壮药两粤黄檀化学成分研究(I)

目的 研究壮药两粤黄檀Dalbergia benthami的化学成分。方法 通过硅胶、凝胶、HPLC等柱色谱及重结晶方法进行分离和纯化,根据理化性质和波谱数据对化合物结构进行鉴定。结果 从两粤黄檀乙醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为4''-羟基-6-羟甲基-5,7-二甲氧基异黄酮（1）、β-谷甾醇（2）、胡萝卜苷（3）、豆甾醇（4）、大鱼藤树酸（5）、robustin（6）、4-hydroxy-3-（3''-hydroxy-4''-methoxyphenyl）-5-methoxy-2",2"-dimethylpyrano-（5",6"：6,7）-coumarin（7）、大鱼藤树素甲醚（8）、大鱼藤树酸甲酯（9）、4''-羟基-5,7-二甲氧基-6-（3-甲基-2-丁烯基）-异黄酮（10）、芒柄花黄素（11）、伪赝靛苷元（12）、毛蕊异黄酮（13）、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷（14）。结论 化合物1为新化合物,命名为两粤黄檀酮;所有化合物均为首次从该属植物中分离得到。     

情境教学法在病理教学中的应用

情境教学法是一种创新的教学方法,通过在教学中运用文字、图片或实物照片等方式创设问题情景,引起学生一定的态度体验,帮助学生理解教材。本文探讨了在病理教学中应用情境教学法,激发学生的学习兴趣,提高教学质量。     

护理记录存在的缺陷分析及改进对策

随着社会的进步,患者维权意识的提高,医疗纠纷发生率呈不断上升趋势[1].<医疗事故处理条件>第十条规定:护理记录是根据医嘱和病情对患者在住院期间护理过程的客观记录[2],其直接反映护理工作的内容步骤、质量与效果,并为医疗提供第一手资料,但受到了传统观念的影响,护理人员缺乏系统培训,更由于护理人员法律意识淡薄,未充分认识到护理记录书写的法律效力,未认识到这是重要的法律依据,现将国内目前护理记录存在的缺陷及对策分析如下.     

呼吸道合胞病毒DNA疫苗的构建和免疫效果的初步观察

目的构建呼吸道合胞病毒（RSV）的DNA疫苗并对其免疫效应进行观察,为RSV的免疫预防提供新思路。方法构建表达RSV-F蛋白的质粒pcD—F,接种BALB／c小鼠后以RSV long株进行攻击,于攻击当日和攻击后第5、14天采用ELISA和ELISPOT方法分别检测小鼠RSV特异性IgG抗体和分泌RSV特异性IFN-γ的淋巴细胞,荧光定量PCR方法检测小鼠肺组织RSV—RNA的含量。肺组织切片行苏木精-伊红染色,观察RSVlong株攻击后肺组织病理改变。结果pcD-F免疫小鼠后,产生RSV特异性IgG抗体（滴度1：60）,RSV攻击后第14天,pcD—F免疫小鼠的特异性IgG抗体水平升至1：250,明显高于对照组（P〈0．05）。RSV攻击后,pcD—F免疫小鼠分泌RSV特异性IFN-γ的淋巴细胞升至99个／1×10^5细胞,明显高于对照组的9个／1×10^5细胞（P〈0．05）。pcD-F免疫小鼠的肺部炎症反应明显轻于对照组,肺部RSV得到有效的清除。结论成功构建的RSVDNA疫苗具有良好的免疫原性。     

荧光恒温扩增技术检测肠道病毒71型方法的建立与评价

目的利用荧光恒温扩增(SAT)技术建立一种快速可靠的肠道病毒71型(EV71)检测方法。方法通过设计特异性的EV71 RNA扩增引物及优化探针技术,使用M-MLV反转录酶及T7 RNA多聚酶对EV71 RNA进行核酸扩增,同时利用荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪进行实时的荧光信号收集和检测。检测复旦大学附属儿科医院儿童手足口病患儿粪便样本199例,以EV71型核酸检测试剂盒作参比方法,DNA测序为第三方验证方法,对研究数据进行Kappa一致性分析。结果 SAT技术共检测到119例EV71阳性样本,其中21例荧光探针法检测为阴性,经测序证实20例样本仍为阳性。SAT与荧光探针法检测结果的Kappa值为0.789。SAT方法的敏感性100%、特异性98.77%。结论本研究建立的EV71型RNA SAT技术具有敏感性高、特异性强、准确、快速可靠等优点,适用于临床对EV71感染的快速诊断。     

