HPV18E6基因对HeLa细胞PKR、eIF2α表达、激活及其生物学行为的影响

宫颈癌的发生与HPV感染相关,高危型HPV(high risk-HPV,HR-HPV)突破机体抗病毒的防御机制,在宫颈部位的整合感染是宫颈癌发生的始动因素和病理基础.作为机体防御机制中的重要分子,蛋白激酶R(protein kinase R,PKR)在细胞生长、分化、凋亡及抵御病毒感染、抗肿瘤方面均发挥着重要的生物学效应.宫颈癌组织中PKR常处于去磷酸化的失活状态,并与HPV感染、宫颈癌病情进展及不良预后有关[1].本研究旨在探讨HPV18 E6癌基因对PKR/真核细胞起始因子2α(α subunit of eukaryotic initiation factor 2,eIF2α)信号传导通路活性及宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭能力的影响,并探讨其可能的分子机制.     

血清D-二聚体测定对诊断胎盘早剥的应用价值

严重的胎盘早剥起病急骤，病情凶险，一旦发生将直接威胁母婴生命。据报道，约66．7％的胎盘早剥由妊高征引起，DIC则是胎盘早剥所致对孕妇威胁最大的并发症之一，几乎与胎盘早剥同时发生。D-二聚体是诊断DIC的敏感指标，现将监测重度子痫前期患者血清D-二聚体用于诊断胎盘早剥的体会报告如下。     

HPV16/18E6蛋白和PKR/p-PKR在宫颈病变的表达及意义

目的:探讨宫颈病变组织HPV16/18感染对蛋白激酶R(PKR)激活的影响及两者在宫颈癌形成、演进过程中的作用和对宫颈癌患者预后的影响。方法:用免疫组化SP法检测HPV16/18型E6蛋白(E6)、PKR、磷酸化型PKR(p-PKR)在63例宫颈癌、114例宫颈上皮内瘤样病变(CINⅠ~Ⅲ)、15例正常宫颈组织的表达。结果:E6蛋白与PKR在各组的阳性表达率与宫颈病变级别呈正相关(P<0.05,P<0.05),E6蛋白与PKR在各组的阳性表达率呈正相关(P<0.05);宫颈癌组PKR阳性表达率明显高于p-PKR(P<0.01);E6、PKR阳性表达率与肿瘤大小有关(P<0.05,P<0.05);宫颈癌患者病情进展与临床分期显著相关(P<0.01),病情进展与E6、p-PKR阳性表达率相关(P<0.05,P<0.05)。结论:HPV16/18感染可阻碍PKR激活,突破机体防御HPV16/18感染的机制,在宫颈癌的发生及演进过程中可能起了重要作用,对宫颈癌患者预后不利;p-PKR能抑制宫颈癌患者病情进展,可能改善其预后。     

宫颈病变组织中PKR、p-PKR、p-EIF2α表达及意义

目的:探讨蛋白激酶R(PKR)→真核细胞翻译起始因子2α(EIF2α)信号传导通路中PKR、磷酸化型PKR、EIF2α(p-PKR、p-EIF2α)表达与宫颈病变的相关性、在宫颈肿瘤形成演进过程中的作用及对宫颈癌患者预后的影响.方法:采用免疫组化法检测PKR、p-PKR、p-EIF2α在63例宫颈癌、114例宫颈上皮内瘤样病变(CINⅠ～Ⅲ)、15例正常宫颈组织中的表达.结果:PKR在各组的阳性表达率随宫颈病变级别升高而升高,并与宫颈病变级别呈正相关(P < 0.05);p-PKR、p-EIF2α在各组的阳性表达率随宫颈病变级别升高而先升高、后下降;在宫颈癌组,PKR的阳性表达率明显高于p-PKR(P < 0.01);宫颈癌患者临床分期晚者病情进展快(P < 0.01),p-PKR、p-EIF2α阴性表达者病情进展快(P < 0.05).结论:PKR的表达与宫颈病变级别相关;在宫颈高级别病变中存在PKR、EIF2α磷酸化障碍或p-PKR、p-EIF2α去磷酸化机制,使宫颈病变进展,可能导致宫颈癌患者预后不良.     

