临床实验室淋巴细胞亚群检测现状的调查与分析

目的 调查临床实验室淋巴细胞亚群的检测现状,结合全国室间质量评价数据进行分析,为质量改进提供依据.方法 以参加全国淋巴细胞亚群检测室间质量评价的200家为调查对象,通过问卷调查,收集相关检测信息,并将2011～2013年的全国室间质评数据与同期美国Wadsworth Center质评数据进行比较,分析检测现状.结果 调查问卷回报率为87.5％;三级医院的实验室占88.6％;使用光路流路校准品、PMT电压校准品和荧光补偿样品的实验室各占97.7％、88.6％和88.6％;实验室均采用包括CD3抗体在内的至少2种抗体进行T细胞亚群和NK细胞检测;26.3％的实验室曾使用全血质控物开展室内质控;38.5％的实验室使用CD45/SSC设门;30.3％的实验室报告绝对计数值,其中采用单平台方法的占62.3％.2011～2013年全国淋巴细胞亚群检测质评CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-(CD16+56)+和CD3-CD19+五类细胞的相对计数的变异系数分布范围为(3.0～9.8)％,绝对计数的变异系数分布范围为(15.8～30.4)％,而美国质评相对计数和绝对计数的变异系数分布范围分别为(2.0～10.0)％和(7.0～13.0)％.结论 参加淋巴细胞亚群检测质评的实验室主要来自各地的三级医院,其检测能力代表了我国淋巴细胞亚群检测的较高水平;流式细胞仪检测状态的质量监控已在开展,但样本检测过程的质量控制(如全血质控品应用、设门方案等)未有效开展;我国质评计划结果中相对计数的变异系数略高于美国,而绝对计数的变异系数差距更明显.应进一步制订相关标准并实施标准化.     

造血干细胞计数全血质控物的研制与评价

目的评价自制造血干细胞计数全血质控物的均匀性及稳定性。方法依据CNAS-GL03及ISO Guide 35的要求,对两个批号自制质控物的均匀性、稳定性进行评价,同时检测进口质控物作为对照。结果均匀性评价结果显示两批号自制质控物样品间差异均无统计学意义（P〉0.05）;稳定性评价结果显示20111101、2011111批号自制质控物随保存时间的延长均无线性趋势变化（P〉0.05）;各批号自制质控物及进口质控物长期稳定性的不确定度分别为0.023%、0.015%和0.012%。结论自制造血干细胞计数质控物的均匀性及稳定性良好。     

2004～2006年全国凝血试验室间质量评价数据分析

目的 分析全国凝血试验室间质量评价的结果，了解凝血试验室间质评的状况，提出改进措施。方法 定期向参加凝血试验室间质评的实验室发放质评物，参评实验室对质评物进行检测，并回报结果，按照不同检测水平和仪器试剂分组后，计算加权均值、变异系数和及格率，并对及格率进行统计分析。结果 2004～2006年各项目（包括PT、INR、APTT和Fbg）在正常水平内的及格率较高（89．O％～99．oN），在高度异常水平（除Fbg外）及格率较低（74．3％～84．0％）。各水平组不同年度间及格率经x^2检验差异均无显著性（P〉0.05）；每年每个项目3种水平（除Fbg外）的及格率经x^2检验，差异有显著性；仪器试剂分组后，各项目变异系数较大组的及格率较低。结论 异常水平样本的PT和APTT质评结果变异较大，非配套系统的PT、INR、APTT和Fbg的质评结果变异较大，建议选择配套系统，定期校准仪器，并开展异常水平的室内质控，使用非配套系统的实验室应与配套系统进行结果比对。     

血细胞分析国家一级标准物质的研制

目的研制血细胞分析国家一级标准物质,作为血细胞分析检测结果溯源的标准。方法新鲜血经稳定化处理、调整浓度后分装成待评价的标准物质;参照ISO Guide35(2006版)和《一级标准物质技术规范》的要求进行均匀性和稳定性评价,使用直接溯源至参考方法的标准仪器对标准物质进行定值;对标准物质的均匀性、稳定性和定值过程引入的不确定度进行评定,计算合成不确定度和扩展不确定度;将一级标准物质与二级标准物质的不确定度进行比较。结果标准物质WBC、RBC、Hb和PLT4个参数的均匀性评价的方差分析结果均显示P0.05,表明标准物质是均匀的;瓶间均匀性的标准不确定度分别为0.04×109/L、0.022×1012/L、0.1g/L和2.2×109/L。26周内各参数的稳定性评价趋势分析结果均显示P0.05,表明该期限内标准物质是稳定的;长期稳定性的标准不确定度分别为0.08×109/L、0.023×1012/L、1.1g/L和3.6×109/L。定值结果的标准不确定度分别为0.09×109/L、0.059×1012/L、1.2g/L和4.1×109/L;合成并扩展不确定度后,定值结果表达式分别为(5.4±0.3)×109/L、(4.42±0.13)×1012/L、(137±3)g/L和(187±12)×109/L。一级标准物质各参数的不确定度均明显小于国家二级标准物质。结论标准物质的均匀性和稳定性良好,定值方法可靠;各参数定值结果的不确定度明显小于国家二级标准物质。     