2006年至2008年上海市住院腹泻患儿A组轮状病毒的分子流行病学调查

目的 分析上海地区住院腹泻患儿A组轮状病毒(RV)基因型别、流行季节及年龄分布,以了解本地区A组RV的分子流行病学动态变化特征,为婴幼儿腹泻的预防和控制提供理论依据.方法 2006年1月至2008年12月共收集来自复旦大学附属儿科医院5岁以下腹泻患儿的5176份粪便标本.抽取其中RV抗原阳性标本380份,采用套式多重RT-PCR法进行RV的基因分型.结果 2006-2008年RV腹泻主要的流行季节是10-12月份,＜3岁的患儿占全部患儿的96.8％.380份粪标本中,222份为G3型,占58.4％,41份为G9型,占10.8％.3年间G1型、G2型均少见,G混合型以G3和G9型的混合为主.2006年和2008年均以P[8]型的流行为主,分别占64.6％(53/82)和46.8％(58/124).2007年以P[4]型为主,占38.5％(67/174).P[6]和P[9]型所占比例较低,P混合型以P[8]和P[4]型的混合为主.G未分型和P未分型在3年间均呈上升趋势.P[8]G3型(20.5％)是上海地区2006-2008年间最主要的A组RV流行株,其次包括P[4]G3型及P[m]G3型.结论 2006-2008年上海地区A组RV显示了新的分子流行病学变化特征,包括主要流行型别的改变,流行型别更趋于多样化.     

网织红细胞参数在新生儿溶血病治疗中的应用价值

目的探讨网织红细胞(RET)各参数在新生儿溶血病(HDN)治疗中的价值,为临床判断疗效提供参考。方法对44例HDN患者于入院当天、治疗中、出院当天3个时间点取末梢血,测定网织红细胞计数百分比(RET%)、未成熟网织红细胞百分比(IRF%)、低荧光强度网织红细胞百分比(LFR%)、中荧光强度网织红细胞百分比(MFR%)、高荧光强度网织红细胞百分比(HFR%)共5个指标,以入院当天各指标为基线,分析治疗中、出院当天各参数的变化。结果随治疗的进行,RET%、IRF%、HFR%、MFR%呈进行性下降,LFR%呈进行性上升。RET%明显降低者占患者总数的84.09%。在明显降低组中,出院时RET%、IRF%、MFR%、HFR%与入院时相比差异有统计学意义(P0.05),RET%下降与IRF%、HFR%下降呈正相关(r值分别为0.632、0.639,P0.01)。在无明显降低组中,出院时RET%、IRF%、MFR%、HFR%与入院时相比,差异均无统计学意义(P0.05)。结论 RET%可作为监测MDN治疗过程中比较敏感的指标。当RET%下降明显时,提示治疗有效。同时,IRF%、HFR%和LFR%可作为监测HDN治疗的辅助指标。     

急性轮状病毒性腹泻患儿免疫应答的观察

目的 研究小儿在轮状病毒急性感染期的免疫应答特点。方法 采用EIJSA方法检测血浆和粪便轮状病毒特异性抗体，流式细胞术进行淋巴细胞亚群分析，采用荧光定量RT-PCR方法检测外周血单个核细胞转录因子、细胞因子mRNA的表达。结果 腹泻患儿血浆中轮状病毒特异性聊价gG抗体和大便中轮状病毒特异性IgA抗体及CD19细胞亚群比例，均较对照组有明显的升高。腹泻患儿外周血单个核细胞中IL-12p40 mRNA的表达升高。粪便和血浆中IgA抗体的滴度与患儿腹泻的严重程度有一定关系。结论 急性轮状病毒感染小儿早期出现的免疫应答反应，以特异性抗体显著增加为主要特点，并且抗体产生的水平与疾病的严重程度相关。     

