羧甲基壳聚糖对兔骨关节炎软骨一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨关节腔注射羧甲基壳聚糖(CMCTS)对骨关节炎(OA)软骨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法大耳白兔32只,每只兔单侧膝关节行前交叉韧带切断术,术后5周将兔随机分为4组,每组8只,A组：关节腔注射2%高相对分子质量的CMCTS 0．3ml,每2周重复1次；B组：同等条件下注射2%低相对分子质量的CMCTS 0．3ml；C组：关节腔注射1%透明质酸钠(Na-HA)0．3ml,每周重复1次；D组：关节腔不注射任何药物。术后11周处死动物。采用免疫组织化学、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测软骨iNOS的表达。结果免疫组织化学及RT-PCR显示CMCTS注射组软骨iNOS的表达水平显著低于Na-HA注射组和不用药组,不同相对分子质量CMCTS注射组之间、Na-HA注射组和不用药组之间比较,iNOS的表达差异无统计学意义。结论CMCTS能够明显抑制OA软骨i NOS的表达,Na-HA对OA软骨iNOS的表达没有显著下调作用。     

羧甲基壳聚糖抑制白细胞介素-1β诱导的软骨细胞凋亡及作用机制的研究

目的评价羧甲基壳聚糖对重组人白细胞介素(rhIL)-1β刺激下软骨细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养兔软骨细胞,加入不同浓度羧甲基壳聚糖预处理1h后,加入rhIL-1β共培养24h,通过Annexin V-FITC和PI双标及Hoechst 33342荧光染色检测软骨细胞凋亡；以罗丹明-123荧光染色检测线粒体膜电位和荧光素酶反应检测线粒体合成ATP能力来评价线粒体功能。结果羧甲基壳聚糖能明显抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,呈剂量依赖性；羧甲基壳聚糖可恢复IL-1β对软骨细胞线粒体功能的损害。结论羧甲基壳聚糖通过保护线粒体功能抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡。     

生漆多糖对小鼠溶血素影响的初步观察

生漆(Laquer)是漆树中分泌出的一种油中水球状灰白色乳浊液,我国的产量占世界的1/3。有关生漆多糖对机体的生物活性至今未见报道。本文通过实验观察了生漆多糖对小鼠溶血素产生的影响。材料和方法实验用样品为中国毛坝大木生漆多糖[CPS-M(b)]、中国毛坝小木生漆多糖[CPS-M(s)]、中国建始生漆多糖(CPS-T)、越南生漆多糖(VPS)、泰国生漆多糖(TPS)。由武汉大学资源应用研究所提供生漆多糖精品。实验动物是昆明种小鼠,体重16～22g,由湖北医学院动物房提供。血清溶血索测定按徐学瑛方法测定。将140只小鼠分为7组,每组20只雌雄各半。其中5个组按50rag/kg(0.2ml/只),对照组为生理盐水0.2ml/只皮下注射,每天1次连续8天,在实验第4天腹腔注射20％绵羊红血球1次(0.2ml/只)。阳性对照组为环磷酰胺。取血。计算各组的半数溶血值(HC_(50))。     

pH-敏感甲硝唑壳聚糖-聚乙烯吡咯烷酮水凝胶的研究

 目的 制备pH-敏感的壳聚糖-聚乙烯吡咯烷酮（PVP）水凝胶，作为甲硝唑治疗胃溃疡控释给药系统的载体。方法 用戊二醛交联适宜比例混合的壳聚糖、PVP混合物，负载甲硝唑或不负载甲硝唑，制备载药水凝胶及空白水凝胶，再冷冻干燥形成半渗透聚合网状物Semi-IPN。用扫描电镜观察性状结构，用测角仪测定其辛烷接触角，用电子天平测其在不同pH介质中的膨胀率，用红外测定了其特征峰，同时考察了载药水凝胶体外释药特性，初步药理实验判断其对实验性胃溃疡的疗效。结果 水凝胶具多孔性，且可很好地负载甲硝唑。辛烷接触角为(143.8±1.02)°，显示本品有较大的亲水性。膨胀率随pH的降低而增大，红外图谱说明水凝胶在酸性介质中膨胀时有-NH₂质子化。甲硝唑在酸性介质中的释放也随pH降低而增大，在pH 1.0介质中，3 h达最大释放量87%。初步药理实验表明，与对照组及甲硝唑片治疗组相比，该甲硝唑水凝胶对胃溃疡具有较优的治疗作用（P分别<0.01及P<0.05）。结论 甲硝唑水凝胶具有pH-敏感膨胀性，可改善甲硝唑对实验性胃溃疡的治疗作用，可作为治疗胃溃疡的新型胃部控释系统研究开发。     

冶炼厂烟尘PM_(2.5)复合污染探讨

目的　通过本研究确定 ,现有除尘设备是否还存在PM2 5复合污染。方法　通过化学、电子显微镜及电子能谱、GC MS等仪器对上述样品多种污染成分及粒径进行定性、定量测定。结果　上述复合污染成分 :水 2 2 % ,有机物 34 75 % ,无机物 4 3 75 %。无机物以Cu、C、Pb、Al为主 ,它们的粒径≤ 1 1μm ,有机污染物14 0多种 ,以酚类及PAHs为主 ,无机物中除铅、砷等重金属 ,还有砷酸、磷酸。结论　在现有除尘设备条件下的冶炼厂烟尘污染为多种重金属、酸性氧化物及几十种有机污染物 (酚类及PAHs)的复合污染 ,它们的粒径分布大多≤ 1 1μm。     

羧甲基壳聚糖的骨髓细胞染色体畸变试验

羧甲基壳聚糖(CMC)是甲壳糖的水溶性衍生物,是一种新兴的海洋类药物,其来源广泛,价格低廉,有可能替代价格昂贵的透明质酸(HA)关节腔注射治疗骨关节炎(Osteoarthritis,OA).     

