B细胞特异激活蛋白基因Pax5原核表达、纯化及多克隆抗体制备研究

目的克隆人B细胞特异激活蛋白基因Pax5,并实现Pax5的原核表达、纯化及多克隆抗体制备。方法从人淋巴瘤细胞株Raji提取总RNA,用RT-PCR扩增Pax5基因片段,克隆至pMD19-T载体,双酶切及基因测序鉴定后,再定向插入原核表达载体pET28a中,并转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达目的蛋白,进行SDS-PAGE分析,纯化后进行Western blot分析,用原核表达蛋白制备兔抗Pax5抗血清。利用免疫荧光染色法观察Raji细胞中的Pax5表达情况。结果克隆得到的目的基因片段大小与预期相符,测序结果与GenBank中报道的序列完全一致,成功构建了重组表达质粒pET28a-Pax5,并获得目的蛋白。Western blot检测原核表达Pax5蛋白相对分子质量约为42 000,经镍离子金属螯合柱纯化后,纯度达95%以上。兔抗Pax5抗血清ELISA效价可达1∶256 000。免疫荧光染色结果显示Raji细胞中Pax5高表达。结论本研究在原核系统中成功表达了Pax5重组蛋白,并制备多克隆抗体,为开发B淋巴细胞白血病诊断试剂盒提供了实验数据。     

E2A、EBF和PAX5在早期B细胞分化发育中的作用

早期B细胞分化发育受到各种转录因子调控,特别是转录因子E2A、早期B细胞因子(EBF)及PAX5的调控尤为重要。本文以E2A、EBF与PAX5三个转录因子为综述对象,逐一阐述其在早期B细胞分化发育中的作用,并对3个转录因子在早期B细胞分化发育中的协同作用进行了综述。本文将为"B淋巴细胞分化发育调控机理研究"提供参考。     

昌黎地区空气中传致孢粉调查

本文总结了1986年昌黎地区空气中孢粉飘散规律。全年暴片364张,收集孢粉8922粒,包括47个种属。孢粉飘散在全年出现两个高峰,即2～6月份和7～10月份。了解孢粉飘散规律,对防治变态反应性疾病有一定的意义。     

2009年SFDA批准注册的国产化学药品统计分析

目的了解和分析2009年我国新注册的化学药品分布情况。方法全面检索国家食品药品监督管理局数据库和相关资源,登记2009年注册的国产化学药品的名称、批准文号、药物化学治疗分类、是否属国家基本药物等,然后运用Excel进行分类汇总分析。结果 2009年共注册国产化学药品1 583个,涉及通用名药物489个,药品批准文号数量排序前三位的依次为抗微生物药物、作用于中枢神经系统的药物和作用于消化系统的药物。结论 2009年国产化学药品注册依然存在药品注册与需求不完全一致、个别药品"一药多号"、抗微生物药物生产竞争激烈等问题,同时也出现基本药物注册小高峰等新迹象。     

枸橼酸钠抗凝连续性肾脏替代治疗救治尿毒症脑出血患者的优势

目的 探讨枸橼酸钠抗凝连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy, CRRT)在救治尿毒症脑出血患者中的优势。方法 2012年1月至2020年6月尿毒症脑出血患者44例,根据抗凝方式分为枸橼酸钠抗凝CRRT组(n=17)和无肝素CRRT组(n=27),比较两组生存率及各指标之间的差异;根据结局事件分为生存组(n=34)和死亡组(n=10),比较、分析枸橼酸钠抗凝CRRT在救治尿毒症脑出血患者中的价值。结果 经过枸橼酸钠抗凝CRRT治疗的脑出血患者生存率为100.0%,而经过无肝素CRRT治疗的患者生存率为63.0%(χ²=8.148,P=0.004)。两组在血清钠、钙、钾、血小板计数、白细胞计数、C反应蛋白(CRP)、D-二聚体、甘油三酯方面差异有统计学意义。生存组B型钠尿肽、钙、CRP、D-二聚体、磷、白细胞计数较死亡组显著减低,而血清白蛋白、钠、血小板计数较死亡组显著升高。结论 尿毒症患者脑出血发生后,枸橼酸钠抗凝CRRT治疗具有比无肝素CRRT治疗更为明显的优势,既能保证充分血液透析,又能改善尿毒症脑出血患者的低血钠、高血钙,减轻炎症状态,保证救治成功率。     

地奥司明的药理活性研究进展

地奥司明是一种从植物中提取分离得到的黄酮类化合物,广泛存在于各种植物中,具有广泛的药理学活性和良好的应用开发前景。本文对地奥司明的药代动力学特征、作用机制和药理作用进行了综述。     

C-myc单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备与鉴定鼠抗C-myc蛋白单克隆抗体。方法利用C-myc蛋白做免疫原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经间接ELISA法筛选、有限稀释法克隆、单克隆抗体Ig亚型鉴定,获得2株能够稳定分泌抗C-myc特异性抗体的杂交瘤细胞株,再将杂交瘤细胞注射入小鼠腹腔诱使小鼠产生腹水。结果获得2株可稳定分泌抗C-myc抗体的杂交瘤细胞株,命名为SHH-1H11,SHH-2A9,Ig亚型分别为IgG1亚类和IgM。细胞培养上清效价分别为1:10240、1:5 120;小鼠腹水效价分别为1:64 000、1:32 000。结论制备的C-myc单克隆抗体仅与C-myc蛋白反应,与其他蛋白没有交叉反应,表明获得的单克隆抗体的特异性很高。     

婆婆治糖尿病的秘方

第一次到男友家时,准婆婆为我做了一大桌好吃的,而她自己却吃着用黄豆和大米混煮的干饭。男友告诉我,婆婆患有糖尿病,要控制饮食。两年后,我和男友结婚,与婆婆生活在一起。我发现,婆婆在控制饮食方面有独到的妙法。婆婆患糖尿病时才45岁,体内的胰岛素值是零。医生说,婆婆应该注射胰岛素,但婆婆坚持先进行食疗。她了解到,大米的含糖量为77%,而黄豆的含