基于网络药理学方法、分子对接技术及动物实验验证探讨通塞颗粒治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的作用机制

目的：基于网络药理学方法、分子对接技术和动物实验验证探讨通塞颗粒治疗慢性阻塞性肺疾病 急性加重期（AECOPD） 的作用机制。方法：①预测分析。通过中药系统药理学分析平台筛选通塞颗粒的活性 成分及其对应靶点;利用人类基因（Genecards）、在线人类孟德尔遗传数据系统（OMIM） 等数据库检索 AECOPD 疾病基因;绘制韦恩图并获取药物-疾病共同靶点;构建通塞颗粒活性成分-靶点网络图和蛋白质相 互作用网络图,根据网络关系筛选核心靶点;借助R 语言软件进行基因本体（GO） 富集分析和京都基因与基 因组百科全书（KEGG） 通路富集分析,使用AutoDockTool 1.5.6 软件对通塞颗粒关键活性成分和核心靶点进行 分子对接。②实验验证。随机将50 只SD 大鼠分为对照组、模型组、中药组、西药组、联合组各10 只。除对 照组外,其余各组均构建AECOPD 大鼠模型,并于急性加重前2 d 及其后4 d 予药物灌胃治疗。治疗结束后 检测各组大鼠的肺功能指标[0.3 s 用力呼气容积（FEV0.3）、用力肺活量（FVC）、0.3 s 用力呼气容积与用力肺活 量的比值（FEV0.3/FVC）、呼气流量峰值（PEF） ],检测血清肿瘤坏死因子（TNF） -α、白细胞介素（IL） -17 含量,通过苏木精-伊红染色法（HE） 观察气道与肺组织的病理改变,采用免疫印迹法和酶联免疫吸附测定法 初步验证网络药理学的预测结果。结果：通塞颗粒治疗AECOPD 的关键活性成分为槲皮素、芹黄素、木犀草 素、山奈酚、β-谷甾醇,主要作用于肿瘤抑制蛋白53（TP53）、丝裂原活化蛋白激酶3（MAPK3） 等核心靶 点。GO 富集分析和KEGG 通路富集分析结果表明,通塞颗粒治疗AECOPD 与TNF、IL-17 等信号通路干预氧 化应激、减少细胞凋亡、抑制炎症反应有关。分子对接结果显示,通塞颗粒的关键活性成分与治疗AECOPD 的核心靶点均有较好的结合活性。动物实验研究结果显示,模型组FVC、FEV0.3、FEV0.3/FVC、PEF 值均较对照 组降低（P＜0.05）。中药组、西药组以及联合组的FVC、FEV0.3、PEF 值均较模型组升高（P＜0.05）;联合组 FEV0.3/FVC 值较模型组升高（P＜0.05）。中药组FVC、FEV0.3、FEV0.3/FVC、PEF 值与西药组比较,差异均无统计 学意义（P＞0.05）。联合组FVC、PEF 值均较中药组及西药组升高（P＜0.05）;联合组FEV0.3 较西药组升 高（P＜0.05）。模型组血清TNF-α、IL-17 含量均高于对照组（P＜0.05）;中药组、西药组及联合组的TNF-α、 IL-17 含量均低于模型组（P＜0.05）;联合组血清TNF-α、IL-17 含量均低于中药组、西药组（P＜0.05）。模 型组肺组织磷酸化P65/非磷酸化P65、磷酸化AKT/非磷酸化AKT、磷酸化MAPK1/3/非磷酸化MAPK1/3 和非 磷酸化TP53/GAPDH 蛋白表达含量均高于对照组（P＜0.05）;中药组、西药组以及联合组上述蛋白表达含量均 低于模型组（P＜0.05）;联合组上述蛋白表达含量均低于中药组、西药组（P＜0.05）。结论：通塞颗粒治疗 AECOPD 具有多成分、多靶点、多通路、整体调节的作用特点,为后续深入研究提供了数据支持。     

新型冠状病毒肺炎普通型患者消化道症状和胸部CT与舌象关系探讨※

目的 分析新型冠状病毒肺炎（COVID-19）普通型患者的消化系统症状与舌象及胸部CT的关系。方法 收集177例COVID-19普通型患者的一般情况及首发症状（包括呼吸道和消化道症状）、舌象、胸部CT等信息共同构建数据库。结果 伴有消化道症状者55例，无消化道症状者122例。舌色主要表现为红舌和青紫舌；舌形主要表现为胖大舌、齿痕舌；舌苔主要表现为苔黄、苔薄、苔腻。伴有消化道症状者中齿痕舌、苔黄、苔厚苔腻的占比高于无消化道症状者，差异具有统计学意义（P<0.05）；与无消化道症状者比较，有消化道症状者出现双肺片状磨玻璃影较多，出现右肺磨玻璃影较少，差异具有统计学意义（P<0.05）。在胸部CT与舌象关系中，单肺磨玻璃影、双肺磨玻璃影的患者红舌占比相对最高，伴有实变的患者青紫舌占比相对较高；双肺散在磨玻璃影及双肺片状磨玻璃影患者主要表现为齿痕舌、胖大舌；各种不同的CT表现，均多数表现为薄黄腻苔。结论 COVID-19的病位在肺、脾；病理特点为毒、湿、热、瘀、虚，湿热贯穿病程始终。有消化道症状者湿、热的病理表现更明显，并迅速出现双肺的病理改变，病程进展相对较快。     

