人端粒酶逆转录酶基因启动子介导重组Caspase-3治疗人肺腺癌的研究

目的 探讨使重组Caspase-3分子选择性诱导人肺腺癌细胞凋亡从而杀伤肿瘤细胞的可行性.方法 构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因启动子调控下的重组Caspase-3分子,通过报告基因分析、Caspase-3酶活性分析、流式细胞分析、MTT方法和动物实验来研究其在肿瘤细胞中选择性诱导凋亡的作用.结果 通过Caspase-3酶活性分析,发现phTERT-Rev-Caspas-3在人肺腺癌细胞A549中能够诱导Caspase-3的活性表达,流式细胞分析和MTT方法提示其具有明显的诱导A549细胞凋亡、抑制增殖的作用;动物实验显示其能够有效地抑制肺癌裸鼠移植瘤的生长.结论 phTERT-Rev-Caspase-3是一种有效的选择性诱导人肺腺癌细胞凋亡的分子.     

荧光定量聚合酶链反应检测弓形虫DNA及其临床应用

我们设计合成了弓形虫 (ＴＯＸ)荧光定量ＰＣＲ (ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ ,ＦＱ ＰＣＲ)诊断试剂盒 ,以一种完全闭管式的ＰＣＲ和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量ＰＣＲ方法 ,检测了 2 2 5例产妇的血清标本和 179例新生儿脐血标本的ＴＯＸ ＤＮＡ的含量 ,同时与免疫指标进行比较 ,探讨其在弓形虫临床诊断中的应用价值。2 2 5例产妇ＴＯＸ ＩｇＧ阳性 2 9例 ,阳作者单位 :570 31 1海口 ,海南省人民医院医学研究中心 (符生苗 ,阮和球 ,陈鑫萍 ,庞海云 ,凌奕 ) ;中山医科大学达安基因诊断中心(徐…     

EB病毒LMP1通过NF-kB介导的HSV-tk/GCV治疗EBV相关肿瘤的研究

目的:研究EB病毒潜伏膜蛋白1(EBV-LMP1)通过活化NF-kB反式激活HIV-LTR进而启动自杀基困HSV-tk在EBV相关肿瘤治疗中的作用,为进一步开展肿瘤治疗提供科学的实验依据。方法:以鼻咽癌细胞为实验模型,将HSV-tk基因置于HIV-LTR调控序列之下,构建LMP1调控且依赖于NF-kB的HSV-tk/GCV系统,采用同位素方法检测tk活性来研究LMP1通过NF-kB调控HSV-tk转录的靶向性和表达特征,MTT方法检测在GCV处理下肿瘤细胞的生长状况。结果:成功构建受LMP1调控且依赖于NF-kB的HSV-tk表达质粒,发现其在GCV处理下,表达LMP1的肿瘤细胞的生长有显著的抑制。结论;携带有LMP1-HSV-tk的细胞对GCV治疗高度敏感,显示这一肿瘤治疗系统在EBV相关肿瘤中具有一定的应用前景。     

荧光定量聚合酶链反应诊断弓形虫感染的实验研究

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）对孕妇与新生儿弓形虫（TOX）感染的诊断价值。方法以完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量PCR方法,检测了产妇的血清标本和新生儿脐血标本,同时与常规 PCR法和酶联免疫吸附法（ELISA）比较。结果 225例产妇中,FQ-PCR阳性28例,平均拷贝数值（ml-1）为 1.68×105,阳性率为12.44％,常规PCR阳性率为12.89％,TOX-IgG阳性29例,阳性率为 12.89％,IgM阳性33例,阳性率为14.67％。179例新生儿中,FQ-PCR阳性7例,平均拷贝数值（ml-1）为2.29×105,阳性率为3.91％,常规PCR阳性率为5.03％,TOX-IgG阳性11例,阳性率为6.15％,IgM阳性3例,阳性率为1.68％。结论FQ-PCR特异性比ELISA法高,可以检测TOX的真实感染和复制情况,对TOX的临床诊断、治疗方案的选择和疗效观察有较大的应用价值。     

EB病毒LMP1通过NF-κB介导的HSV-tk/GCV治疗EBV相关肿瘤的研究

目的：研究EB病毒潜伏膜蛋白I(EBV-LMPl)通过活化NF-κB反式激活HIV-LTR进而启动自杀基因HSV-tk在EBV相关肿瘤治疗中的作用，为进一步开展肿瘤治疗提供科学的实验依据。方法：以鼻咽癌细胞为实验模型，将HSV-tk基因置于HIV-LTR调控序列之下，构建LMPl调控且依赖于NF-κB的HSV-tk/GCV系统，采用同位素方法检测tk活性来研究LMPl通过NF-κB调控HSV-tk转录的靶向性和表达特征，MTT方法检测在GCV处理下肿瘤细胞的生长状况。结果：成功构建受LMPl调控且依赖于NF-κB的HSV-tk表达质粒，发现其在GCV处理下，表达LMPl的肿瘤细胞的生长有显著的抑制。结论：携带有LMPl-HSV-tk细胞对GCV治疗高度敏感，显示这一肿瘤治疗系统在EBV相关肿瘤中具有一定的应用前景。     

血管形成拟态在肿瘤中的研究进展

血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)是指肿瘤中的脉管系统不依赖血管形成,肿瘤细胞具有形成供血 管状网络的能力,从而为肿瘤的生长提供丰富的血供模式。VM的形成包括多种分子机制和信号通路,在其形成过程 中还发现肿瘤干细胞和上皮-间充质转变。作为一种独特的血供方式,VM与肿瘤细胞的浸润、转移和晚期癌症患者 预后密切相关,靶向VM的抗癌疗法将会成为一种新的肿瘤治疗策略。     

Caspase与肿瘤治疗

对肿瘤发生发展的分子机制研究的最新进展表明 ,细胞凋亡障碍在肿瘤发病学上有重要的意义。在细胞凋亡的过程中Caspase家族起着关键性的作用。已经发现一系列新的与Caspase有关的诱导凋亡的方法来治疗肿瘤 ,对大部分肿瘤的治疗有实际的意义 ,并可望在恶性肿瘤的治疗上取得新的突破     

中国东北地区HTLV-1的前病毒DNA测定及其意义

目的 了解我国东北的HTLV-1的流行情况及病毒特征。方法 从2002年起在东北地区共采取了941份标本。用免疫荧光法进行了血清抗体的检测，经PCR扩增及Southern杂交鉴定。结果 发现3例HTLV-1阳性感染病人，阳性率0．3％，没有发现HTLV-2阳性感染病人；在37例淋巴细胞白血病患者中检出2例，检出率5．4％。并对其中1例阳性感染病人的外周血单个核细胞（PBMCs）中的前病毒DNA的env基因的gp21、gp46两个碱基对核甘酸序列进行了PCR扩增，并将其克隆到T—Vector上进行DNA的核甘酸序列测定，与日本原型（ATK）病毒DNA链的相应区域的线性比较显示了很高的同源性（98．9％-100．％），没有发现碱基的插入、删除和其他显著性的变化。结论东北地区为HTLV-1的非流行区，于淋巴细胞白血病病人检出率（5．4％）较高，说明东北地区的淋巴细胞白血病与HTLV-1感染有一定的关系。