NF-κBp65、p-NF-κBp65在宫颈病变组织中的表达及意义

目的:探讨宫颈病变组织中核因子NF-κBp65、磷酸化型NF-κBp65(p-NF-κBp65)的表达及临床意义,以及高危型人乳头状瘤病毒(hsHPV)对其表达的影响.方法:采用免疫组化SP法检测NF-κBp65、p-NF-κBp65在67例宫颈癌、149例宫颈上皮内瘤样病变(GIN Ⅰ-Ⅲ)、15例正常宫颈组织中的表达.结果:NF-κBp65、p-NF-κBp65的表达随宫颈病变级别升高而升高,并与宫颈病变级别呈正相关(P＜0.05)；NF-κBp65、p-NF-κBp65在hs-HPV阳性组的表达高于hs-HPV阴性组(P＜0.05)；NF-κBp65、p-NF-κBp65在癌细胞高分化、肿瘤直径≤4 cm、临床Ⅰ-Ⅱ期组的表达低于癌细胞中低分化、肿瘤直径＞4 cm、临床Ⅲ-Ⅳ期组(P＜0.05).结论:hs-HPV能促进NF-κBp65的表达和激活,NF-κBp65的表达和激活可能与宫颈癌的发生、发展密切相关.     

HPV（16／18）E6、PKR、p-PKR、p-EIF2α在宫颈病变组织表达的意义

目的：探讨HPv（16／18）E6、蛋白激酶R（PKR）、磷酸化型PKR（p—PKR）、磷酸化型真核细胞翻译起始因子2α（p—EIF2α）在各级别宫颈病变组织的表达差异与宫颈病变级别的相关性及对宫颈癌患者预后的影响。方法：采用免疫组化法检测HPv（16／18）E6、PKR、p-PKR、p-EIF2a在63例宫颈癌、114例宫颈上皮内瘤样病变（CINI、CINⅡ、CINⅢ）、15例正常宫颈组织中的表达。结朵：HPV（16／18）E6在各组的阳性表达率为6．7％、15-4％、22．9％、27．5％、39．7％,宫颈癌组明显高于正常组及CINI组（P〈0.01,P〈0.05）;PKR在各组的阳性表达率为6．7％、17．9％、25．7％、30．0％、46．O％,宫颈癌组明显高于正常及CINI-Ⅱ组（P〈0.01,P〈0.01,P〈0.05）;p-PKR在各组的阳性表达率（6．7％、15．4％、20．0％、15．0％、15。9％）无统计学差异（P〉0．05）;p—EIP2α在各组的阳性表达率为6．7％、23．1％、31．4％、40．O％、30．2％,CINⅢ组高于正常宫颈组（P〈0.05）;HPV（16／18）E6、PKR在各组的阳性表达率与宫颈病变级别成正相关（P〈0．05．P〈0.05）;在宫颈癌组,PKR的阳性表达率明显高于p-PKR（P〈0．01）;宫颈癌患者临床分期晚者病情进展快（P〈0．01）,p-PKR、P—EIF2a阴性表达者病情进展快（P〈0.05,P〈0.05）。结论：HPV（16／18）E6使p-PKR、P—EIF2a失活,促进宫颈病变进展,导致宫颈癌患者预后不良;p-PKR、p-EIF2a能抑制病情进展,改善其预后。     

