一氧化氮对急性出血坏死性胰腺炎肝脏中Toll样受体2/4 mRNA表达的影响

目的探讨一氧化氮(NO)对于急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)时肝脏中T o ll样受体2/4(TLR 2/4)mRNA表达的影响。方法采用牛磺胆酸钠(TAC)逆行胰胆管注射制备AHNP肺损伤大鼠模型。动物分为假手术组、胰腺炎组和L精氨酸(L A rg)治疗组。假手术组于术后6 h,胰腺炎组和L A rg组分别于术后3、6、12 h取静脉血和肝组织,测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(A ST)、淀粉酶和肝组织NO,逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法检测不同时间点肝组织肿瘤坏死因子α(TNFα)、TLR 2/4mRNA表达变化。结果与假手术组比较,胰腺炎组大鼠3 h肝组织TLR 2/4 mRNA表达开始增高〔(1.970±0.362)×10-3,(175.000±0.111)×1-0 3比(1.150±0.725)×10-6,(11.450±1.724)×10-4,〕12 h表达达峰值〔(2.940±0.316)×1-0 3,(2 673.000±88.380)×1-0 3,P均<0.01〕;血清淀粉酶ALT、A ST 3 h后即升高,肝损伤加重,肝组织TNFαmRNA表达升高,NO浓度逐渐降低(P<0.05或P<0.01);给予L A rg治疗后,NO浓度升高(P<0.05),TLR 2/4 mRNA表达降低〔3 h:(0.351±0.153)×1-0 3,(135.000±22.310)×1-0 3;6 h:(2.100±0.535)×10-3,(187.000±26.850)×1-0 3;12 h:(2.620±0.208)×1-0 3,(1 959.000±270.000)×10-3;P<0.05或P<0.01〕,血清淀粉酶、ALT、A ST均降低,肝损伤减轻,肝组织TNFαmRNA降低(P<0.05或P<0.01)。结论AHNP时,肝组织内TLR 2/4 mRNA表达上调,肝组织损伤加重;NO可以明显抑制AHNP肝组织TLR 2/4 mRNA的表达。     

胶质细胞源性神经营养因子基因重组腺病毒穿梭质粒的构建及鉴定

目的 克隆大鼠胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因，构建含有GDNF基因的重组腺病毒载体，为转染神经干细胞和基因治疗奠定基础。方法 从大鼠脑组织中提取总RNA，用逆转录聚合酶链反应方法扩增出约660bp的片段，并将该片段克隆到载体pAdTrack-CMV中，进行酶切鉴定和序列分析。结果 证实成功构建了含有GDNF基因的重组腺病毒质粒。结论 克隆到正确的大鼠GDNF基因，并构建出重组质粒pad—GDNF，为下一步重组腺病毒颗粒和基因治疗打下基础。     

开腹腹部手术延迟性术后肠麻痹的危险因素分析

目的 旨在研究首都医科大学附属北京友谊医院腹部手术后延迟性肠麻痹（prolonged postoperative ileus,PPOI）危险因素。方法 纳入2016年7月至2017年12月间于首都医科大学附属北京友谊医院普外科接受开腹消化道肿瘤根治术的患者123例为研究对象。以出现PPOI为病例组（13例）,其余为对照组（110例）。采用单因素和多因素Logistic回归模型分析PPOI的危险因素。结果 单因素分析显示体质量指数（body mass index,BMI）（χ²=6.824,P=0.009）、术后出现低钾血症（χ²=3.872,P=0.049）与PPOI发生相关。多因素Logistic回归分析结果示BMI<18.5 kg/m²是PPOI发生的独立危险因素。结论 BMI是PPOI的独立危险因素,当BMI<18.5 kg/m²,发生术后延迟性肠麻痹的危险性增加。     

