岩黄连总碱对人肺癌A549细胞增殖,凋亡及Caspase,Survivin表达的影响

目的:初步探讨岩黄连总碱对人肺腺癌A549细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用,及其可能的作用机制。方法:将肺癌A549细胞株在体外条件下加入不同质量浓度岩黄连总碱。用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测不同浓度(0.1,0.05,0.01,0.005 g·L-1)岩黄连总碱分别作用24,48,72 h后,对人肺腺癌A549细胞的生长抑制情况。采用Hoechst染色法检测岩黄连总碱处理A549细胞48 h的生长情况。流式细胞术检测岩黄连总碱不同药物浓度诱导凋亡的情况。RT-PCR法检测岩黄连及顺铂对A549细胞中Caspase-3,Survivin mRNA的表达影响变化情况。结果:MTT结果提示岩黄连总碱对肺癌A549细胞增殖具有一定的抑制作用,且抑制作用呈现时间-剂量关系。MTT及Hoechst染色显示岩黄连总碱组较阴性组明显抑制A549细胞增殖(P0.05)。流式细胞仪检测结果显示岩黄连诱导A549细胞凋亡作用随着药物浓度的增加,凋亡率升高。RT-PCR结果提示岩黄连组较阴性组上调了Caspase-3 mRNA的表达,下调了Survivin mRNA的表达。结论:岩黄连总碱具有一定的抑制人肺腺癌A549细胞增殖和诱导凋亡作用,并呈时间-剂量关系。其机制可能与上调Caspase-3的表达和下调Survivin的表达有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体的表达及TRAIL的抗癌作用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性杀伤肿瘤细胞同时赦免正常细胞。最近有报道，化疗可加强TRAIL诱导肺癌细胞凋亡。本研究意在观察TRAIL受体(TRAILR)的表达及TRAIL与顺铂、紫杉醇联合作用的抑癌性。     

基质细胞衍生因子-1/CXC趋化因子受体4在支气管哮喘大鼠气道炎症及气道重塑中的作用

目的 探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)在支气管哮喘(哮喘)大鼠气道炎症及气道重塑中的作用.方法 将18只SPF级SD雌性大鼠按随机数字表法随机分为对照组、哮喘4周组和哮喘8周组,每组6只.卵清白蛋白(OVA)致敏后,雾化吸人OVA制作哮喘模型.哮喘模型成功后,测定气道压力;通过HE染色、Image-Pro Plus图像分析软件分析大鼠气道平滑肌的嗜酸粒细胞浸润情况,测定支气管管腔的内周长、管壁面积、支气管平滑肌面积以及平滑肌细胞核数;RT-PCR、Western blot方法检测各组大鼠肺组织SDF-1、CXCR4的表达变化;免疫组织化学法检测各组大鼠气道壁SDF-1表达的变化;统计数据并分析SDF-1、CXCR4与哮喘气道重塑及气道炎症的关系.结果 哮喘4周组、哮喘8周组大鼠的气道反应性、气道壁嗜酸粒细胞计数、支气管管壁面积、支气管平滑肌面积、平滑肌细胞核数目均明显高于对照组,哮喘两组间上述指标差异均有统计学意义(均P＜0.01);RT-PCR检测结果显示,哮喘4周组、哮喘8周组大鼠肺组织SDF-1(分别为0.583±0.004和0.724±0.008)、CXCR4(分别为0.467±0.003和0.655±0.002)的表达明显高于对照组(SDF-1为0.146 ±0.003、CXCR4为0.281±0.002),哮喘8周组的SDF-1及CXCR4的表达亦明显高于哮喘4周组,差异均有统计学意义Western blot检测结果显示,(均P＜0.01).Western blot检测结果显示,哮喘4周组、哮喘8周组大鼠气道壁SDF-1的表达(分别为0.270 ±0.006和0.350±0.009)明显高于对照组(0.180±0.009),哮喘8周组的SDF-1的表达量亦高于哮喘4周组,差异均有统计学意义(均P＜0.01);各组大鼠肺组织、气道壁SDF-1、CXCR4mRNA及蛋白的表达与气道反应性、嗜酸粒细胞浸润数、支气管壁面积、支气管平滑肌厚度及支气管平滑肌细胞核数均呈正相关(均P＜0.01).结论 SDF-1/CXCR4信号轴可能在哮喘气道炎症及气道重塑病理过程中起重要作用.     