TLR3在宫颈HPV16持续性感染及宫颈病变中的作用

目的：探讨Toll样受体3（TLR3）在宫颈人乳头瘤病毒16（HPV16）持续性感染及宫颈病变中的作用。方法：选取宫颈液基细胞学检查正常的HPV16阳性者157例,其中40例6个月后复查仍为HPV16阳性（HPV16持续感染组）,117例6个月后复查转为阴性（HPV16非持续感染组）。同时选择同期就诊的宫颈HPV16阳性、临床病理资料完整的宫颈疾病患者共206例,其中A组119例（慢性宫颈炎102例、CINⅠ17例）、B组66例（宫颈CINⅡ~Ⅲ57例,原位癌9例）和C组21例（宫颈浸润癌）。以聚合酶链反应（PCR）方法检测TLR3及β干扰素（IFN-β）DNA相对表达量,应用基因测序方法进行TLR3基因突变分析。结果：HPV16持续感染组TLR3、IFN-βDNA相对表达量低于HPV16非持续感染组（均P〈0.05）。HPV16持续感染组与非持续感染组TLR3与IFN-βDNA相对表达量均呈正相关（均P〈0.001）。在HPV16持续感染组与非持续感染组中均未检测到TLR3扩增片段的基因突变。HPV16阳性宫颈病变的3组患者TLR3及IFN-βDNA相对表达量差异有统计学意义（均P〈0.05）。TLR3、IFN-βDNA相对表达量均为A组高于B组及C组（均P〈0.05）,B组高于C组（P〈0.05）。在不同级别宫颈病变中TLR3与IFN-βDNA相对表达量呈正相关（均P〈0.001）。结论：TLR3可能通过调控IFN-β表达而调节宫颈局部免疫功能,TLR3表达减低不仅与宫颈HPV16持续性感染有关,而且在宫颈癌前病变及宫颈癌发生及进展中发挥重要作用。     

hrHPV 在宫颈癌中的感染状况及对 Caspase-1 和 IL-1β 表达的影响及意义

摘要： 目的 探讨宫颈癌中高危人乳头瘤病毒（hrHPV）感染状况及对半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase） -1 和白细胞介素（IL） -1β表达的影响及临床意义。方法 以 102 例宫颈癌患者（宫颈癌组）、 60 例宫颈上皮内瘤样病变（CIN 组） 及宫颈正常的患者 30 例 （对照组） 为研究对象, PCR-反向点杂交法结合 DNA 芯片技术对各组 hrHPV DNA 进行感染和分型检测。免疫组化 SP 法检测各组 Caspase-1 和 IL-1β的表达。分析宫颈癌患者 hrHPV 感染者 （阳性组）和阴性组、 单一类型感染与多重感染中 2 指标的表达差异。考察 Caspase-1 和 IL-1β表达与宫颈癌患者临床病理参数的关系。结果 宫颈癌组 hrHPV 感染 （阳性组） 75 例 （73.5％）, 检出 hrHPV 11 种, 其中单一类型和多重 hrHPV 感染分别为 61 例（81.3％）和 14 例（18.7％）。宫颈癌组 hrHPV 感染率高于 CIN 组及对照组（36.7％和 6.7％）; Cas⁃ pase-1 和 IL-1β阳性表达率（61.8%和 51.0%）高于对照组（26.7%和 23.3%）, Caspase-1 阳性表达率高于 CIN 组（40.0%, 均 P＜0.01）。宫颈癌患者 hrHPV DNA 表达阴性组的 Caspase-1 和 IL-1β阳性表达率 （77.8%和 74.1%） 均高于相应阳性组 （56.0%和 42.7%）。Caspase-1 和 IL-1β在 hrHPV 单一感染组与多重感染组中阳性表达率差异均无统计学意义 （P＞0.05）。宫颈癌组的 Caspase-1 和 IL-1β蛋白的表达与癌细胞分级、 肿瘤大小、 淋巴结转移及临床分期有关 （P＜0.05 或 P＜0.01）。结论 宫颈癌中存在 hrHPV 单一和多重感染, 且感染率高; hrHPV 可抑制 Caspase-1 和 IL-1β的表达, 促进宫颈癌进展。     

PKR转导通路失活与宫颈癌

干扰素诱导的双链RNA（dsRNA）激活的蛋白激酶R（PKR）是一种全身广泛表达的丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶,具有特异的分子构型,是机体抑制病毒的关键靶点和肿瘤抑制剂,是宿主防御机制中发动细胞死亡来对抗病毒感染和肿瘤形成的关键点。但宫颈感染人乳头瘤病毒（HPV）、单纯疱疹病毒（HSV）、人巨细胞病毒（HCMV）等致瘤病毒后常使PKR处于失活状态,导致病毒感染扩散,病毒癌基因有机会整合入宿主细胞基因组内,表达病毒癌蛋白,破坏细胞周期自我调控和凋亡机制,延缓细胞死亡,干扰某些关键基因的表达,导致某个细胞克隆永生化,最终诱发癌变。