电离辐射对小鼠骨髓造血干/祖细胞中CD47表达的影响

探讨X射线全身照射后小鼠骨髓造血干/祖细胞（HSCs/HPCs）损伤和其中CD47表达水平的变化，初步阐明CD47在HSCs/HPCs电离辐射损伤中发挥的作用。     

维生素B12治疗放射性皮肤损伤临床和动物实验治疗观察

本文报道了维生素B₁₂治疗放射性皮肤粘膜损伤40例(急性39例,慢性l例)的溢束悦察和83例动物(豚鼠)放射性皮肤损伤模型的复制及治疗观察。从病理、生化和临床效果等方面,证实了维生素B₁₂不仅对急性放射性皮肤损伤具有确切的疗效,对一般烫伤也有较好的疗效。     

纳米药物在肿瘤免疫治疗与移植免疫耐受中的研究进展

正随着近年来科技的发展,纳米技术已经广泛应用于医学、药学和生物学等领域,特别是纳米药物在多种疾病的诊断和治疗中发挥了重要作用。纳米药物是指以纳米颗粒作为药物载体,其直径大小在10~1 000 nm范围内,多由天然或合成高分子材料制成。纳米药物通过将药物分子包裹在其中或吸附在表面实现高效地携载包括小分子药物、多肽、蛋白     

MDSC在自身免疫疾病中的作用

髓系抑制细胞（Myeloid derived suppressor cells,MDSC）是具有抑制功能的髓系来源的细胞群。在自身免疫疾病中,MDSC显著增多,并在体外有抑制功能,然而在体内研究中,MDSC的研究存在争议。最新研究发现具有抑制功能的MDSC的显著增多并不能有效缓解自身免疫疾病,而且在某些情况下甚至促进疾病的进展。因此,MDSC在自身免疫疾病的作用有待进一步研究。本文根据已有文献,综述了MDSC在不同的自身免疫疾病中的改变及机制。     

靶向CTGF锤头核酶对人肝星状细胞Ⅰ型胶原及细胞周期的影响

目的：探讨靶向人结缔组织生长因子（CTGF）锤头核酶对人肝星状细胞系（LX-2）细胞Ⅰ型胶原转录和分泌及细胞增殖的抑制作用,为肝纤维化基因治疗提供实验依据。方法：构建含有CTGF锤头核酶及其5′和3′端分别连接一自剪酶cDNA序列的重组质粒pTriCTGF-Rz。实验分5组：未转染组、空质粒pTriEx2转染组、空质粒转染加TGF-1组、pTriCTGF-Rz转染组和pTriCTGF-Rz转染加TGF-1组。半定量RT-PCR检测CTGF mRNA和Ⅰ型胶原 mRNA水平,ELISA检测LX-2细胞分泌Ⅰ型胶原的水平,流式细胞仪检测LX-2细胞周期。结果：与pTriEx2转染组比较,pTriCTGF-Rz组LX-2细胞CTGF mRNA水平和TGF-1诱导CTGF mRNA的水平降低（P<0.05）,pTriCTGF-Rz组LX-2细胞Ⅰ型胶原mRNA转录和蛋白分泌减少,TGF- 1诱导I型胶原的转录水平降低（P<0.05）。 与空质粒pTriEx2转染组比较,pTriCTGF-Rz转染组LX-2细胞 G₀-G₁期细胞数增多(P<0.05),S期细胞减少(P<0.01)。 结论:靶向CTGF的锤头核酶具有抑制人肝星状细胞介导肝纤维化的作用,可能成为肝纤维化基因治疗的新途径。     