三氧化二砷通过抑制NF-κB增强TRAIL诱导A549细胞凋亡的作用研究

【摘要】 目的 研究三氧化二砷(As2O3)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及对核转录因子-kappaB(NF-κB)表达的影响。方法 采用As2O3、TRAIL单用和联合作用于体外培养的A549细胞,以四甲基偶氮唑蓝比色法测细胞增殖抑制率和流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测NF-κB mRNA的表达,Western blot检测NF-κB蛋白的表达,酶联免疫吸附(ELISA)检测NF-κB的活性。结果 As2O3与TRAIL联用对A549细胞增殖的抑制作用均比单药组强(P<0.05);联合用药组诱导凋亡作用强于单药组(P<0.05);联合用药组明显抑制NF-κB表达,并抑制其活性(P<0.05)。NF-κB mRNA、蛋白及其活性与细胞凋亡率呈负相关（P均<0.05）。结论 As2O3可能通过NF-κB通路,增强TRAIL诱导A549细胞凋亡的作用。     

支气管镜介导下高频电切割及电凝治疗良、恶性气道疾病

近十年来,对于肺癌的手术治疗有了很大的进展,但仍有许多肺癌患者在确诊时因为局部病灶、淋巴结转移等失去手术机会,据统计Ⅲa期以内可行手术治疗的肺癌患者为15％,而所有手术患者中30％有复发或转移,此外经化疗、放疗后有10％～40％患者有第二原发肿瘤的可能。因此经支气管镜介入治疗已成为一种重要的手段,其中,高频电切割和电凝作为一个可选择性的治疗方法,     

国内20年肺泡蛋白沉积症误诊原因汇总分析

目的 汇总分析20年来国内报道的肺泡蛋白沉积症(PAP)的临床特点、影像学特点、确诊方法、误诊情况、治疗及预后,为临床医师快速准确地诊断本病提供重要线索.方法 回顾性分析1988～2008年国内有关肺泡蛋白沉积症的文献资料,总结126例肺泡蛋白沉积症误诊患者的临床资料.结果 126患者误诊为肺炎19例,肺癌24例,支气管肺炎18例,特发性肺间质纤维化(IPF)19例,肺结核15例,嗜酸性肺炎10例,结节病9例,真菌肺炎7例,上呼吸道感染5例.肺泡蛋白沉积症患者的临床表现缺乏特异性,而影像学表现又呈多样性,临床易误诊,确诊有赖于肺泡灌洗液、肺活检以及病理学检查.结论 肺泡蛋白沉积症临床表现缺乏特异性,极易导致误诊;全肺灌洗是肺泡蛋白沉积症最安全和有效的治疗方法.     

维生素C对AS2O3抑制肺癌A549细胞增殖、诱导细胞凋亡作用的影响及机制

目的探讨维生素C对三氧化二砷（AS2O3）抗癌作用的影响及其可能机制。方法将体外培养的肺腺癌A549细胞随机分为6组,其中对照组不行特殊处理,AS2O3 1—3组分别加入0．4、4．0、40μg/ml的AS2O3,维生素C组加入400μg／ml的维生素C,联合组加入400μg／ml维生素C＋0．4μg／ml AS2O3。采用缩胆囊素八肽（CCK-8）法及克隆形成实验检测细胞生长情况（A值）,用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,用RT-PCR方法检测Caspase-3 mRNA、多药耐药相关蛋白基因1（MRP1）mRNA、多药耐药基因1（MDR1）mRNA表达情况（维生素C组）。结果联合组及AS2O3 2、3组A值均显著低于对照组及AS：O3组、维生素C组,且随作用时间延长逐渐降低（P〈0．05）;联合组细胞集落显著少于其他五组,G0／G1期所占比例及凋亡率均显著高于其他五组（P〈0．05）;维生素C组Caspase-3 mRNA、MDR1 mRNA表达升高（P〈0．05）、MRP1 mRNA表达无明显变化（P〉0．05）。结论维生素C对As2O3抗肺腺癌A549细胞的作用具有协同性,可能机制为上调Caspase-3表达;两者联用可望成为低毒高效的化疗组合。     

