血清肝癌特异性结合多肽的筛选

目的 从噬菌体展示肽库中筛选出能够用于血清学筛查的多肽.方法 利用M13噬菌体随机展示肽库,对15例临床确诊肝癌患者的血清和15例正常体检者的血清进行4轮吸附-洗脱筛选.挑取筛选后的噬菌体单克隆,用血清试验筛选特异性及阳性率较高的单克隆.目标单克隆通过DNA测序确定其表达的多肽序列,进而人工合成带FITC标记的多肽,再对血清进行鉴定.结果 随机挑取的50个经过4轮筛选的噬菌体单克隆.通过血清试验,从中筛选出9个特异性和确诊率较高的单克隆,其中单克隆ZH-3对肝癌血清确诊率达到46.7%.ZH-3经DNA测序分析,确定其表达的多肽序列为:SAHGTSTGVPWP.结论 ZH-3多肽在肝癌患者血清中有一定的检出率,提示ZH-3多肽能够为研发肝癌诊断试剂奠定基础.

Abstract：

Objective To find the liver cancer specific peptide for serological screen of liver cancer patients via screening phage-display peptide library. Methods Fifteen sera from liver cancer patients and physical examinates were collected for the four-round screening with Ph. D. 12TM phage display peptide kit. Highly specific phage monoclones were selected based on the ELISA results of the serological assay. The peptide labeled with FITC was synthesized according to the DNA sequencing of the optimal monoclone and tested with serum via fluorescent imagery. Results Nine highly specific monoclones were found among 50 selected ones after 4 rounds of screenings. The positive rate of the optimal monoclone,ZH-3, reached 46.7 %. The peptide sequence of ZH-3 was concluded by DNA sequencing as SAHGTSTGVPWP. Desirable specificity and affinity were also shown in the serum of liver cancer patients. Conclusion The peptide ZH-3 can be used as a diagnostic reagent for liver cancer.     

含胆酸的肠内营养在肝硬化大鼠肝切除术后的应用

目的探讨含胆酸的肠内营养在肝硬化大鼠肝切除术后的应用。方法24只肝硬化大鼠随机分为术前组、肝切除术后1d组、肝切除术后行不含胆酸的肠内营养5d组、肝切除术后行含胆酸的肠内营养5d组,各6只。并选择6只正常大鼠作为正常对照组,测大鼠肝功能、炎症反应、脂质过氧化、肝组织白蛋白（ALB）mRNA的表达和肝组织Ki67蛋白的表达。结果与不含胆酸的肠内营养5d组比较,含胆酸的肠内营养5d组血清AST、ALT、ALP显著下降（P〈0.05）,血清ALB、IGF-1显著升高（P〈0.05）,血清IFN-γ、TNF-α、MDA显著下降（P〈0.05）,血清SOD活性显著升高（P〈0.05）,肝组织ALBmRNA表达显著升高（P〈0.05）,肝组织Ki67蛋白表达显著升高（P〈0.05）。结论含胆酸的肠内营养可以加快肝硬化大鼠肝切除术后肝功能的恢复,减轻炎症反应和脂质过氧化损伤,促进肝脏蛋白合成和残肝再生。     

肝癌特异性噬菌体多肽的筛选和初步鉴定

目的 利用噬菌体展示肽库筛选与肝癌HepG2细胞特异性结合的多肽,为筛选及明确新的肝癌早期诊断和治疗标志物打下基础.方法 以肝癌细胞HepG2为靶细胞,LO-2为吸附细胞,在37℃条件下对噬菌体随机12肽库进行多轮减性筛选,挑取单克隆扩增并鉴定.利用ELISA初步鉴定克隆亲和力,测定阳性克隆DNA测序并进行同源性及氨基酸分析.结果 经过3轮减性筛选发现,随机挑选的30个单克隆中,其中ZS-9对HepG2具有较高亲和力,氨基酸测序结果表明,该序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBankDNA序列数据库和Swiss-Prot蛋白数据库中的已知基因和蛋白无同源性,而且,国内外文献均未见报道,表明笔者筛选到一新的肝癌相关抗原的配体.结论 利用噬菌体随机12肽库成功筛选到与肝癌细胞HepG2具有较高亲和力的多肽,为筛选鉴定新的肝癌特异的标志物奠定工作基础,也为肝癌的早期诊断和靶向治疗进一步研发确定了靶标.     

原发性肝癌术后复发机理及其影响因素

复发已成为肿瘤患者切除术后的主要死因,是长期存活的主要障碍。原发性肝癌(ｐｒｉｍａｒｙｌｉｖｅｒｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＰＬＣ)中大肝癌根治性切除术后5年复发率约80%,小肝癌亦达60%左右,使肝癌手术后的远期疗效不理想。因此,研究肝癌术后复发机理及其影响因素成为近期的热点之一。1　复发机理肿瘤术后复发主要有2种情况:一是手术不彻底导致癌细胞在体内残留(包括原发器官内或其它部位),一段时间后残癌增大;二是重新从癌前病变演化而来的复发。目前研究表明肝内转移和多中心发生是ＰＬＣ术后复发的两大机理。多中心发生学说愈来愈引起人…     

