高迁移率族蛋白B1在血管性痴呆中的炎性作用机制及研究进展

血管性痴呆是老年人痴呆的第二大常见原因,仅次于阿尔茨海默病,并且与年龄有关。高迁移率族蛋白B1(HMGB1)作为重要的损伤相关分子模式(DAMPs)的成分,不仅能启动早期的炎症反应,同时在晚期能促进炎症介质的释放,引起神经元的损伤,造成脑组织损伤。但同时也发现HMGB1具有促进脑血管修复的作用。     

BDNF 和 TERT 联合转染 BMSCs 对血管性痴呆大鼠学习记忆功能恢复及海马 CA1 区超微结构的影响

目的：研究脑源性神经营养因子（BDNF）和端粒酶逆转录酶（TERT）联合转染的骨髓基质干细胞（BMSCs）对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆功能恢复的作用,进一步探讨VD的有效治疗途径。方法：经大鼠股骨分离并鉴定BMSCs,构建pLXSN—TERT重组子后转化至BMSCs,软琼脂克隆形成实验检测体外培养的TERT—BMSCs的成瘤性。应用Ad5一BDNF转染TERT—BMSCs,构建BDNF—TERT联合转染的BMSCs。将40只雄性Wistar大鼠随机分为4组：对照组、VD组、BMSCs组、BDNF—TERT—BMSCs组。采用两血管阻断法制备VD模型。采用Morns水迷宫测试方法测试各组大鼠空间学习记忆力。应用RT—PCR和Westemblot方法分别检测各组大鼠海马CA1区BDNF、TrkB、SYN基因mRNA和蛋白表达情况,应用透射电镜观察各组大鼠海马CAl区超微结构变化。结果：行为学实验Mo州s水迷宫测试结果及超微病理透射电镜观察均显示BMSCs和BDNF—TERT—BMSCs对血管性痴呆大鼠有改善作用,且BDNF—TERT—BMSCs较BMSCs的作用更为显著。荧光实时定量RT—PCR和Westernblot结果显示,BMSCs组和BDNF—TERT—BMSCs组中BDNF、TrkB、SYNmRNA及蛋白表达水平均较痴呆模型组增高（P〈0．05）,且BDNF—TERT—BMSCs组较BMSCs组增加更为显著,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：BDNF—TERT联合转染BMSCs较普通的BMSCs对VD有更好的治疗效果,可明显改善VD大鼠的学习记忆功能的恢复。     

老年人淋巴细胞亚群和脂筏GM1与胆固醇水平的相关性

目的研究老年人淋巴细胞亚群、脂筏标志分子单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)和细胞活化与血清胆固醇水平的相关性,探讨高胆固醇水平调节淋巴细胞功能的分子机制以及与动脉粥样硬化的关系。方法样本采用在时间上随机抽样的方法选取2012年8月至2014年9月在天津医科大学总医院体检者60例,年龄60~80岁,其中女30例,男30例。采用抗体染色、流式细胞仪检测外周血中总B淋巴细胞(CD19+)、记忆B淋巴细胞(CD19+CD27+)、初始B淋巴细胞(CD19+CD27-)、总T淋巴细胞(CD3+)、CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞亚群比例以及神经节苷脂GM1水平;采用细胞内染色方法检测活化细胞内磷酸化Stat3的水平,并与胆固醇水平和动脉粥样硬化的发生进行相关性分析。结果 CD19+B淋巴细胞比例与低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平、CD19+CD27+B淋巴细胞比例与极低密度脂蛋白胆固醇(VLDLC)水平呈显著正相关(P0.05);CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞比例与胆固醇水平无相关性(P0.05);记忆B淋巴细胞GM1水平与总胆固醇(TC)和VLDLC、CD3+CD8+T淋巴细胞GM1水平与高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)均呈显著正相关(P0.05)。与正常胆固醇组比较,在BCR抗体刺激后,高胆固醇组记忆B淋巴细胞中磷酸化Stat3水平显著升高(P0.01)。结论高胆固醇水平是老年人动脉粥样硬化发生的重要危险因素,同时高胆固醇水平与B淋巴细胞比例、脂筏GM1水平、Stat3的活化以及CD3+CD8+T淋巴细胞GM1水平的相关性,提示其可能调节淋巴细胞增殖、活化、炎症因子的产生,从而促进动脉粥样硬化的发生和发展。     