NGAL和KIM-1检测在儿童脓毒症合并急性肾损伤中的诊断价值

 目的 探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL）和肾损伤因子1（kidney injury molecule 1,KIM-1）的检测在脓毒症合并急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）患儿诊疗过程中的临床应用价值。方法 采用病例对照研究,按照纳入标准选取2019年1-12月入住复旦大学附属儿科医院PICU的脓毒症患儿82例,按照排除标准去除13例。按入院后是否发生AKI分为脓毒症AKI组28例和脓毒症非AKI组41例。脓毒症AKI组患儿根据治疗过程中是否进行连续性肾脏替代治疗（continuous renal replacement therapy,CRRT）分为脓毒症AKI-CRRT组和脓毒症AKI-非CRRT组。检测脓毒症AKI和非AKI患儿住院后0 h、24 h和72 h的血NGAL、KIM-1、肌酐、胱抑素C（cystatin C,CysC）和视黄醇结合蛋白（retinol-binding protein,RBP）水平,同时监测24 h和72 h的尿量。用非参数检验统计方法分析数据,通过受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线分析NGAL、KIM-1、肌酐、尿量、CysC、RBP对脓毒症并发AKI的诊断价值。结果 脓毒症AKI组患儿的NGAL、KIM-1、肌酐、CysC水平在0 h、24 h、72 h时均显著高于脓毒症非AKI组（P<0.05）。脓毒症AKI-CRRT组和非CRRT组各时点NGAL、肌酐的水平均高于脓毒症非AKI组（P<0.05）。KIM-1、CysC、RBP、尿量在24 h和72 h时,脓毒症AKI患儿较非AKI患儿有明显差异（P<0.05）。ROC曲线比较显示：脓毒症AKI-CRRT组和非CRRT组0 h时NGAL的AUC面积均最大（分别为0.907和0.951）、灵敏度最高（分别为92%和100%）。脓毒症AKI-CRTT组患儿的肌酐水平在72 h时呈现下降,并且较24 h时肌酐的AUC面积减小、敏感度和特异性均降低（P<0.05）;NGAL和KIM-1水平在24 h显著升高后,至72 h仍维持在较高水平,且NGAL在3个时点、KIM-1在后2个时点均维持良好的诊断效能。结论 NGAL灵敏度较高,可在早期提示AKI的发生。在血液净化的治疗过程中NGAL、KIM-1受干扰因素较少,可为AKI患儿肾功能真实水平的评估提供参考。     

APRIL调节基质金属蛋白酶的表达对结直肠癌细胞转移侵袭能力的影响

目的 研究增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞转移侵袭能力和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)表达的影响,以进一步明确APRIL在CRC转移中的作用.方法 APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNAAPRIL)转染人CRC细胞SW480,APRIL重组蛋白(rhAPRIL)刺激CRC细胞HCT-116,Transwell小室转移及侵袭试验分析APRIL对CRC细胞转移及侵袭能力的影响;RT-PCR、ELISA检测MMPs的表达变化.结果 siRNA-APRIL转染的SW480细胞Transwell小室试验转移及侵袭细胞数显著减少(P＜0.05),rhAPRIL刺激的HCT-116细胞Transwell小室试验转移及侵袭细胞数显著增多(P＜0.05);MMP-2、MMP-9及TIMP-1 mRNA,分泌型的MMP-2、MMP-9蛋白表达在转染或刺激前后差别均有统计学意义(P＜0.05);MMP的抑制剂GM6001处理后,SW480对照组和rhAPRIL刺激后的HCT-116细胞Transwell小室侵袭细胞数显著减少(P＜0.05).结论 APRIL通过调节MMPs的表达促进结直肠癌的侵袭和转移,可为结直肠癌转移的干预及治疗提供新的靶点.