人抑癌基因p53与PTEN的CRISPR-Cas9导向RNA靶点筛选与效率验证

目的：探讨应用新兴基因编辑技术规律性成簇的间隔短回文重复序列-核酸酶系统（CRISPR-Cas9）对人体内2个抑癌基因p53与PTEN进行编辑的可行性,并通过体外检测研究其编辑效果,为原代细胞向肿瘤细胞转化及建立人源化小鼠肿瘤模型提供实验研究工具。方法：序列分析确定p53及PTEN基因各亚型mRNA剪辑的共同外显子区域,针对该区域进行软件评分,设计选择针对p53及PTEN基因的CRISPR-Cas9导向RNA （sgRNA）靶点各2个,即p53-1、p53-2、PTEN-1和PTEN-2。构建共表达sgRNA与Cas9-P2A-GFP的CRISPR-Cas9质粒。选择处于对数生长期的293T细胞,将其分为对照组（未转染质粒的野生型293T细胞）和实验组（利用Lipofectamine2000转染sgRNA-Cas9-P2A-GFP共表达质粒的293T细胞）,流式细胞术分选实验组绿色荧光蛋白（GFP）阳性细胞（成功转染质粒的细胞）,2周扩增培养后提取基因组DNA,PCR扩增基因组DNA包含突变位点的区段,将扩增产物凝胶电泳后胶回收,连接至pEASY-Blunt Zero克隆载体中,转化,挑取单克隆菌斑培养,提取质粒DNA测序,对比对照组与实验组测序结果后确定RNA介导的特异基因位点突变效率。结果：转染sgRNA-Cas9-P2A-GFP质粒的实验组流式细胞术分选后GFP阳性率高达82%,与分选前（4%）比较明显升高（P<0.05）。对分选培养后的细胞提取基因组PCR,其中包含p53突变位点的扩增片段长度均为612 bp,而包含PTEN-1突变位点的扩增片段长度为667 bp,包含PTEN-2突变位点的扩增片段长度为947 bp。对比实验组基因测序结果与未经sgRNA-Cas9-P2A-GFP质粒转染的对照组野生型细胞测序结果,p53-1、p53-2和PTEN-2诱导的突变效率分别为54.5%、45.5%和33.3%。结论：针对人p53及PTEN基因设计的sgRNA p53-1、p53-2和PTEN-2能够在基因组水平较高效率地成功介导Cas9进行位点特异性的基因编辑。     

携带hTERT-P2A-EGFP基因真核表达质粒的构建和鉴定

目的：构建真核表达质粒hTERT-P2A-EGFP,探讨其在HEK293FT细胞中的表达和转染效率。方法：利用pBABE-puro-hTERT和pRRLSIN-cPPT-MSCV-EGFP质粒构建重组质粒。以该质粒为模板采用PCR法获取hTERT、P2A和EGFP基因,采用重叠PCR法获得目的片段hTERT-P2A-EGFP,经酶切后目的片段与真核表达载体pRRLSIN-cPPT-MSCV-EGFP连接,得到并鉴定含有hTERT-P2A-EGFP基因的重组质粒。经脂质体介导重组质粒转染到HEK293FT细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白（GFP）在细胞中的表达。结果：PCR检测目的基因hTERT、P2A和EGFP的片段长度分别为3400、110和720 bp。酶切后目的基因片段hTERT-P2A-EGFP约4300 bp。测序分析,目的基因1547位点发生了突变。利用定点突变技术成功诱变,再次测序后目的基因序列与 GenBank 公布的基因序列完全一致。重组质粒转染HEK293FT细胞后在荧光显微镜下可以观察到GFP。流式细胞术检测,重组质粒转染HEK293FT细胞的效率为44.8%。结论：成功构建携带目的基因hTERT-P2A-EGFP的重组质粒,且可用于细胞转染。     

纳米药物递送系统在肿瘤免疫治疗中的研究进展北大核心CSCD

目的:肿瘤免疫疗法通过激发和增强机体的免疫应答来发挥抗肿瘤作用,成为继外科手术、化疗、放疗之后又一类具有显著临床治疗效果及优势的抗肿瘤疗法。多种类型的免疫治疗药物相继涌现,但药物的体内递送仍面临诸多挑战,如较差的肿瘤渗透性和较低的肿瘤细胞摄取率等。随着近年来纳米科技的发展,纳米技术已经广泛应用于医学、药学和生物学等领域。纳米药物递送系统能够提高免疫治疗药物在肿瘤部位的滞留、蓄积、渗透及靶细胞摄取,并实现其在肿瘤胞外基质或肿瘤细胞内的可控释放,提高调控抗肿瘤免疫反应的效率,增强肿瘤免疫治疗效果。本文总结并阐述了近年来纳米药物递送系统在肿瘤免疫治疗研究领域取得的成果,也对该领域的主要挑战和发展方向进行了展望。     

靶向肿瘤相关巨噬细胞的肿瘤治疗研究进展

肿瘤相关巨噬细胞(TAM)是肿瘤微环境的重要组成成分,是一个具有高度可塑性的异质性群体。TAM在肿瘤的发生、发展中起重要作用,是极具吸引力的肿瘤免疫治疗靶标。靶向TAM的肿瘤免疫治疗是近年肿瘤研究的热点之一。目前在针对TAM的肿瘤免疫治疗策略方面,包括清除TAM和抑制TAM的促肿瘤功能等,已取得显著进展。本文将对这些研究加以综述。