细胞胆固醇外流率的测定以及细胞外胆固醇和脂多糖对其的抑制作用

BACKGROUND: Cholesterol is closely linked to the occurrence and progression of atherosclerosis. Current approaches to study cellular cholesterol dynamics have their own limitations. OBJECTIVE: To measure the cholesterol efflux rate of RAW 264.7 mouse macrophages by BODIPY-Cholesterol labeling and to explore the effects of extracellular cholesterol and lipopolysaccharide on the cholesterol efflux rate. METHODS: RAW 264.7 cells were cultured in vitro with DMEM containing 10% fetal bovine serum, and labeled with BODIPY-Cholesterol for 1, 2, 4, 8 hours. Then, the cells were rinsed with serum-free DMEM and inoculated for 6, 12, 24, 48, 96 hours to optimize the labeling time and incubation time. We measured and compared the cholesterol efflux rates after cultured cells were treated with cholesterol, lipopolysaccharide, human sera with high cholesterol or human sera with normal cholesterol. RESULTS AND CONCLUSION: The best labeling time for BODIPY-Cholesterol was 2-8 hours. Cholesterol efflux rates were gradually decreased after the cells that were labeled for 2 hours were incubated with increasing concentrations of cholesterol (0.1, 0.5, 2.5 mmol/L, P < 0.01). Treating cells with lipopolysaccharide also decreased the cholesterol efflux rate (P < 0.05). Furthermore, the cholesterol efflux rate was decreased after cells were treated with human sera with high cholesterol (P < 0.05). These findings indicate that BODIPY-Cholesterol can be used to measure cellular cholesterol efflux rate and to study the effects of extracellular cholesterol and lipopolysaccharide on the cholesterol efflux rate.      

TERT 基因转染的 BMSCs 对血管性痴呆大鼠认知功能影响的分子机制研究

目的：研究端粒酶逆转录酶（TERT）基因转染的骨髓基质干细胞（BMSCs）对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆功能的恢复及其对海马CA1区突触可塑性影响的分子机制。方法经大鼠股骨及胫骨分离并鉴定BMSCs,构建反转录病毒pLXSN-TERT重组子并转染BMSCs,软琼脂克隆形成实验检测体外培养的TERT-BMSCs的成瘤性。将36只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、痴呆模型组、BMSCs组和TERT-BMSCs组。采用双侧颈总动脉永久性结扎方法制作VD大鼠模型,Morris水迷宫测试法检测各组学习记忆能力,透射电镜观察海马CA1区超微结构变化;免疫组织化学方法观察海马CA1区BDNF、NMDAR1、SYN蛋白表达。结果 Morris水迷宫测试及透射电镜观察均显示,BMSCs组、TERT-BMSCs组较痴呆模型组学习记忆能力、海马CA1区超微结构明显改善（P均＜0．05）,且TERT-BMSCs组比BMSCs组改善更为明显（P均＜0．05）。 BMSCs组、TERT-BMSCs组BDNF、NMDAR1、SYN蛋白阳性细胞着色的平均灰度值比痴呆模型组增高（P均＜0．05）,且TERT-BMSCs组比BMSCs组增高更为显著（P均＜0．05）。结论 TERT基因转染的BMSCs比普通BM-SCs对VD的康复治疗作用更为显著,其分子机制可能与增加大鼠海马CA1区BDNF、NMDAR1和SYN的表达,影响了突触可塑性有关。     

四方区公共场所禁烟现状调查分析

为进一步贯彻《青岛市市区公共场所禁止吸烟规定》,于1996年底随机抽取四方区城区要求禁止吸烟的部分公共场所单位进行现状调查,结果报告如下:1 调查对象与方法抽调预先经过培训的卫生监督员,在事先不通知的情况下,采取现场观察与询问相结合的方法,对辖区内要求禁止吸烟的公共场所进行调查.2 结果与分析调查252个单位(车辆),违反禁烟规定的94个,占37.30%.其中机关、企事业单位98个,违反的32个;小公共汽车103辆,违反的58辆;大公共汽车51辆,违反的4辆.违反禁烟规定的94个单位(车辆)中,64个无禁烟标志,20个单位和63辆小公共汽车车厢内发现烟头,8个单位无禁烟措施,对吸烟者不劝阻,近半数的小公共汽车驾驶室有烟灰盒,2个单位会议室设有烟灰缸.