达质粒的构建及鉴定

目的 构建pcDNA3-HBsAg—GRA1真核表达质粒,为提高弓形虫DNA疫苗保护性做出新的探索,并期望“-／ -苗两用”。方法 采用PCR分别扩增HBsAg、GRA1;经BclI、EcoRⅠ双酶切HBsAg;EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切GRA1;BamHⅠ、XhoⅠ双酶切载体pcDNA3．0;HBsAg、GRA1、pcDNA3．0双酶切纯化产物与T4DNA连接酶在22℃连接过夜,用双酶切及双脱氧末端终止法测序鉴定重组质粒。结果 成功构建pcDNA3-HBsAg—GRA1真核表达质粒。结论 为进一步研究pcDNA3-HBsAg—GRA1诱导的保护性免疫奠定了基础。     

大鼠感染血清免疫筛选弓形虫速殖子cDNA文库

目的为弓形虫病疫苗的研制提供新的抗原分子。方法用弓形虫RH株速殖子感染大鼠,分离其血清作为探针筛选弓形虫cDNA文库,对阳性克隆的插入片段分别进行PCR扩增及DNA序列测定。结果从cDNA文库4×105~5个噬菌斑中筛选出13个阳性克隆,其插入片段大小分别为0.45～2.4kb。对L1、L2、L4和L5四个克隆进行测序,将所得序列查询基因库,结果,克隆L2与弓形虫P24主要抗原基因序列相同,L4与蔗糖丙酮酸磷酸激酶具有同源性,L1无任何相匹配的序列,为未曾报告过的新基因(GenBank登录号为AY180109),命名为T.g-R1。T.g-R1编码134个氨基酸的非跨膜蛋白。PROSCAN分析显示T.g-R1含有2个蛋白激酶C磷酸化位点,2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,1个肉豆酸酰化位点,1个微体细胞C端靶信号。L5为一小片段,无完整编码读框。结论阳性克隆的筛选和鉴定为抗弓形虫病疫苗的研制提供又一途径。     

以多位点酶电泳和其他分子标记对恶性疟原虫作种群基因分析

作者通过多位点酶电泳(MLEE)对5种恶性疟原虫(法属圭亚那有Bobo1和Bobo2两种,苏丹和刚果各一种,另一种由5大洲15个不同地区组成的“全球性”样本)作种群基因分析。刚果种群加用随机扩增多态性DNA(RAPD)、限制性长度多态性(RFLP)和4个抗原基因分析。用同工酶研究了编码酶的基因位点,其中刚果、苏丹及“全球性”样本作了12种酶的位点分析,Bobo1、Bobo2分别作了9种和7种酶的位点分析。DNA从     

抗弓形虫药物靶点的研究进展

##正## 刚地弓形虫属于真球虫目弓形虫科,作为一种专性细胞内寄生原虫,几乎可感染包括人类在内的所有哺乳动物、鸟类和爬行类等动物。它是人或动物流产、死胎、弱智儿等围产期疾患病和导致感染者发生眼科疾病及脑神经疾病的病原体;同时,它又是一种机会致病寄生虫,在机体免疫能力低下如艾滋病患者、器官移植及恶性肿瘤患者中,     

斑点免疫金渗滤法的改进

目的 :改进斑点免疫金渗滤法的渗滤装置 ,降低成本 ,使之更适用于现场操作。方法 :用自制的圆形渗滤片替代塑料渗滤盒 ,并比较二者的效果。结果 :自制的渗滤片体积更小 ,成本更低 ,为一次性使用材料 ;检测抗体的效果与塑料渗滤盒法一致。结论 :自制的渗滤片优于常用的塑料渗滤盒     

弓形虫真核表达质粒pcDNA3/GRA1的构建及序列测定

目的 :构建弓形虫致密颗粒抗原 1 (GRA1 )真核表达质粒 ,为进一步开展DNA疫苗的保护性研究打下基础。方法 :采用PCR扩增出编码GRA1目的基因 ,用EcoRⅠ /XhoⅠ分别对扩增产物和真核表达质粒pcDNA3进行双酶切 ,将GRA1定向克隆到pcDNA3EcoRⅠ /XhoⅠ位点 ;对重组质粒进行PCR ,双酶切初步鉴定后做序列测定。结果 :特异扩增出预计的GRA1片段 ,大小为 5 73bp ;扩增产物双酶切后成功连接到pcDNA3中 ,经PCR ,双酶切及序列测定结果表明重组质粒中含有GRA1读框。结论 :成功构建弓形虫GRA1真核表达质粒。     

医学寄生虫学教学改革初探

医学寄生虫学在整个医学教育中是一门重要的基础课。随着社会的发展和对医学人才需求的变化，为了提高教学质量，结合教研室的实际情况，在教学内容和教学手段上进行了初步的改革探索。     

随机肽库筛选弓形虫特异性抗原表位诱导保护性免疫的研究

目的　从噬菌体随机肽库中筛选出模拟弓形虫特异性抗原表位的短肽分子 ,并探讨其对弓形虫的保护性效果。方法　以纯化的弓形虫免疫兔血清IgG为配基 ,亲和筛选法富集特异性噬菌体 ,随机挑取噬菌体克隆用夹心ELISA法和Dot-ELISA法检测其特异性 ,混合 4个阳性克隆免疫小鼠 ,1月后攻击感染 ,观察小鼠发病时间和死亡时间。结果　经 3轮筛选 ,特异性噬菌体得到了有效富集 ,第 3轮洗脱噬菌体的产量为第 1轮的 16 7倍 ,随机挑取 2 7个噬菌体经Dot -Bloting和夹心ELISA法检测 ,有 2 4个能与弓形虫免疫兔血清及单克隆抗体特异反应。用致死量弓形虫攻击感染经阳性克隆免疫的小鼠 ,存活时间明显长于对照组。结论　免疫筛选噬菌体随机多肽库可获得具有保护性的弓形虫抗原表位 ,为弓形虫疫苗研制提供了新途径。