以 T细胞为靶点的免疫抑制剂研究现状及进展

T细胞是在特异性免疫中发挥重要功能的免疫细胞,其正常的增殖分化在机体免疫监视、防御中起关键作用。大量研究［1‐2］表明,T细胞的异常增殖分化是器官移植排斥反应、自身免疫性疾病等众多疾病发生发展的关键影响因素。随着研究的不断深入,抑制T细胞活化和增殖的免疫抑制剂革命性地改变了这些疾病的临床治疗效果。因此,以 T 细胞为靶点的免疫抑制剂成为治疗器官移植排斥反应和控制自身免疫性疾病发病进程的重要临床治疗手段［3‐4］。本文综述了以T 细胞为靶点的治疗策略以及现有免疫抑制剂的应用和局限,同时总结了基于T细胞治疗的新靶点和天然产物来源的免疫抑制剂研究进展。     

苯并噁唑类化合物K310对LPS刺激RAW264.7巨噬细胞的抗炎作用

目的 探索K310对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞的抗炎作用及机制.方法 在LPS诱导RAW264.7巨噬细胞的模型基础上,采用CCK-8方法检测不同浓度K310对RAW264.7巨噬细胞活性的影响;Griess试剂检测K310对一氧化氮(NO)的影响;酶联免疫吸附法(ELISA)检测K310对IL-6炎性因子的影响;荧光定量PCR方法检测K310对诱导型一氧化氮(iNOS)和IL-6基因表达的影响;荧光免疫印迹法(Western bolt)检测K310对磷酸化的NF-kB和ERK1/2蛋白的影响.结果 K310(5、10和20 μM)不影响LPS刺激RAW264.7巨噬细胞的活性;与LPS刺激组比较,K310不仅能显著抑制NO和IL-6的炎性因子及炎性基因;还能抑制磷酸化的NF-kB和ERK1/2蛋白的表达.结论 K310对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞的炎症具有抗炎作用,其作用机制可能是K310通过抑制NF-kB和MAPK信号通路,从而抑制NO和IL-6炎性因子的产生.     

ZB TB 32生物学功能的研究进展

锌指蛋白家族是真核生物中重要的转录因子家族之一,参与调控多种生物学功能,其包含多个亚家族。ZBTB（zinc finger and BTB domain‐containing protein）属于其中的 POK （POZ and Krüppel）蛋白家族。该亚家族成员在 N 末端有一个B T B／POZ （Broad‐complex ,Tramtrack ,Bric‐a‐brac／Pocvirus and zinc fingers ）结构域,在哺乳动物中高度保守,主要介导蛋白与蛋白之间的相互作用。C末端有数个C2H2锌指结构域,介导蛋白与DNA 序列间的识别以此来发挥转录调节作用,3％的人类基因通过C2H2结构介导转录调节［1‐3］。ZBTB亚家族成员通常作为转录抑制子调节基因表达,该家族成员的生物学功能一直受到广泛关注与研究。     

双抗夹心法酶联免疫吸附试验影响因素探析

目的探析双抗夹心法酶联免疫吸附试验中牛血清清蛋白封闭,吐温20及浓度,样品与检测抗体的加样方式及孵育温度对酶联免疫吸附试验检测结果的影响。方法双抗夹心法酶联免疫吸附试验检测人白细胞介素(IL)-1Ra细胞因子作为模型,检测封闭条件,吐温20及其不同浓度,样品与检测抗体分开孵育及共同孵育,酶联孵育温度对标准品浓度与OD值关系的影响。结果酶联免疫吸附试验不封闭、洗液吐温浓度为0.05%且孵育温度为37℃的R~2=0.995 7;BSA封闭的R~2=0.981 1;洗液中吐温浓度0.005%时R~2=0.991 5,0.5%时R~2=0.9868;样品和检测抗体一同孵育1h或2h的R~2分别为0.964 5和0.874 2;孵育温度为25℃的R~2=0.996 1。结论BSA封闭步骤对低浓度的样品检测灵敏度不强;样品和检测抗体及酶稀释液中必须含有吐温20且浓度在0.05%条件下最合适;样品和检测抗体共同孵育会影响对高浓度样品的检测;37℃和25℃的孵育温度条件下的酶联免疫吸附试验检测灵敏度没有差异,但25℃孵育可以降低OD值背景。     

NLRP12对小鼠病毒性肝炎的保护作用及机制探讨

目的 探究NLRP12基因在MHV3（鼠三型肝炎病毒）诱导的小鼠病毒性肝炎中的作用及调控机制。方法 采用不同滴度MHV3病毒诱导野生型及NLRP12基因敲除C57BL/6J小鼠建立病毒性肝炎模型，观察小鼠生存情况，测定血清ALT、AST的表达，HE染色观察肝组织病理改变，TUNEL染色观察细胞凋亡情况，免疫组化染色检测FGL2蛋白表达，全自动生化仪进行小鼠血细胞分类计数，ELISA测定血清炎性细胞因子（IL - 6、TNF - α）及粒细胞集落刺激因子（G - CSF）的表达。结果 致死滴度（50、75和100 pfu）MHV3感染后，相比野生型小鼠，NLRP12基因敲除小鼠生存率明显降低。非致死滴度（25 pfu）MHV3感染情况下，NLRP12基因敲除小鼠呈现更严重的肝脏病理损伤，血清ALT、AST及炎性细胞因子水平更高，血液循环中性粒细胞数量未显著性上调，并伴随粒细胞分化相关标志物（Myadm）的表达降低，但不影响中性粒细胞趋化基因（CXCL1、CXCL2）及G - CSF的表达。结论 NLRP12基因可能通过调控中性粒细胞的发育分化，促进循环中性粒细胞的产生发挥抗病毒作用，从而保护小鼠免于MHV3病毒的感染，提示NLRP12可作为病毒性肝炎潜在的调控靶标。