清肺益肾方治疗痰热壅肺型老年肺炎临床疗效及对血清CD4~+、CD8~+水平的影响

[目的]探讨清肺益肾方治疗老年肺炎(痰热壅肺证)的疗效及对血清CD4~+、CD8~+水平的影响。[方法]将老年肺炎患者随机分为对照组和治疗组,对照组给予抗炎、祛痰平喘、退热等对症治疗,治疗组在此基础上给予清肺益肾方汤剂口服,比较两组临床疗效及治疗前后、随访1个月的血常规、C反应蛋白、症状评分、影像学、血清CD4~+、CD8~+水平的变化。[结果]治疗后,对照组总有效率为80.00%,治疗组总有效率为96.67%,较对照组显著升高(P0.05);治疗组咳嗽、黄痰、口渴症状积分较对照组显著下降(P0.05);治疗组白细胞计数、中性粒细胞比率、C-反应蛋白、胸部CT积分较对照组显著下降(P0.05);治疗组CD4~+于治疗14 d和随访1个月均较对照组显著升高(P0.05,P0.01),且CD8~+于随访1个月较对照组显著降低(P0.05)。[结论]清肺益肾方治疗痰热壅肺型老年肺炎疗效显著,其作用机制可能与减轻炎症反应,同时增强免疫力有关。     

异钩藤碱上调miR-192-5p对TNF-α诱导的人支气管上皮细胞凋亡和炎症因子释放的作用及其机制

探讨异钩藤碱（IRN）对肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的人支气管上皮细胞（16HBE）凋亡和炎症因子释放的影响,并阐明其可能的作用机制。     

黄芩苷对肺癌H460细胞生物学特性及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨中药单体黄芩苷对人肺癌H460细胞增殖、凋亡、上皮间质转化(EMT)、侵袭和迁移生物学特性及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测不同浓度的黄芩苷对H460细胞细胞增殖的影响,并计算半数抑制浓度(IC50)。通过流式细胞术检测黄芩苷对H460细胞凋亡的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中上皮性钙黏附素(E-cadherin)、神经性钙黏附素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)基因表达量,划痕实验检测黄芩苷对H460细胞迁移能力的影响,Transwell实验检测黄芩苷对H460细胞侵袭能力的影响,Western印迹检测H460细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及Wnt/β-catenin信号通路Wnt1、β-连环蛋白(β-catenin)等关键蛋白表达情况。结果黄芩苷可抑制H460细胞增殖,且呈浓度依赖性关系,对H460细胞的IC50为(188.1±11.52)μmol/L;黄芩苷以浓度依赖性促进H460细胞凋亡,抑制H460细胞侵袭和迁移;qRT-PCR结果发现黄芩苷能够促进H460细胞中E-cadherin基因表达,抑制N-cadherin和Vimentin基因表达;黄芩苷可下调PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达,上调Bax蛋白表达,且能够抑制Wnt/β-catenin信号通路中Wnt1和β-catenin蛋白表达。结论黄芩苷可抑制人肺癌H460细胞增殖、EMT、侵袭和迁移,促进细胞凋亡,该过程的分子机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。     

清肺益肾方治疗痰热壅肺型老年肺炎临床疗效及对血清CD4+、CD8+水平的影响

[目的] 探讨清肺益肾方治疗老年肺炎（痰热壅肺证）的疗效及对血清CD4⁺、CD8⁺水平的影响。[方法] 将老年肺炎患者随机分为对照组和治疗组,对照组给予抗炎、祛痰平喘、退热等对症治疗,治疗组在此基础上给予清肺益肾方汤剂口服,比较两组临床疗效及治疗前后、随访1个月的血常规、C反应蛋白、症状评分、影像学、血清CD4⁺、CD8⁺水平的变化。[结果] 治疗后,对照组总有效率为80.00%,治疗组总有效率为96.67%,较对照组显著升高（P<0.05）;治疗组咳嗽、黄痰、口渴症状积分较对照组显著下降（P<0.05）;治疗组白细胞计数、中性粒细胞比率、C-反应蛋白、胸部CT积分较对照组显著下降（P<0.05）;治疗组CD4⁺于治疗14 d和随访1个月均较对照组显著升高（P<0.05,P<0.01）,且CD8⁺于随访1个月较对照组显著降低（P<0.05）。[结论] 清肺益肾方治疗痰热壅肺型老年肺炎疗效显著,其作用机制可能与减轻炎症反应,同时增强免疫力有关。