电刺激对海马表达Nogo-A蛋白的影响

目的 探讨慢性电刺激对大鼠海马表达Nogo=A蛋白表达的影响，以了解海马Nogo-A蛋白升高与癫痫发生的因果关系。方法 70只大鼠随机分为5组，即4个电刺激组，1个假电刺激组，分别电刺激1，3，6，9d，对海马进行免疫组织化学染色和蛋白印迹实验，检测海马表达Nogo-A蛋白的情况。结果 假电刺激组14只大鼠行为均无异常；电刺激1d与3d组大鼠亦未发生抽搐；电刺激6d组有3只发生抽搐，电刺激9d组在刺激6d时，有1只发生抽搐，刺激9d时有13只发生抽搐。同时，免疫组织化学实验发现，在电刺激3，6，9d后，海马Nogo-A蛋白表达量与假电刺激组相比均有显著升高（P〈0．05或P〈0．01），其升高趋势呈电刺激时间的依赖性（r=0．775），蛋白印迹实验结果基本相同。结论 海马Nogo-A蛋白表达的量与电刺激的时间呈正相关，而在发生癫痫之前大鼠海马Nogo-A蛋白表达已经升高。     

Nogo-A与NgR研究的新进展

Nogo-A的活性部位可能有两个,位于两个疏水区域之间的Nogo-66和氨基末端到第一个疏水结构域这部分肽链,即amino-Nogo;NgR属糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白,具有多个富亮氨酸的重复结构。Nogn-A主要表达于中枢神经系统,位于在投射神经元和形成髓鞘的少突胶质细胞中,在胞膜,胞质和胞核中都存在。许多研究表明,Nogo-A和NgR在轴突生长的过程中就有表达;细胞核上免疫金标记的Nogo-A主要存在于染色体的核小体上,表明它可能与基因转录有关;Nogo-A的表达与一些髓鞘形成有关的因子如α-微管蛋白 髓鞘基础蛋白(MBP)的表达有密切联系,这也暗示Nogo-A可能与髓鞘形成有关。通过进一步研究阐明它的功能是有必要的。     

流式细胞术分选在细胞膜表达Nogo-A的少突胶质细胞

目的：探讨成熟少突胶质细胞在细胞膜上是否有Nogo-A的表达及其比例，并收集该类活细胞。方法：不使用破膜剂，间接荧光标记细胞膜表达Nogo-A的成熟少突胶质细胞，采用流式细胞术分选被染色的阳性细胞。结果：经流式细胞术获得了细胞膜表达Nogo-A的成熟少突胶质细胞，比例为3．36％。结论：使用流式细胞技术，发现部分成熟少突胶质细胞在细胞膜表面有Nogo-A表达，其比例为3．36％。     

脑挫裂伤水肿转归时间的探讨

目的总结脑挫裂伤后脑水肿发展与消退的时间,为临床治疗提供依据。方法我院4年来收治的脑挫裂伤的患者174例,至少每3d复查一次CT,根据CT影像表现作为观察脑水肿的指标,记录脑水肿随时间演变的过程。结果所有病例脑水肿在3d内达到高峰,但水肿高峰持续时间存在差异,病程中脑水肿的高峰持续时间3～5d7例,6～8d34例,9～11d112例,12d以上21例。脑水肿高峰持续时间与脑水肿严重程度和挫裂伤的严重程度有显著关系。结论大部分脑挫裂伤脑水肿高峰时间比过去我们认识的要长,故使用控制脑水肿药物的时间应适当延长,特别是严重颅脑损伤患者,并应根据不同情况选择脱水剂。     

