S-腺苷甲硫氨酸通过hepaCAM抑制膀胱癌细胞增殖迁移

目的：探究S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosylmethionine,SAM）通过hepaCAM对膀胱癌（bladder cancer,BCa）细胞增殖和迁移的影响及其可能的分子机制。方法：不同浓度SAM作用于体外培养的T24和BIU细胞,四甲基偶氮唑盐（3-（4,5-dimethylth－iazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT）法检测SAM对细胞增殖的影响。用不同浓度的SAM（0、0.8、1.6 mmol/L）处理T24和BIU细胞72 h后,Real-time PCR和Western blot法检测甲基结合蛋白-2（methyl DNA-binding domain protein,MBD2）、组蛋白去乙酰化酶-1（histone deacetylases,HDAC1）以及肝细胞黏附分子（hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM）的表达;划痕及Transwell实验检测各组细胞的迁移能力;克隆形成实验检测各组细胞的克隆形成能力。结果：SAM抑制T24和BIU细胞生长且与药物浓度和作用时间呈正相关。与0 mmol/L组相比,0.8 mmol/L的SAM处理T24和BIU细胞72 h后MBD2 mRNA表达明显降低（P=0.048;P=0.038）,蛋白表达明显降低（P=0.001;P=0.000）;0.8 mmol/L的SAM处理T24细胞72 h后HDAC1 mRNA和蛋白水平明显降低（P=0.000;P=0.001）;0.8 mmol/L的SAM处理BIU细胞72 h后HDAC1 mRNA水平无统计学差异（P=0.140）,蛋白表达明显降低（P=0.004）;0.8 mmol/L的SAM处理T24和BIU细胞72 h后hepaCAM mRNA水平明显增加（P=0.003;P=0.008）,蛋白表达无统计学差异（P=0.770;P=0.381）;1.6 mmol/L的SAM处理T24和BIU细胞72 h后MBD2 mRNA水平明显降低（P=0.003;P=0.000）,蛋白表达明显降低（P=0.001;P=0.000）;HDAC1 mRNA水平明显降低（均P=0.000）,蛋白表达明显降低（P=0.001;P=0.000）;hepaCAM mRNA和蛋白表达均明显增加（均P=0.000）。划痕及Transwell实验结果显示SAM处理T24和BIU细胞72 h后迁移能力受到明显抑制（P<0.05）。克隆形成实验结果显示SAM处理T24和BIU细胞72 h后细胞克隆形成能力明显降低（P<0.05）。结论：SAM可通过MBD2/HDAC1逆转hepaCAM的表达,抑制BCa细胞的增殖及迁移能力。