鞘脂激活蛋白C抑制LNCaP细胞雄激素受体降解的研究

目的:探讨Saposin C对LNCaP细胞雄激素受体(AR)蛋白降解的影响。方法:通过转染实验,将Saposin C、TAT-Saposin C真核表达载体转染至LNCaP细胞,MTS检测Saposin C对LNCaP细胞增殖的影响,Western blot检测Saposin C对AR蛋白水平的影响及其在细胞中降解的调节作用。结果:Saposin C抑制LNCaP细胞AR蛋白的降解,上调胞内AR蛋白水平,促进LNCaP细胞增殖。结论:Saposin C增强AR蛋白的稳定性抑制其在细胞中的降解。     

膀胱肿瘤6号染色体长臂的杂合性缺失研究

目的探讨 6号染色体长臂的杂合性缺失 (LOH)与膀胱肿瘤的关系。方法应用 6q2 1区域附近D6S40 4、D6S43 4微卫星标志 ,以PCR SSLP 银染法对 3 1例膀胱肿瘤患者的肿瘤组织进行杂合性缺失的研究。结果膀胱肿瘤组织D6S40 4LOH发生率为 3 5 5 %,D6S43 4LOH发生率为 2 2 6%。结论 6q2 1区域附近可能存在与膀胱肿瘤相关的肿瘤抑制基因。     

多媒体技术在护理生物化学教学中的应用与思考

结合护理生物化学教学改革实践,介绍了多媒体技术在护理生物化学应用中的优势,探讨了存在的问题,提出了提高多媒体教学质量的方法.     

生物化学实验教学体会及存在的问题

生物化学是研究生命化学的科学 ,在分子水平探讨生命的本质 ,即研究生物体的分子结构与功能、物质代谢与调节、及其在生命活动中的作用。生物化学对医学的发展起着重要的促进作用 ,是医学院校一门重要的必修基础课程 ,实验教学是其重要的组成部分 ,是学生获得正确思维、技能训练和灵活运用知识通往科研和临床的桥梁 ,搞好实验教学 ,一方面能加深学生对课堂所学理论知识的理解 ,另一方面可提高学生的实验技能与学习兴趣 ,从而提高生化的教学质量[1～ 4] 。现就实验教学中的体会及存在的问题讨论如下。1　生物化学实验教学的体会1.1　实验教学…     

丙型肝炎病毒1bDY株ns5a基因的克隆及其所表达融合蛋白的免疫原性分析

目的:克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因,为进一步研究和应用该基因及其表达产物奠定基础。方法:采用基因重组技术完成实验。设计特异的引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增出目的片段,约480bp;将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,再与原核表达载体pET-28a重组;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达。采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白表达水平。结果:含有HCV 1b DY株ns5a基因的重组体构建成功,并得以表达蛋白,并且NS5A蛋白具有与HCV患者阳性血清中的多克隆的结合活性,具有很好的免疫原性。结论:运用原核细胞基因工程技术成功构建和表达了HCV 1b DY株ns5a基因,为进一步研究HCVns5a的基因型及探讨该基因编码的NS5A蛋白的性质和生物学活性创造条件。     

Saposin C促进PC3细胞p27KIP1蛋白泛素化降解的研究

目的:探讨Saposin C促进PC3细胞抑癌基因p27KIP1蛋白泛素化降解,刺激细胞增殖,以及与PI3K/AKT信号通路的关系。方法:利用含有Saposin C的真核表达载体转染PC3细胞,检测Saposin C对PC3细胞Skp2、抑癌基因p27KIP1蛋白水平的调节以及对细胞增殖的影响。结果:Saposin C通过激活PI3K/AKT信号途径上调细胞内Skp2的蛋白含量,下调抑癌基因p27KIP1的蛋白水平,其机制是加速p27KIP1的蛋白降解,促进PC3细胞增殖。结论:Saposin C在PC3细胞中通过激活PI3K/AKT信号途径促进抑癌基因p27KIP1的蛋白泛素化降解,刺激细胞增殖。     