精氨酸在肝硬化大鼠全胃肠外营养的应用

目的 :观察精氨酸在肝硬化大鼠全胃肠外营养 (TPN)时的作用。方法 :19只肝硬化大鼠随机分成 3组 ,肝硬化对照组 6只 ,肝硬化TPN组 7只 ,肝硬化TPN 精氨酸组 6只。观察大鼠生存情况 ,大鼠肝功能、血脂水平和肝脂含量的变化。结果 :除TPN组有一只大鼠因输液过快、肺水肿死亡外 ,其余大鼠均成活。与对照组比较 ,TPN组血清TBIL ,AST和ALT差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,ALB明显降低 (P <0 0 5 ) ,血TG水平明显升高 (P <0 0 5 ) ;肝TG ,CHO含量明显升高 (P <0 0 5 )。TPN 精氨酸组与TPN组比较 ,血清AST明显降低 (P <0 0 5 ) ;血清ALB有所升高 ,但差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;血清TG ,CHO水平有所降低 ,但差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;肝TG含量明显降低 (P <0 0 5 )。结论 :精氨酸可以改善硬化肝TPN时进一步损害和脂代谢紊乱。     

岩舒对人大肠癌细胞株HCT8/VCR多药耐药的逆转作用及P糖蛋白表达的影响

目的研究岩舒对大肠癌耐药细胞株HCT-8/VCR的逆转作用及P糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法 MTT法测定岩舒含药血清对HCT-8/VCR细胞株的逆转作用,并以流式细胞仪测定P-gp的表达。结果经岩舒含药血清作用72 h后,HCT-8/VCR细胞株对化疗的耐药性显著下降,对长春新碱逆转指数为0.893±0.085,其逆转倍数大于13.7倍,与维拉帕米比较无统计学差异(p>0.05)。HCT-8/VCR细胞的P-gp表达显著高于HCT-8(p<0.01),经岩舒含药血清作用后P-gp表达显著降低(p<0.01)。结论岩舒可以逆转人大肠癌耐药细胞株HCT-8/VCR的多药耐药性,其机制可能与其下调P-gp的表达有关。     

原发性肝癌术后复发机理及其影响因素

复发已成为肿瘤切除术后患者的主要死因 ,是长期存活的主要障碍。原发性肝癌 (primary liver carcinoma,PL C)中大肝癌根治性切除术后 5年复发率约 80 % ,小肝癌亦达 6 0 %左右 ,使肝癌手术后的远期疗效不理想。因此 ,研究肝癌术后复发机理及其影响因素成为热点之一。本文就此综述如下。1　复发机理肿瘤术后复发主要有两种情况 :一是手术不彻底导致癌细胞在体内残留 (包括原发器官内或其它部位 ) ,一段时间后残癌增大 ;二是重新从癌前病变演化而来的复发。目前研究表明肝内转移和多中心发生是 PL C术后复发的两大机理。在肿瘤发生发展过…     

肉毒碱在肝硬化大鼠全胃肠外营养的应用

目的观察肉毒碱在肝硬化大鼠全胃肠外营养(TPN)时的作用。方法19只肝硬化大鼠随机分成3组，肝硬化对照组(A组)6只，肝硬化TPN组(B组)7只和肝硬化TPN+肉毒碱组6只。观察大鼠生存情况，大鼠肝功能、血脂水平和肝脂含量的变化。结果除TPN组有1只大鼠因输液过快、肺水肿死亡外，其余大鼠均成活。血清TBIL，AST和ALTB，C组与A组变化比较差异无显著意义(P＞0.05)，ALB明显降低(P＜0.01)。血TG水平明显升高(P＜0.01)，肝TG，CHO含量明显升高(P＜0.01)。C组与B组比较，血清ALB有所升高，但差异无统计学意义(P＞0.05)，血清TG，CHO水平明显降低(P＜0.01和P＜0.05)，肝TG，CHO含量明显降低(P＜0.01)。结论肉毒碱可以改善硬化肝TPN时进一步肝损害和脂代谢紊乱。     

胆酸对肝硬化大鼠肝大部分切除术后肝脏功能的影响

目的探讨胆酸对肝硬化大鼠肝切除术后肝脏功能的影响。方法24只肝硬化大鼠肝切除术后随机分为胆酸组和对照组喂养1周,每组12只。对照组给以标准饲料喂养,胆酸组给以含0.2%胆酸的饲料喂养。1周后检测大鼠胆汁分泌速度及胆汁总胆汁酸（TBA）含量,检测肝功能、有丝分裂指数（MI）、增殖细胞核抗原（PCNA）标记指数、细胞核DNA含量。结果胆酸组胆汁分泌速度、胆汁TBA含量、血清ALB含量、MI、PCNA标记指数、细胞核DNA含量均高于对照组（P〈0.01）,血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）含量均低于对照组（P〈0.01）。结论胆酸可以增加肝硬化大鼠肝切除术后胆汁分泌速度及胆汁TBA含量,促进大鼠肝功能恢复和肝再生。     

孟氏骨折手术致挠神经移位于挠骨头处嵌压手法治疗成功一例报告

患者女性,38岁,工人。住院号27410。1984年8月4日左上肢被汽车撞伤,摄片诊断为“左伸直型孟氏骨折”住院。查体:左前臂肿胀,畸形,活动受限,各指活动及感觉正常,挠动脉搏动良好。8月10日在全麻下行手术治疗。于止血带下取左前臂背侧上段切口长约12cm,显露尺骨骨