兔骨骼肌卫星细胞的分离、培养及成肌特性

目的建立高纯度、高丰度的兔骨骼肌卫星细胞的分离、培养方法,并对培养的肌卫星细胞体外增殖和成肌特性进行观察。方法采用改良I型胶原酶和胰蛋白酶混合消化法结合差速贴壁培养以分离、纯化1周龄幼兔小腿三头肌来源的骨骼肌卫星细胞。镜下观察肌卫星细胞生长形态,结蛋白(Desmin)免疫组化染色鉴定体外培养的肌卫星细胞,MTT法绘制细胞生长曲线,并对分离培养的肌卫星细胞成肌特性进行诱导培养观察。结果差速贴壁后的悬浮肌卫星细胞折光性强,呈透亮球形,数量较多,贴壁生长后逐渐变为长梭形;免疫组化染色检测分离培养的细胞高表达Desmin,证明为肌卫星细胞,纯度高达95%;传代培养的肌卫星细胞24 h后开始增殖,第3~7天处于对数生长期,第8天后进入平台期;不经诱导分化培养基培养的肌卫星细胞也可融合形成肌管,但形成肌管速度不及诱导分化培养组快速。结论成功建立了具有操作简便、不易污染和纯度高的兔骨骼肌卫星细胞分离、培养方法,为采用肌卫星细胞为种子细胞的再生医学研究奠定实验基础。     

rhPTH(1-34)对成骨细胞增殖、Collagen I及Osterix mRNA表达的影响

目的 观察间歇给予重组人甲状旁腺激素(1-34)[rhPTH(1-34)]对体外成骨细胞增殖、I型胶原蛋白(CoHagen I)及Osterix mRNA表达的影响,初步探讨rhPTH(1-34)对体外成骨细胞的作用机制.方法 体外培养新生大鼠成骨细胞,间歇循环给予0、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7 M rhPTH(1-34)干预,(24 h为一循环,前12h给药),共2次,用MTT法检测细胞的增殖;RT-PCR法半定量测定成骨细胞Collagen I、Ostefix mRNA的表达.结果 显示rhPTH(1-34)可明显促进成骨细胞的增殖(P<0.05),促进成骨细胞Collagen I和Ostefix mRNA表达(P<0.05),101-9 M增殖、表达最明显,呈剂量依赖关系.结论 rhPTH(1-34)可促进成骨细胞的增殖、分化,可能是通过Collagen I和Ostefix mRNA表达来调节.     

2型糖尿病患者血25-（OH）D、CRP、铁蛋白水平和骨密度的相关性

目的：探讨2型糖尿病患者25-羟维生素D[25-(OH)D]、C反应蛋白（CRP）、铁蛋白水平和骨密度的相关关系。方法本研究共纳入绝经后女性和50岁以上男性的2型糖尿病患者共306例,采用双能X线骨密度仪检测骨密度,同时测定其25-(OH)D、CRP、铁蛋白和HbA1C水平。结果相关性分析提示在校正了年龄和体重指数后,血清25-(OH)D与骨密度出现了显著的正相关（r=0.180,P=0.002）。血清CRP、铁蛋白与骨密度之间无显著相关性。结论2型糖尿病患者中普遍存在维生素D缺乏状况,随着其水平的降低,2型糖尿病患者更容易发生骨密度的降低,从而增加骨质疏松症甚至脆性骨折的发病风险。     

盐酸二甲双胍对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfa-1基因表达的影响

目的初步研究二甲双胍（MF）在体外对小鼠颅盖骨成骨细胞增殖、骨形态发生蛋白一2（BMP一2）及核心结合因子（Cbfa一1）mRNA表达的影响,探讨二甲双胍对骨代谢的可能作用机制。方法（1）分离培养原代颅盖骨成骨细胞并对其进行鉴定。（2）以乳鼠成骨细胞为体外实验模型,不同浓度（0、50、100、200、400Ixmol／L）的MF干预体外培养的成骨细胞24h后,M1vr法检测成骨细胞的增殖能力,实时荧光定量PCR法检测成骨细胞BMP-2及Cbfa-1基因表达。结果二甲双胍干预成骨细胞24h后,可促进成骨细胞的增殖,在浓度400μxmol／L的OD值最大为0．298±0．047（P〈0．05）;可促进BMP-2及Cbfa-1mRNA的表达,呈剂量效应关系。结论二甲双胍可促进成骨细胞的增殖和分化,可能通过调节BMP-2及Cbfa-1的表达,从而促进骨的形成。     

