自噬抑制剂3-MA抑制EV71病毒颗粒的产生与释放

目的 通过研究肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)感染引起细胞的自噬及抑制自噬对病毒滴度的影响,为进一步明确EV71的致病机制提供基础.方法 利用Western Blot检测EV71感染后RD-A细胞内源性LC3的型别转换和P62的降解来指示细胞发生自噬的水平,通过测定染毒细胞培养上清中EV71病毒CCID50来观察抑制自噬后细胞释放EV71感染性病毒颗粒的变化.结果 EV71的感染促进了细胞LC3的型别转换和F62的降解,诱导了细胞发生自噬;3-MA抑制细胞自噬后,EV71染毒细胞产生的感染性EV71病毒颗粒数量减少.结论 EV71可以诱导细胞发生自噬,细胞自噬可能促进EV71感染性病毒颗粒的产生和释放.

Abstract：

Objective To determine whether or not enterovirus 71 ( enteroviurs 71, EV71) may induce autophagy and affect the production and release of EV71 after the treatment of autophagy inhibitor. Methods Western blots were performed to examine the conversion of LC3- Ⅰ to LC3-Ⅱ and the degradation of P62 after the RD-A cells were infected with EV71. CCID50 was determined by checking the virus titer in the supernatant of cells that treated with autophagy inhibitor 3-MA. Results EV71 infection enhances the type conversion of LC3 and degradation of P62. The infectious virus particles were decreased after the treatment of 3-MA. Conclusion EV71 infection could induce cell autophagy and the autophagy might contribute to the production and release of infectious EV71 particles.     

狼疮肾炎患者血清胱抑素C、同型半胱氨酸联合检测分析

目的分析系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者同型半胱氨酸（HCY）、胱抑素C（Cys-C）的变化与狼疮肾炎（lupus nephritis,LN）的关系。方法测定50例健康者和72例系统性红斑狼疮患者的血清Cls-C、HCY和肌酐（Creatinine,Cr）含量,以Cockroft Gault公式计算肾小球滤过率（Glomerulus Filtration Rate,GFR）,并进行比较分析。结果 LN组Cys-C、HCY、GRF、Cr等指标均明显高于健康组（P〈0.05）。LN组Cys-C、HCY与GFR呈正相关,相关系数分别为0.904、0.883,P〈0.01。结论 Cys-C、HCY的联合检测可作为狼疮肾炎早期诊断的有效指标,对狼疮肾炎的发展及预后具有重要的临床意义。     

如何提高课堂教学效果的几点体会

实现高质量、高效率的教学是对现代教育的要求,而提高课堂教学效果是提高教学质量的关键。本文将课堂教学分为课前准备、实施课堂教学及课后总结三个部分,并按这一顺序对如何提高课堂教学效果进行了讨论,同时做了举例说明。笔者通过3a的实践,在教学工作中收到了一些成效,受到了同学的欢迎和好评。     

改变教学形式提高医学生的学习效果

学生的学习效果好与坏是衡量教学成功与否的关键。本文就如何运用各种教学形式来提高医学生的学习效果进行了探讨，列举了一些形式，并倡导教育工作者共同致力于教学改革，为提高学生的学习效果而努力。     

氯喹对正常胃上皮细胞GES-1 和胃癌细胞HGC-27 凋亡的不同影响

目的:比较氯喹对正常胃上皮细胞GES鄄1 和胃癌细胞HGC鄄27 凋亡的不同影响。方法:使用倒置显微镜观察 CQ 处理后这两种细胞形态学变化;采用DAPI 核染色检测CQ 对HGC-27 细胞凋亡的作用;运用氯喹和雷帕霉素作用这两种 细胞72 h 后,用CCK-8 检测这两种药物对两种细胞的增殖活性;JC-1 检测氯喹处理后细胞线粒体膜电位的变化;用免疫印迹 法检测凋亡效应酶Caspase-3 和底物PARP 的改变。结果:10 滋mol/ L 的CQ 作用于GES鄄1 细胞和HGC鄄27 细胞72 h 后,在镜下 可见,氯喹对GES-1 细胞的形态无明显影响,却能使HGC-27 细胞间隙增宽,悬浮细胞数目逐渐增多,细胞密度明显减少,细胞 逐渐萎缩变圆,胞质减少,失去正常细胞形态;通过DAPI 核染色发现,氯喹作用两种细胞72 h 后,GES-1 细胞核浅染、核大小 形态均未发生变化,HGC-27 细胞核呈浓缩致密的固缩形态或颗粒状荧光;CQ 和RAP 作用于正常胃上皮细胞和胃癌细胞 HGC-27 72 h 后,CCK-8 结果显示相对于正常胃上皮GES鄄1 细胞而言,氯喹能抑制胃癌HGC鄄27 细胞的增殖活性;JC-1 结果显 示氯喹作用于HGC鄄27 细胞后发生了红色荧光向绿色荧光的转变;Western blot 显示胃癌细胞HGC-27 的凋亡蛋白Caspase-3 和PARP 表达显著减少。结论:相比正常胃上皮细胞GES-1,CQ 可以明显抑制人胃癌细胞HGC-27 细胞活力并诱导凋亡。     

通冠胶囊在治疗高脂血症的临床观察

目的探讨通冠胶囊治疗高脂血症的临床疗效。方法将高脂血症患者94例随机分成2组,治疗组50例,采用通冠胶囊治疗,对照组44例,采用辛伐他汀治疗,观察TC、TG、LDL-C、HDL-C、ApoA、ApoB和ALT、GGT及AST的水平变化。结果 2组治疗后TC、TG、LDC均明显下降（P〈0.05）,治疗组经通冠胶囊治疗后ApoA、HDL-C水平较前明显升高（P〈0.05）,ALT、GGT及AST水平明显下降（P〈0.05）。对照组经辛伐他汀治疗后ApoA、HDL-C、ALT、GGT及AST水平无明显变化。2组治疗后的ALT、GGT及AST水平相比较差异显著（P〈0.05）。结论通冠胶囊在治疗高脂血症过程中有一定的降低血脂作用,在降低血脂的同时对肝脏有一定的保护作用。     

类风湿性关节炎患者血清中IL-37水平变化的探索研究

目的 通过检测类风湿性关节炎（RA）患者血清及外周血单个核细胞中IL-37、TGF-β、IFN-γ、TNG-α和IL-1等细胞因子的水平及mRNA表达,探讨IL-37与类风湿性关节炎（RA）的相关性及作用机制。方法 收集类风湿性关节炎患者及正常对照组外周血及血清,通过酶联免疫吸附试验（ELISA）及实时定量荧光（real-time）PCR的方法,检测30例RA患者（RA疾病标准评分≥6）治疗前后及20例健康对照组血清中细胞因子水平及mRNA表达,并探讨其抑制机制。通过统计学方法分析IL-37与类风湿性关节炎的相关性。结果 ①治疗前后RA患者组血清IL-37水平明显高于健康对照组,差别有统计学意义（P〈0.05）。②RA患者血清中炎症因子IFN-γ、TNG-α、IL-1明显高于正常组,IL-37与炎症因子共同参与了类风湿关节炎的发生。③RA患者血清中IL-37与疾病严重程度呈正相关（治疗前r=0.854,P〈0.05,治疗后r=0.563,P〈0.05）。结论 IL-37作为一种基础的免疫抑制因子,通过其负反馈调节机制抑制炎症因子。当代偿产生的IL-37不能维持免疫平衡时,炎症因子的过度表达造成了RA患者机体损伤。通过实验证实IL-37与RA的发病及病程进展存在一定关系,为类风湿性关节炎的治疗提供新的依据。