吸收大学生参与科学研究培养创新型人才的探索与实践

吸收大学生参与科学研究,培养创新型人才是高等学校提高人才培养质量的重要举措。通过吸收大学生参与科学研究,有利于培养大学生提出问题、分析问题、解决问题的能力,提高实践能力和创新能力,为成为创新型人才打下良好基础。笔者对医学生参与科学研究进行了探索与实践,以摸索培养创新型医学人才的新途径。     

柚皮苷对H_2O_2诱导H9c2心肌细胞损伤保护作用

目的探讨柚皮苷对H_2O_2诱导的H9c2心肌细胞凋亡的保护作用及机制。方法体外培养H9c2心肌细胞,用H_2O_2诱导建立细胞凋亡模型。实验设对照组、模型组、柚皮苷低、中、高剂量组(10、20、40μmol/L),噻唑蓝法检测细胞活力并用显微镜观察各组细胞形态;原位末端标记法检测H9c2心肌细胞凋亡情况;RT-PCR及Western blot法检测凋亡相关因子Bcl-2、Bax、caspase-3 m RNA及蛋白表达。结果与对照组比较,模型组细胞凋亡率[(17.2±2.1)%]明显升高(P<0.01);与模型组比较,10、20、40μmol/L柚皮苷组细胞凋亡率[分别为(10.7±1.9)%、(5.7±1.2)%、(6.4±1.5)%]均下降(均P<0.05)。与对照组比较,模型组H9c2心肌细胞Bcl-2蛋白表达水平(0.76±0.16)明显下调,Bax、caspase-3蛋白表达水平[分别为(5.42±0.52)、(1.09±0.11)]均上调(均P<0.01);与模型组比较,10、20、40μmol/L柚皮苷组H9c2心肌细胞Bcl-2蛋白表达水平[分别为(1.37±0.11)、(1.65±0.09)、(1.65±0.15)]均上调,Bax、caspase-3蛋白表达水平[分别为(2.78±0.55)、(3.43±0.15)、(2.69±0.26)和(0.59±0.08)、(0.77±0.06)、(0.82±0.05)]均下调(均P<0.05)。结论柚皮苷对H_2O_2诱导的H9c2心肌细胞损伤具有一定保护作用,其机制可能与其对凋亡信号途径的抑制作用有关。     

蒺藜皂苷对脑缺血再灌注大鼠炎性细胞因子表达的影响

目的：探讨蒺藜皂苷对大鼠缺血再灌注损伤后脑组织的保护作用及其机制。方法：将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和蒺藜皂苷治疗低剂量组和高剂量组,采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型。脑缺血再灌注24h后检测大鼠神经功能损伤评分;干湿重法测定脑含水量;ELISA 法检测大鼠脑组织及血清TNF-α、IL-6和IL-10的含量。结果：与模型组相比较,蒺藜皂苷治疗组可明显减轻脑缺血再灌注大鼠神经功能损伤和脑水肿程度,降低缺血脑组织和血清TNF-α和IL-6的含量、增加缺血脑组织和血清IL-10的含量。结论：蒺藜皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与其增强IL-10的表达,降低TNF-α和IL-6的表达,从而抑制炎症反应、减轻大脑神经功能损伤有关。     

中药川贝对哮喘模型小鼠肺水肿和支气管炎症的影响

目的：确定中药川贝对哮喘模型小鼠肺水肿和支气管炎症的影响.方法：建立哮喘小鼠模型并随机分为模型组（OVA致敏的小鼠）,中药川贝组（中药川贝治疗的小鼠）和PBS组（正常对照组的小鼠）.结果：中药川贝可抑制哮喘模型小鼠肺水肿,降低BALFIL-1和IL-6水平,同时还可降低亚硝酸盐浓度和减轻中性粒细胞的浸润,并且使哮喘模型小鼠血清IgE水平降低.结论：中药川贝通过抑制哮喘模型小鼠血清IgE水平可减轻肺水肿及支气管中性粒细胞炎症.     