痩素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖及OPG/RANKL mRNA表达的影响

目的初步探讨瘦素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖及骨保护蛋白、核因子κB激活受体配体mRNA表达的影响。方法以小鼠成骨细胞MC3T3-E1为体外实验模型,用MTT法检测瘦素作用MC3T3-E1细胞后的增殖情况,RT-PCR方法检测OPG、RANKL mRNA表达。结果瘦素（10、20、40、80和160ng.mL-1）作用于MC3T3-E1细胞24h后,可促进其增殖,OD值显著增加（P〈0.01）,增加骨保护蛋白mRNA表达,同时降低核因子κB激活受体配体mRNA表达,且呈浓度依赖性。结论瘦素促进MC3T3-E1细胞增殖,同时通过调节骨保护蛋白mRNA和核因子κB激活受体配体mRNA的表达,从而促进骨形成,抑制骨吸收。     

疏肝解郁、软坚散结法治疗甲状腺良性结节患者临床研究

目的 观察彩色多普勒超声评价疏肝解郁、软坚散结法对甲状腺良性结节（肝郁痰凝血瘀型）患者临床疗效。方法 将我院111例甲状腺良性结节（肝郁痰凝血瘀型）患者随机分为对照组56例与实验组55例。对照组予贴敷药剂治疗，实验组予疏肝消瘿方、贴敷药剂联合治疗。比较两组患者临床疗效、各项中医症候评分、游离三碘甲腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）、促甲状腺激素（TSH）、胰岛素样生长因子β-1(IGF-1)、转化生长因子β- 1(TGF-β1)水平，甲状腺结节最大直径、峡部厚度。结果 治疗后，实验组总有效率显著高于对照组（ P<0.05）；两组各项中医症候评分较治疗前均减少，实验组各项中医症候评分均少于对照组（ P<0.05）；两组FT3、FT4、TSH水平较治疗前差异无统计学意义（P>0.05）,IGF-1水平较治疗前减少，TGF-β1水平较治疗前增加，实验组IGF-1水平低于对照组，TGF-β1水平高于对照组（ P<0.05）；两组最大直径、峡部厚度较治疗前均减少，实验组最大直径、峡部厚度均低于对照组（ P<0.05）。结论 疏肝解郁、软坚散结法可提高对甲状腺...     

疏肝解郁、软坚散结法治疗肝郁痰凝血瘀型甲状腺结节疗效研究

目的 观察疏肝解郁、软坚散结法治疗肝郁痰凝血瘀型甲状腺结节临床疗效。方法 将我院120例肝郁痰凝血瘀型甲状腺结节患者随机分为中药组、贴敷组及联合组各40例。中药组服用疏肝消瘿方,贴敷组应用中药贴敷,联合组采用疏肝消瘿方+中药贴敷治疗。比较3组临床疗效,甲状腺结节数量、峡部厚度、最大径、体积,游离T3(FT3)、游离T4(FT4)、促甲状腺激素(TSH)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血尿素氮(BUN)水平,症状评分,转化生长因子β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子(IGF-1)水平变化。结果 治疗后,联合组总有效率高于中药组、贴敷组(P<0.05);联合组甲状腺结节数量、峡部厚度、最大径、甲状腺体积低于中药组、贴敷组(P<0.05);联合组症状评分低于中药组、贴敷组(P<0.05);联合组TGF-β1水平高于中药组、贴敷组,联合组IGF-1水平低于中药组、贴敷组(P<0.05)。3组治疗前后甲状腺、肝、肾功能差异不具有显著性(P>0.05)。结论 疏肝解郁、软坚散结法治疗肝郁痰凝血瘀型甲状腺结节疗效确切,能显著缩小结节,缓解症状,可能与上调...     

硫酸锌对大鼠毒性的某些生物化学和病理学研究

硫酸锌对大鼠的急性毒性属低毒物质,对小鼠属中等毒性物质。大鼠90天喂养试验硫酸锌摄入量为68.5mg/kg及其以上时,血清铜蓝蛋白活性明显降低,血清铁和高密度脂蛋白胆固醇降低,肾脏和睾丸出现多种病变,如肾小球肿胀和蛋白管型等,睾丸基膜增厚和间质细胞增生等。摄入量在19.5mg/kg及其以下时,不产生任何毒性作用。提示硫酸锌的最大无作用剂量为19.5mg/kg。