经支气管镜肺活检与外科肺活检对老年Ⅰ～ⅢA期肺癌诊断价值的比较

目的评价经支气管镜肺活检（TBLB）与外科肺活检（SLB）对老年Ⅰ~ⅢA期肺癌（OSLC）患者的诊断价值。方法收集本院因胸部CT疑似OSLC进行活检的126例患者,分为TBLB组和SLB组,观察两组患者穿刺活检的阳性率、病灶组织获取成功率及并发症等。结果 126例患者中确诊恶性病变82例,其中TBLB组确诊39例（61.9%）、SLB组确诊43例（68.3%）,TBLB和SLB对OSLC患者的诊断阳性率无统计学差异。SLB组术后并发症发生、获取病变组织标本的成功率及住院费用均高于TBLB组,住院时间长于TBLB组（P均〈0.05）。结论 TBLB是诊断OSLC患者的首选确诊手段,SLB可以作为OSLC最后的诊断步骤。     

PPAR-γ抗肿瘤机制的研究新进展

过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARs）是一类由配体激活的核转录因子,其中PPAR-γ亚型抑制肿瘤的作用是近年来研究的热点,明确其抗肿瘤的机制可为肿瘤临床治疗提供新的途径和新的靶点。本文将对PPAR-γ抗肿瘤机制的研究进展进行综述。1 PPAR-γ概述PPARs是一类由配体激活的核转录因子,是核激素受体超家族的成员之一,1990年由英国科学家Isseman和Green首次发现。根据结构不同,PPAR可分为α、β（或δ）和γ3种亚型,其中PPAR-γ亚型是研究最多的一种。     

三氧化二砷联合维生素C抑制耐药性肺腺癌 裸鼠移植瘤生长机制的研究

目的:探索三氧化二砷(As2O3)联合维生素C(Vit C)对人耐药性肺腺癌裸鼠移植瘤抑制作用及其可能机制。方法:建立裸鼠人耐药性肺腺癌移植瘤模型,随机分为空白对照组,维生素C组(Vit C,250 mg.kg-1),As2O31组(1.5 mg.kg-1),As2 O3 2组(As2 O3 3 mg.kg-1),As2 O3联合Vit C组(As2 O3,1.5 mg.kg-1+VitC 250 mg.kg-1),ip 2周,观察并记录各组裸鼠移植瘤的生长情况及肿瘤体积和裸鼠体重的变化,计算肿瘤生长抑制率,用药2周后,取瘤组织进行病理学检查。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测移植瘤内生存素(Survivin)与血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。结果:Vit C组,As2O3 1,2组,As2O3联合Vit C组的抑瘤率分别为:3.42%,42.3%,66.25%,79.93%。与对照组相比,As2 O3各组和As2 O3+Vit C组治疗后肿瘤体积减少,瘤质量减轻,差异均有显著性(P<0.O1);与As2 O3单独用药组比较,As2 O3+Vit C联合用药组肿瘤体积,瘤质量明显减少(P<0.O1),抑瘤率明显增高;而Vit C组治疗后肿瘤体积及瘤质量没有明显减少。病理检查显示各As2O3组、As2O3+Vit C组治疗后可见肿瘤坏死增多。RT-PCR及Western,blot结果显示:联合组与As2O3组、Vit C组比较Survivin、VEGF条带强度显著减小。结论:As2O3与Vit C联合用药比As2O3单独应用抑制耐药性肺癌移植瘤生长的作用更强,二者具有协同抗肿瘤作用,其作用机制可能与下调Survivin及VEGF的表达有关。两者联用有望成为低毒高效的化疗组合。