海藻酸盐/壳聚糖衍生物复合抗菌纤维

通过溶液纺丝法制备海藻酸盐/羧甲基壳聚糖（CMC）共混纤维,并用红外光谱,X射线衍射和扫描电镜对共混纤维进行了表征.结果表明：共混体系中的两种组分之间存在着较强的相互作用,有良好的相容性.当ωCMC=0.30时,共混纤维的干态抗张强度达到最大值,13.8cN/tex.当ωCMC=0.10时,纤维的干态断裂伸长率可达23.1%.纤维的湿态抗张强度和断裂伸长率随着CMC含量的增加而降低.CMC的引入,可显著提高纤维的吸水率.用壳聚糖季铵盐对纤维进行处理,可赋予纤维抗菌性.     

壳聚糖膝关节腔内注射疗法对兔骨关节炎关节软骨的影响

目的观察关节内注射羧甲基壳聚糖(CMCTS)对兔骨关节炎(OA)关节软骨退变及软骨基质金属蛋白酶(MMP)-1,-3mRNA表达的影响。方法24只大耳白兔行单侧膝关节前交叉韧带切断术,术后5周将动物随机分为3组,A组关节内注射2%CMCTS0.3ml,每2周1次;B组关节内注射1%透明质酸钠(HA)0.3ml,每周1次;C组关节内不注射药物。术后11周处死动物,观察各组股骨内髁关节软骨的大体变化,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测股骨内髁退变软骨中MMP-1和MMP-3的mRNA表达。结果CMCTS和HA注射组软骨退变程度较不用药组明显减轻,CMCTS注射组软骨MMP-1、MMP-3的mRNA表达明显低于HA注射组和不用药组。HA注射组软骨MMP-1和MMP-3的mRNA表达与不用药组比较,差异没有显著性意义。结论CMCTS能够明显抑制OA软骨MMP-1和MMP-3的mRNA表达,明显减轻软骨退变的程度,CMCTS对早期OA软骨有修复保护作用。     

羧甲基壳聚糖抑制白细胞介素-1β诱导软骨细胞基质金属蛋白酶-1,3的表达

目的:探讨羧甲基壳聚糖抑制重组人白细胞介素-1β(rhIL-1β)刺激下的兔软骨细胞合成基质金属蛋白酶-1,3(MMP-1,3)的作用机制。方法:分离、培养兔软骨细胞,用rhIL-1β刺激,同时加入不同浓度的羧甲基壳聚糖(CM-chitosan)或L-精氨酸甲酯(L-NAME),培养24h后,检测上清液中的一氧化氮含量和软骨细胞内的诱导性一氧化氮合酶(iNOS)活力。提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链方法(RT-PCR)检测iNOS,MMP-1,MMP-3的mRNA表达。通过ELISA方法检测上清液中MMP-1,MMP-3的含量。结果:IL-1β能够增加软骨细胞一氧化氮的释放及iNOS的酶活性,诱导细胞iNOS,MMP-1,3的mRNA表达,增加MMP-1,3的分泌。羧甲基壳聚糖对软骨细胞一氧化氮的释放,iNOS酶活力及iNOSmRNA表达均有抑制作用,不同浓度的抑制效果相近;它对软骨细胞的MMP-1,3mRNA的表达及MMP-1,3的分泌也有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性。L-NAME对软骨细胞的MMP-1,3mRNA的表达及分泌也有抑制作用,但L-NAME与羧甲基壳聚糖对一氧化氮的影响相似时,羧甲基壳聚糖对MMP-1,3mRNA表达和分泌的抑制作用强于L-NAME。结论:羧甲基壳聚糖抑制软骨细胞合成MMP-1,MMP-3是部分通过降低iNOS表达,减少一氧化氮合成来实现的。     

壳聚糖纳米粒作为消化道给药基因治疗载体的研究

目的 观察壳聚糖纳米粒载体的体内外基因转染活性,寻找最佳转染条件.方法 以编码GFP的质粒DNA作报告基因,3种不同壳聚糖[季铵化壳聚糖(TMO-60%),壳聚糖(43×103～45×103,87%),壳聚糖(230×103,90%)]分别与质粒DNA混合,用复凝聚法制备壳聚糖/DNA复合物.检测纳米粒形态和直径,壳聚糖对DNA包裹力,体外转染效率,纳米粒包裹质粒饲喂裸鼠后报告基因在消化道黏膜的表达率.结果 壳聚糖纳米粒能高效稳定包裹质粒DNA;TMO-60%与DNA的比例为3.2∶ 1.0时,体外转染效率最高,达28.9%;TMO-60%/质粒DNA复合物灌胃后,全胃肠道均有GFP表达,尤其在胃和小肠上段最强.结论 季铵化壳聚糖纳米粒在体内、体外均有较高的转染活性,是基因治疗的可取载体.