灵芪胶囊对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

[目的]通过实验研究,探讨灵芪胶囊对小鼠肝细胞瘤(S180)荷瘤小鼠的抑瘤作用。[方法]采用体内实验法,于无菌条件下抽取传代7d、生长良好的S180荷瘤小鼠腹水,用无菌生理盐水1∶3稀释(约含瘤细胞2×103/L),按0.2mL/只接种于消毒后的小鼠右前肢腋部皮下,制成肿瘤模型,经口灌胃灵芪胶囊11d后,取瘤体称质量,计算抑瘤率;采用苏木-伊红(HE)染色,于光镜下观察各组肿瘤组织细胞形态学变化。[结果]灵芪胶囊各组与模型组相比肿瘤体积缩小,灵芪胶囊高、中、低剂量对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为22.18%、40.18%、36.40%;实验形态学结果表明,模型组、阳性对照组、灵芪胶囊组之间有一定差异,灵芪胶囊能在一定程度上改善肿瘤组织形态,从而为中药抗癌作用从微观方面提供了有力证据。[结论]灵芪胶囊对S180荷瘤小鼠有明显抑瘤作用。     

健脑益寿胶囊对衰老模型小鼠血清SOD及GSH—Px的影响

目的：探讨健脑益寿胶囊的抗衰老作用机制。方法：以D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠为模型，分别灌胃给予健脑益寿胶囊高剂量组2．08g／kg，中剂量组1．04g／kg，低剂量组0．52g／kg；阳性对照药维生素E0．0078g／kg；空白对照生理盐水10ml／kg。6周后，测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的活性。结果：与模型组比较，健脑益寿胶囊可明显提高衰老模型小鼠血清中SOD及GSH—Px的活性。结论：健脑益寿胶囊具有明显的抗衰老作用，其作用机理可能与提高抗氧化酶的活性，对抗自由基的生成有关。     

柚皮苷通过P38 MAPK/NF-κB通路抑制脂多糖致HaCaT细胞炎症反应

目的 探讨柚皮苷通过P38 MAPK/NF-κB通路对脂多糖（LPS）致HaCaT细胞炎症损伤的抑制作用。方法 LPS（0、0.1、1.0、10.0、20.0 μg/mL）孵育24 h刺激人永生化角质细胞HaCaT,模拟银屑病模型,MTT法观察细胞存活率变化,Western bloting法检测白介素（IL）-6和NF-κB蛋白表达;MTT法观察柚皮苷（0、5、10、20、40、80、160、320μmol/L）作用24 h对HaCaT存活率的影响;选择LPS、柚皮苷最佳作用浓度。柚皮苷（20和40 μmol/L）作用银屑病模型HaCaT细胞24 h,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测IL-6、IL-1β、IL-17和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的mRNA表达水平变化;Western blotting法检测细胞核内转录因子NF-κB p65、P38 MAPK磷酸化蛋白水平以及炎症因子IL-6蛋白水平。结果 LPS增加HaCaT细胞存活率,并上调NF-κB p65和IL-6蛋白表达,呈剂量相关性,炎症反应在20 μg/mL达到高峰;5~160 μmol/L柚皮苷对HaCaT细胞无明显毒性作用。与模型组比较,柚皮苷能够显著抑制炎症因子IL-6、IL-1β、IL-17和TNF-α的转录水平（P<0.05）;同时能够显著抑制LPS诱导的NF-κB p65和P38 MAPK磷酸化蛋白水平、抑制IL-6蛋白的表达（P<0.05）。结论 柚皮苷抑制脂多糖致HaCaT细胞炎症反应,发挥改善银屑病的作用,机制可能与抑制P38 MAPK/NF-κB信号通路有关。     

白毛藤多糖抑制人乳腺癌细胞增殖作用的研究

目的：探讨白毛藤多糖对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用。方法：将不同浓度白毛藤多糖作用MCF-7细胞后,用MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜检测细胞凋亡情况,RT-PCR法检测bcl-2、caspase-3基因表达量的变化。结果：不同浓度白毛藤多糖对MCF-7细胞的增殖有明显抑制作用,并可诱导MCF-7细胞凋亡,抑制MCF-7细胞bcl-2表达,上调caspase-3表达。结论：白毛藤多糖抑制MCF-7细胞增殖,促进凋亡,其机制可能与激活caspase-3、抑制bcl-2表达有关。     