N-乙酰半胱氨酸对小鼠肝部分缺血/再灌注后肝肺损伤的保护作用

目的 研究抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对肝脏部分缺血/再灌注（I/R）后肝、肺损伤的保护作用及对Toll样受体2/4（TLR2/4）表达的影响。方法 以BALB/c小鼠复制肝脏部分I/R损伤模型,将小鼠随机分为假手术组、I/R组和NAC干预组（NAC组）,每组10只。于再灌注后1h和3h取门静脉血测定血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度,取眼动脉血测定血浆丙氨酸转氨酶（ALT）水平;同时取受损肝、肺组织行逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质免疫印迹法（Western blotting）观察TLR2/4表达的变化。结果I/R后受损肝叶和肺组织内出现TLR2/4 mRNA和蛋白的高表达,NAC干预可抑制其表达水平（P〈0.05或P〈0.01）。I/R损伤后血中TNF-α和ALT水平均较假手术组明显升高;NAC干预后各时间点TNF-α和ALT均较I/R组明显下降（P〈0.05或P〈0.01）。结论 小鼠肝部分I/R后,TLR2/4不仅在受损肝组织内有表达,在远隔器官肺内也有表达。NAC可通过调整氧化还原状态,抑制再灌注后TLR2/4的活化和细胞因子TNF-α的表达,从而减轻肝、肺组织的损伤。     

Notch1在人乳腺癌细胞中的表达及其与乳腺癌耐药的关系

目的 检测乳腺癌细胞株MCF-7与MCF-7/ADR的 Notch1 表达、成球能力、干细胞池比例及干细胞内Notch1的表达,探讨Notch1 在逆转乳腺癌化疗耐药中的意义.方法 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot 法检测乳腺癌细胞株MCF-7、MCF-7/ADR 及表型为ALDH1+/CD44+/CD24- 乳腺癌干细胞中Notch1 的表达;无血清培养检测MCF-7及MCF-7/ADR 的成球能力;流式细胞仪检测MCF-7与MCF-7/ADR的干细胞比例并分选干细胞.结果 MCF-7/ADR的Notch1 的表达明显高于MCF-7(0.0748±0.0043比0.0461±0.0022,P＜0.05),微球体形成能力也明显高于MCF-7 (P＜0.05);流式细胞仪检测干细胞比例,MCF-7/ADR高于MCF-7(11.40％比1.89％);分选出的干细胞Notch1 的表达明显高于非干细胞(0.3096±0.0324比0.0428±0.0061,P ＜0.05).结论 Notch1 在乳腺癌及乳腺癌干细胞中高表达,干预Notch1 可能可以逆转乳腺癌治疗的耐药.     

微弧氧化钛片与大鼠牙髓干细胞的生物相容性及成骨诱导研究

目的：观察大鼠牙髓干细胞（dental pulp stem cells,DPSCs）在微弧氧化（micro-arc oxidation,MAO）钛片表面粘附和分化情况,初步评价MAO钛片对DPSCs的成骨诱导性能。方法：实验组：DPSCs与MAO钛片共培养,阳性对照组：DPSCs成骨诱导培养,空白对照组：DPSCs无诱导普通培养。扫描电镜（SEM）观察DPSCs在MAO钛片表面粘附情况,碱性磷酸酶（ALP）活力检测,实时定量PCR分析Runx2、Osterix、DSPP和DMP-1基因表达和钙结节茜素红染色,鉴定DPSCs的成骨能力。结果：SEM观察MAO钛片表面粗糙多孔,DPSCs在MAO钛片表面粘附紧密,有触角向微孔内伸展。ALP活力检测和钙结节染色,实验组与阳性对照组无显著差异（P〉0.05）,与空白对照组有显著差异（P〈0.05）。实验组Runx2、Osterix表达增强,DSPP和DMP-1表达无明显变化。结论：粗糙多孔的MAO钛片与DPSCs有良好的生物相容性,DPSCs在MAO钛片表面粘附紧密,具有向成骨细胞系分化的能力。     