一种国产EDTA抗凝采血管与BD管的比对研究

目的:评价一种国产EDTA采斑管A与BD采血管的性能差异.方法:选取30名志愿者和15名住院患者,分别用被评价采血管和BD采血管抽取静脉血,采血后随机选取10支进行表观质量评价,评价指标包括公称容量、血细胞附壁和溶血,并分别在取血后0.5h,4h和6h时用血液分析仪进行全血细胞计数的检测,随后对同一时间点的两组检测结果作相关分析及偏差分析.结果:(1)被评价采血管采血量在标示采血量的±10%以内,试管壁无明显血细胞附壁,4小时后有1份出现中度溶血;BD管的三项指标均合格.(2)相关分析表明,两种采血管的RBC、Hb、HCT、PLT和WBC项目的R2>0.95.(3)偏差分析表明,两采血管的RBC项在0.5h,4h,6h时分别有3份、4份、5份超过允许误差范围;Hb项在0.5h、4h、6h时均在允许误差范围内;HCT项在0.5h、4h、6h时分别有4份、3份、6份超过允许误差范围;PLT项在0.5h、4h、6h时分别有4份、5份、6份超过允许误差范围;WBC项在0.5h、4h、6h时分别有6份、7份、7份超过允许误差范围.结论:表观质量方面被评价采血管除溶血外,其他指标与BD管基本相当;相关分析方面被评价采血管与BD管线性相关良好;偏差方丽被评价管与BD管在检测异常低值标本时差异较大.     

自制红细胞沉降率检测参考物质的评价与初步应用

目的对自制红细胞沉降率检测参考物质进行评价,并试用于室内质量控制。方法以新鲜动物血为原料,对红细胞进行洗涤和固定,与模拟血浆混合配制成6个批号(ESR01～ESR06)不同沉降率水平的参考物质。参照ISO Guide35和CNAS-GL03的要求,对自制参考物质和2个批号进口质控物(QC01～QC02)进行均匀性和稳定性评价,并选择3个批号的自制参考物质应用于不同检测系统的室内质量控制,整个过程同时检测进口质控物并进行比较。结果均匀性评价结果显示,各批号自制参考物质和进口质控物均匀性良好,瓶间差异无统计学意义(P0.05),沉降率相近的自制物质和进口质控物瓶间均匀性不确定度分别是0.2～1.0 mm/h和0.8～1.5 mm/h。参考物质检测后分别置于室温和冷藏条件,4周内多次重复检测的结果均无趋势性变化(P0.05),在室温放置时,沉降率随时间变化偏差均在评价标准允许范围内,但在冷藏条件放置时,ESR02、ESR03,ESR04和QC02批号物质沉降率变化的相对偏差分布范围均超出评价标准。自制物质在冷藏条件长期保存,在观察期25周内,自制参考物质和进口质控物检测结果无趋势性变化(P0.05),沉降率相近的自制和进口质控物长期稳定性不确定度分别是0.1～3.0 mm/h和1.0～2.9 mm/h,沉降率随时间变化的偏差均在评价标准允许范围内。室内质量控制应用结果显示,自制参考物质与沉降率相近的进口质控物检测结果的CV接近。结论自制血沉参考物质均匀性、稳定性良好,室内质量控制试应用效果良好。     

HLA-B27检测的临床意义和方法学研究进展

人类白细胞抗原B27(HLA-B27)是第6号染色体HLA基因B座一个等位基因的表达产物,1968年由Thorsb等[1]发现.从1973年起,HLA-B27与多种脊柱关节病(spondyloarthropathies,SpA)的相关性、尤其是与强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的高度...     

