寡核苷酸探针RNA原位杂交法检测肺孢子虫的研究

目的探讨RNA原位杂交法在肺孢子虫病理检测中的应用。方法采用小亚单位RNA位点来源的寡核苷酸探针、地高辛加尾标记、Wistar雌性大鼠皮下注射地塞米松建立肺孢子虫肺炎动物模型,取肺组织制备石蜡标本进行RNA原位杂交,并将结果与瑞氏-吉姆萨染色法进行比较。结果 RNA原位杂交法于感染后第3周检到虫体,呈游离分布;7～8周时检测到大量包囊;9～10周时滋养体大量出现;组织内肺孢子虫的检出率(32/32)高于瑞氏-吉姆萨染色法(25/32)。结论 RNA原位杂交法是一种敏感特异的肺孢子虫病理检测方法。     

卡氏肺孢子虫扫描电镜观察

目的观察卡氏肺孢子虫表面结构。方法通过皮下注射地塞米松建立大鼠卡氏肺孢子虫肺炎动物模型。处死卡氏肺孢子虫阳性大鼠,取肺脏磨成匀浆,通过Percoll密度梯度离心分离提取虫体,使用扫描电子显微镜观察。结果在扫描电镜下观察到表面光滑和粗糙两种状态的卡氏肺孢子虫。表面粗糙型虫体可见微绒毛,粗细不等的管状结构及大小不等的颗粒,并观察到体壁凹陷、伪足及脱囊虫体。结论扫描电镜观察卡氏肺孢子虫呈多态性,可见虫体脱囊、伪足及体壁孔。     

寡核苷酸探针RNA原位杂交法检测肺孢子虫的研究

目的探讨RNA原位杂交法在肺孢子虫病理检测中的应用。方法采用小亚单位RNA位点来源的寡核苷酸探针、地高辛加尾标记、Wistar雌性大鼠皮下注射地塞米松建立肺孢子虫肺炎动物模型,取肺组织制备石蜡标本进行RNA原位杂交,并将结果与瑞氏-吉姆萨染色法进行比较。结果 RNA原位杂交法于感染后第3周检到虫体,呈游离分布;7～8周时检测到大量包囊;9～10周时滋养体大量出现;组织内肺孢子虫的检出率（32/32）高于瑞氏-吉姆萨染色法（25/32）。结论 RNA原位杂交法是一种敏感特异的肺孢子虫病理检测方法。     

人体寄生虫学教学多媒体课件的制作和应用

人体寄生虫学是基础医学和预防医学领域的一门重要专业课，形态学内容占有一定比例。由于寄生虫的生活史时间跨度大，生活环境复杂，导致宿主的病变千变万化。过去教师上课常用的挂图、投影片存在字小、图小或亮度不够且无动态变化等弊端，给教师的讲解和学生的学习均带来一定的影响。将幻灯片、投影片、录像带及显微电视等多种手段用于教学，     

青岛地区哺乳动物隐孢子虫感染调查

目的 了解青岛地区哺乳动物隐孢子虫感染状况及最佳检测方法.方法 收集青岛地区某些县(市)的猪、狗、猫及青岛大学医学院寄生虫学教研室实验用小鼠、大鼠、兔粪便388份,分别应用改良抗酸染色、金胺-酚染色、金胺-酚串联改良抗酸染色法检测隐孢子虫,并在生理盐水、饱和盐水及碘液中对隐孢子虫卵囊进行形态学观察.用腹泻儿童粪便中分离隐孢子虫卵囊感染2只幼犬,对其进行病原学和病理学观察.结果 哺乳动物隐孢子虫检出率为15.98%(62/388),其中家养动物猪、狗和猫隐孢子虫检出率分别为4.71%(8/170)、22.22%(10/45)和0(0/15),实验动物小鼠、大鼠和兔隐孢子虫检出率分别为31.03%(9/29)、40.00%(24/60)和15.94%(11/69).实验动物隐孢子虫检出率(27.85%)明显高于家养动物(7.86%)(χ2=27.965,P<0.01).人隐孢子虫卵囊感染幼犬后产生明显腹泻症状,粪便中查到隐孢子虫卵囊,大小形态与人株相似,肠壁病变明显.结论 在青岛地区哺乳动物中查出隐孢子虫感染,金胺-酚串联改良抗酸染色法效果最好.对甲醛液保存时间较长的粪便标本,金胺-酚染色法染色后,用体积分数0.03盐酸-乙醇脱色5 min,再用改良抗酸法染色,可提高卵囊检出率.隐孢子虫人株对狗无宿主特异性,并且具有明显致病性.     

卡氏肺孢子虫感染动物模型建立与电镜观察

（1）目的 观察卡氏肺孢子虫及病变肺组织超微结构,探讨卡氏肺孢子虫的可能致病机制。（2）方法 肌注地塞米松诱发大鼠卡氏肺孢子虫肺炎,取其肺组织,按常规方法进行透射电镜观察。（3）结果 电镜下第22-28天即可观察到卡氏肺孢子虫的感染,以包囊为主;第43-56天达重度感染,以滋养体为主,肺泡腔内多见,肺间质中少见,中性粒细胞、肺泡巨噬细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞内也可见到。（4）结论 大滋养体伸出丝状伪足与Ⅰ,Ⅱ型肺泡上皮细胞粘连使上皮细胞发生变化。Ⅱ型上皮细胞发生凋亡。     

恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白1C末端片段在毕赤酵母表达系统的高效表达与纯化(英文)

目的利用毕赤酵母表达系统高效表达并获得纯度较为理想的恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白1 C末端片段(MSP-119)重组蛋白。方法将带有6-his基因的MSP-119基因序列插入毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9k中,用高压电穿孔转化法将目的基因转化入酵母感受态细胞GS115,筛选出高拷贝转化子,优化表达条件,利用甲醇进行诱导表达。表达产物用SDS-PAGE和免疫印迹进行检测。结果毕赤酵母分泌表达MSP-119蛋白,免疫印迹结果表明MSP-119基因表达蛋白能被抗MSP-119的单抗所识别,出现特异条带,将培养上清利用Ni-NTA柱纯化后,推算MSP-119蛋白的表达量为1.0g/L。结论酵母细胞表达系统可高效表达可免疫识别的MSP-119重组蛋白。     

医学寄生虫学教学方法新探

寄生虫学属于病原生物学范畴，它是研究与人类健康有关的寄生虫的形态结构、发生及发展规律、致病或传病机制、诊断及防治对策的科学。是临床医学尤其是预防医学的重要基础课程。寄生虫学作为一门桥梁学科，要求学生前期各门课程都有良好的基础，同时它又涉及学生尚未接触的临床问题，学科知识的广度、深度和跨度都很大。加上分子生物学理论及技术的迅速发展，     

斑点酶联免疫吸附试验检测阴道毛滴虫抗体的研究

建立了一种快速检测阴道毛滴虫抗体的斑点酶联免疫吸附试验.用国产试剂及材料制备出诊断膜,直接浸入阴道分泌物中反应,在3h内不需任何仪器,凭肉眼就能判读结果.用该法检测了55例经湿片法检查原虫阳性者标本,其抗体阳性率为92.7%(51/55).提示斑点酶联免疫吸附试验是一种灵敏度高、重复性好、特异性强并易于推广的快速诊断阴道毛滴虫抗体的方法.