腓骨截骨术治疗膝骨性关节炎的临床观察

目的 观察腓骨截骨术治疗膝骨性关节炎的临床效果。方法 采用前瞻性研究方法，对2013年9月至2016年3月于我院治疗的87例（105膝）膝骨性关节炎内侧间隙疼痛病人，采用单纯腓骨截骨术治疗，其中男23例（29膝），女64例（76膝），平均年龄为63.4岁。手术前后对病人进行相应影像学评估，观察膝关节内外侧间隙高度变化；分别于术前以及术后3 d、3个月、6个月采用疼痛视觉模拟量表（visual analogue scale, VAS）、美国特种外科医院（the hospital for special surgery, HSS）膝关节评分、美国膝关节协会（the American Knee Society, AKS）综合评分系统（包含膝评分和功能评分两大部分）评估膝关节的恢复情况。结果 所有病人于术后2 d下床活动，原有膝关节内侧间隙疼痛明显减轻或消失。3例病人术后出现一过性腓浅神经损伤，5例发生腓骨小头后侧疼痛；术后3 d、3个月、6个月的VAS、HSS评分及AKS膝评分、AKS功能评分均较术前改善，除了术后3 d的AKS功能评分外，其余各项指标与术前相比，差异均有统计学意义（P均＜0.05）。术后7 d复查膝关节负重位X线片，与术前膝关节负重位X线片对比，均可见膝关节内侧间隙有不同程度的增宽。结论 腓骨截骨术具有手术切口小、创伤小、操作简单、风险低等优势，对治疗膝骨性关节炎内侧疼痛具有良好的疗效。     

生物化学多媒体教学的优势及存在的问题

多媒体教学作为一种先进的教学手段,在越来越多地表现出自身优越性的同时,也明显存在着弊端.文章从生物化学多媒体教学的实践中,提出了一些提高多媒体教学质量的途径和方法.     

丙型肝炎病毒NS5A基因的克隆及序列比对分析

目的:研究HCV N S5A区基因的结构与功能,为提高干扰素(IFN)治疗HCV感染的有效性提供依据,及为建立以N S5A蛋白做抗原的新一代诊断试剂盒,提高HCV感染检出率作出有益的尝试。方法:以含HCV 1b全长cDNA的质粒HCV 17为模板,利用巢式PCR扩增出一段长约500bp的cDNA片段,以此基因片段作为目的基因,进行T-A克隆,构建PMD 18-T-N S5A。结果:经酶切及测序证实,PMD 18-T-N S5A质粒中的插入基因片段为HCV 1b N S5A区部分基因,与HCV标准株HCV J序列进行比对分析,核苷酸和氨基酸序列的同源性均为90%以上,并且该区段包含了干扰素敏感决定区(ISDR)。结论:建立HCVN S5A基因片段稳定的无性繁殖系,并进行同源性分析对研究ISDR序列与IFN疗效的关系是非常重要的;通过基因重组表达N S5A蛋白,可用于HCV诊断试剂盒的研究。     

尿脱落细胞6号染色体长臂的微卫星改变诊断膀胱肿瘤

目的：探讨尿脱落细胞6q的微卫星改变(MA)在膀胱肿瘤早期诊断中的应用价值，并研究6q的杂合性缺失(LOH)与膀胱肿瘤的关系．方法：应用6q21区域附近D6S404，D6S434微卫星标志，以PCR—SSLP—银染法对31例膀胱肿瘤的尿脱落细胞与肿瘤组织进行微卫星分析．结果：64．5％的肿瘤组织和58．1％的尿脱落细胞发生MA;10例非膀胱肿瘤对照未出现MA；检出率与肿瘤分期，分级无相关性；肿瘤组织D6S404 LOH发生率35．5％，D6S434 LOH发生率22．6％．结论：尿脱落细胞微卫星分析有早期诊断意义；6q21区域附近可能存在与膀胱肿瘤相关的肿瘤抑制基因．