二级标准检测系统计数血小板的质量保证与应用

目的 评价二级标准检测系统测定血小板结果的准确性与可比性,以确认新鲜血定值结果的准确和可靠程度.方法 参照美国CLSI文件EP9-A2,将二级标准检测系统与参考方法的血小板计数结果进行比对,评价40份静脉血标本检测结果的相关性和偏倚;将NCCL和日本参考实验室的二级标准检测系统的检测结果进行比对;用二级标准检测系统对36份正常新鲜血标本进行定值,将其作为校准物,用于常规实验室36台血细胞分析仪的校准.结果 二级标准检测系统与参考方法检测结果分布范围分别为(108 ～326)×109/L和(110～327)×109/L,具有良好的相关性,相关系数(r)为0.993,偏倚分布范围为-3.8％～3.4％.2009-2010年NCCL检测质控品的结果分布范围为(185 ～203)×109/L,日本参考实验室检测质控品的结果分布范围为(185～ 198)×109/L,比对数据的CV分别为2.0％～3.0％和2.6％ ～3.4％,比对数据的偏倚分布范围为-1.4％～3.7％;验证结果符合要求的20台血细胞分析仪的偏倚分布范围为-2.6％～2.1％,其余需要校准的16台血细胞分析仪校准前后的偏倚由3.4％ ～ 12.6％降至0％ ～2.8％.结论 参考实验室间的结果比对保证了血小板计数结果的准确性和可比性;二级标准检测系统定值的新鲜血作为校准物用于血细胞分析仪的校准是可行的.     

血管性血友病因子抗原检测参考物质的研制与评价

目的 利用新鲜冰冻血浆制备血管性血友病因子(von willebrand factor,vWF)抗原检测参考物质并进行评价。方法 采用低温离心法制备5个浓度水平的参考物质。按照ISO Guide35及CNAS-GL03的要求,评价参考物质的均匀性和稳定性; 依据行业标准WS/T 356-2011对参考物质在STAGO和IL检测系统的互通性进行评价; 依据ISO Guide 35的要求以NIBSC凝血标准品(SSCLOT4)为溯源标准采用6家实验室联合为参考物质定值。结果 参考物质均匀性良好,单因素方差分析F值范围0.317～0.844,差异无统计学意义(P＞0.05),瓶间均匀性不确定度u_bb为1.01%～2.06%。参考物质浓度在24周内无明显趋势性变化(P＞0.05),长期稳定性不确定度u_lts为0.79%～1.20%。参考物质在STAGO及IL两种检测系统间互通性良好。各批号定值结果为12.2%～138.9%,定值引入不确定度u_char为0.06%～0.09%。参考物质合成标准不确定度u_c为0.03%～0.16%,扩展不确定度U(k=2)为2.2%～6.7%。结论 自制参考物质的均匀性及稳定性符合要求,在STAGO及IL两系统方法间互通性良好,定值结果准确可靠。     

全国血液黏度测定室间质量评价的现状与分析

目的 分析总结2008年全国血液黏度测定室间质量评价(简称质评)数据,发现和改进实验室存在的问题,以提高实验室的检测能力.方法 2008年开展2次质评,每次分发5个批号质评物,按照仪器测定原理和回报数据的频数分布将参加实验室分为旋转式测定1组、旋转式测定2组和毛细管压力传感式测定组,以各组的加权均值作为靶值,允许范围为靶值±2s,计算各组的变异系数和及格率;比较稳态检测和动态检测结果间的差异.结果 在1s-1,50s-1和200s-1切变率下,毛细管压力传感式测定组的变异系数分别为34.40%～43.79%,13.90%～26.36%和20.03%～27.90%,及格率分别为88.2%～100%,89.7%～96.8%和86.7%～97.1%;旋转式测定1组的变异系数分别为16.58%～36.59%,5.12%～7.34%和4.58%～8.69%,及格率分别为84.5%～91.7%,86.0%～93.2%和87.7%～93.3%;旋转式测定2组的变异系数分别为6.39%～8.21%,7.21%～8.43%和6.97%～8.19%,及格率分别为90.2%～95.1%,90.0%～94.2%和91.5%～97.0%.稳态检测和动态检测结果t检验差异无统计学显著性意义(P>0.05),在1s-1时动态检测结果的变异系数在31.26%～61.74%,稳态检测变异系数在8.31%～27.21%.结论 毛细管压力传感式测定组结果的变异系数大于旋转式测定组,可能与参加的实验室较少和仪器类型较分散有关;各分组检测结果的及格率基本相当;在1s-1时动态检测结果的变异大于稳态检测,建议实验室采用稳态检测,同时开展规范的室内质控和仪器校准,为临床提供更加准确的诊断依据.