脊膜膨出患者人工反射弧手术前的神经电生理评估

目的探讨神经传导检查对脊膜膨出合并尿失禁患者人工反射弧手术前评估的应用价值。方法总结自2001年以来94例脊膜膨出拟接受人工反射弧手术的患者术前胫神经、腓浅神经和腓总神经传导检查的结果,结合部分患者术后尿动力学检查了解手术效果。结果94例患者中,双侧传导速度和波幅均正常[(54.5+7.4)m/s,(9.3+3.4)mV]的75例;单侧胫神经传导速度[(35.1+5.6)m/s]降低有10例,波幅降低(4.5+2.1)mV7例,单侧腓总神经传导速度[(28.4+11.8)m/s]降低11例,波幅降低(4.7+2.9)mV8例。11例单侧神经传导速度降低患者选择在传导功能更好的一侧手术;8例病人因双侧神经传导速度减退,并且波幅明显下降,而未接受手术。结论术前神经传导功能检查对了解新反射弧传入神经腰5脊神经前根传导功能及选择吻合的神经具有重要的价值。     

RNA干扰抑制Nogo-A基因表达及对PC12细胞凋亡的影响

为研究Nogo-A基因沉默对细胞凋亡的影响,本文构建了靶向Nogo-A的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体并经脂质体转染到培养的PC12细胞。分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测转染48h后Nogo-A mRNA及蛋白表达的变化。在转染后不同时间应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性,用原位末端标记(TUNEL)法及流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果显示:由shRNA产生的小干扰RNA(siRNA)可有效抑制PC12细胞Nogo-A基因的表达。Nogo-A siRNA处理组细胞的增殖活性增加、凋亡率明显下降。本结果提示,Nogo-A基因可能与细胞凋亡有关。     

RNA干扰抑制Nogo-A基因表达对PC12细胞多巴胺释放的影响

目的 研究Nogo-A基因沉默对PC12细胞多巴胺释放的影响.方法 构建靶向Nogo-A的短发夹样RNA(shRNA)真核表达载体,并经脂质体转染PC12细胞,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测对Nogo-A mRNA及蛋白的抑制效应.采用高效液相色谱仪(HPLC)检测转染前后多巴胺释放的变化.结果 将重组质粒转染到PC12细胞48h后,Nogo-A基因表达明显受抑、多巴胺释放量减少.结论 Nogo-A可能参与PC12细胞多巴胺的释放.     

Nogo-66受体在脂质筏中的定位

目的 探讨Nogo-66受体（NgR）存神经元胞膜脂质筏中的定位。方法 利用免疫荧光双标法检测NgR和脂质筏特异标志物穴蛋白（Cavcolin）在培养的小脑颗粒神经元上的表达．并用Wcstcrn blot法检测以去垢剂法提取的脂质筏中NgR的表达。结果 免疫荧光双标显示NgR和Cavcolin的表达部化．Western blot分析发现脂质筏中NgR的表达为阳性。结论 在小脑颗粒神经元胞膜脂质筏中有NgR的表达．提示脂质筏有可能促进NgR的信号转导。     

慢性结核性脑膜炎所致脑积水治疗的探讨

目的 探讨采用抗结核治疗处理慢性结核性脑膜炎所致脑积水的可行性.方法 总结39例合并脑积水的慢性结核性脑膜炎的临床资料和转归情况.结果 经抗结核治疗后,颅内高压症状消失,治疗前后CT片对比显示脑室大小无明显变化.结论 对于慢性结核性脑膜炎导致的交通性脑积水,可经过积极的抗结核治疗,不必行分流手术.     

Nogo-A在大鼠胃肠神经丛中的表达

目的：探讨Nogo-A蛋白在成年大鼠胃肠神经丛中的表达。方法：利用免疫组织化学法,观察Nogo-A蛋白在大鼠胃肠神经丛中的表达,并用RT—PCR检测Nogo-AmRNA在胃肠组织中的表达情况。结果：在成年大鼠胃肠神经丛,包括黏膜下神经丛、肌间神经丛、浆膜下神经丛内的神经元出现Nogo-A免疫反应阳性,胞质和胞核都可见棕褐色颗粒;胃肠组织的RT—PCR结果显示Nogo-AmRNA为阳性。结论：Nogo-A可广泛表达于各器官系统的神经元中,提示Nogo-A的功能可能与神经元的某个共同的生理活动有关。