FGF-1 对TGF-β1 诱导的H9c2 心肌细胞凋亡与Caspase-3，Caspase-8 和Caspase-9 表达的关系研究

目的 观察酸性成纤维细胞生长因子（FGF-1）对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的H9c2心肌细胞凋亡作用及对半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）,半胱氨酸蛋白酶-8（Caspase-8）和半胱氨酸蛋白酶-9（Caspase-9）表达的影响,并探讨可能机制。方法 体外培养H9c2 细胞,随机分为5 组：模型组,肝素（Heparin）组、FGF-1 组、FGF-1/Heparin 组和正常对照组。采用3-（4,5- 二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）比色分析检测H9c2 细胞的存活率,TUNEL 染色检测H9c2 细胞凋亡指数和Western blot 分析检测H9c2 细胞Caspase-3,Caspase-8 和Caspase-9 的表达。结果 模型组H9c2 细胞存活率与正常对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,模型组降低;FGF-1 组和FGF-1/Heparin 组H9c2 细胞存活率与模型组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,FGF-1 组和FGF-1/Heparin 组均升高。模型组H9c2 细胞凋亡指数,Caspase-3、Caspase-8 和Caspase-9 的表达与正常对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,模型组升高;FGF-1 组和FGF-1/Heparin 组H9c2 细胞凋亡指数,Caspase-3、Caspase-8 和Caspase-9 的表达与模型组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,FGF-1 组和FGF-1/Heparin 组降低。结论 FGF-1 对TGF-β1诱导的H9c2 心肌细胞凋亡具有抑制作用,其机制可能与抑制Caspase-3、Caspase-8 和Caspase-9 的表达有关。     

中药川贝对哮喘模型小鼠气道炎症的影响及可能机制研究

目的 观察中药川贝对哮喘模型小鼠气道炎症及白细胞介素8（IL-8）、白细胞介素13（IL-13），趋化因子受体CXCR-2 和趋化因子配体[ 肿瘤生长相关因子-α（GRO-α）、上皮细胞嗜中性粒细胞活性蛋白-78（ENA-78）及嗜中性活性肽-2（NAP-2）] 的影响。方法 BALB/c 小鼠，随机分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组。采用卵蛋白（OVA）致敏激发复制小鼠哮喘模型。造模成功后高剂量组和低剂量组分别按18.0 和9.0 mg/kg 剂量给予中药川贝灌胃；正常组和模型组等量生理盐水灌胃，每天1 次，连续28 d。观察各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞分类计数的变化；光镜下观察病理学变化并进行炎症评分；ELISA 检测血清中IL-8 和IL-13 浓度；免疫组织化学法检测CXCR-2 和GRO-α、ENA-78、NAP-2 阳性细胞；实时PCR（real-time PCR）检测CXCR-2 和GRO-α、ENA-78、NAP-2 mRNA 的表达。结果 模型组小鼠BALF 中中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数及炎症评分较正常组增高，差异有统计学意义（P <0.05），高剂量组和低剂量组则较模型组降低，差异有统计学意义（P <0.05）；模型组小鼠IL-8 和IL-13 浓度较正常组增高，差异有统计学意义（P <0.05），高剂量组和低剂量组则较模型组降低，差异有统计学意义（P <0.05）；模型组小鼠CXCR-2 和GRO-α、ENA-78、NAP-2 阳性细胞和mRNA 表达水平较正常组增加，差异有统计学意义（P <0.05），而高剂量组和低剂量组则较模型组降低，差异有统计学意义（P <0.05）。结论 中药川贝可能通过抑制IL-8、IL-13，CXCR-2 和GRO-α、ENA-78、NAP-2 发挥对哮喘模型小鼠的抗炎作用。