一氧化氮对急性出血坏死性胰腺炎肺组织Toll样受体2/4 mRNA表达的影响

目的研究一氧化氮(NO)对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)肺组织Toll样受体(TLR)2/4表达的影响。方法采用逆行胰胆管牛磺胆酸钠注射制造AHNP大鼠模型,动物分为假手术组、胰腺炎组和L精氨酸(LArg)治疗组。RTPCR方法检测肺组织TLR2和TLR4mRNA表达变化。结果与假手术组比较,胰腺炎组大鼠从3h时肺组织TLR2/4mRNA表达开始增高,在12h时肺组织TLR2/4mRNA表达达到峰值;同时肺损伤加重,肺组织TNFα浓度升高,NO浓度逐渐降低(P<0.05)。给予LArg治疗后,NO浓度明显升高,TLR2/4mRNA表达降低,肺损伤程度减轻,肺组织TNFα浓度降低(P<0.05)。结论急性出血坏死性胰腺炎时,肺组织内TLR2和TLR4mRNA表达上调,肺组织损伤加重。NO可以明显抑制AHNP肺组织TLR2/4mRNA的表达,从而减轻肺损伤。     

小鼠内毒素肝损伤中TLR4及SOCS1/3 mRNA的表达变化

脂多糖(LPS)信号的转导在炎症反应过程中起重要作用.近年来发现Toll样受体4(TLR4)是LPS识别与信号转导过程中的重要受体[1].细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)可抑制多种信号通路,可能发挥负性调控作用[2].我们通过观察野生型小鼠(C3h/Heouj)内毒素肝损伤中TLR4及SOCS1/3 mRNA表达变化,并以TLR4缺损小鼠(C3h/Hej)为对照,探讨LPS肝损伤的信号通路及调控机制.     

2007～2008年甘肃省白银市行政事业单位女职工妇科疾病调查

目的了解白银市行政事业单位女职工妇科疾病的发病情况。方法根据2007～2008年50个行政事业单位女职工3年内第一次健康体检结果进行统计分析。结果 2 734例女职工患1种以上妇科疾病人数1 050例,患病率为38.41%,慢性宫颈炎患病率为30.21%,乳腺增生患病率为9.22%,疾病伴生情况明显。结论 31～50岁年龄段女性妇科疾病患病率高于其他年龄段,地方党政机关、事业单位女性妇科疾病患病率高于其他单位,县级单位女职工慢性宫颈炎、乳腺增生患病率高于市级单位女职工。     

乳腺癌干细胞放疗反应性和耐受机制的研究

Objective To discuss the response of breast cancer stem cells to radiation and its resistant mechanism. Methods Single breast cancer stem cells were isolated from the human breast adenocarcinoma cell line, MCF-7, and suspension-cultured into mammary cell microspheres in vitro. The radiosensitivity of these breast cancer stem cells were evaluated using a colony formation assay. Real-time polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the expression levels of the following genes before and after radiation in the breast cancer stem cells, along with non-stem cells of the breast cancer cell line: ATM, p53, Her-2, Ku70/Ku80 and Survivin. Results The average survival fraction (SF2) of the suspensioncultured MCF-7 cells after 2 Gy of radiation was 0. 49, while the average SF2 of MCF-7 cells cultured as a monolayer was 0. 27 (P<0.01). Compared to the MCF-7 cells grown in a monolayer, the suspension-cultured MCF-7 cells had higher expression levels of ATM, p53, Her-2, Ku70/Ku80 and Survivin; The expression of ATM, p53, Her-2, Ku70/Ku80 and Survivin was 5. 29±1. 36,1. 37±0. 73,2.10±0. 57,4. 69±1. 45,and 1. 80±1.29 fold, respectively. Conclusion Breast cancer stem cells have stronger anti-radiation capabilities than breast cancer non-stem cells. The stronger DNA repair capacity is an important resistant mechanism about radiotherapy of breast cancer stem cells.