FQ-PCR溶解曲线技术分析白血病患者PBMC中T细胞TCR仪／βCDR3谱系特征

目的采用FQ-PCR溶解曲线技术分析临床白血病患者外周血单个核细胞（PBMC）中T细胞TRAV和TRBV基因各家族的CDR3谱系特征。方法提取4例健康志愿者和15例临床白血病患者PBMC中mRNA,逆转录成cDNA,FQ-PCR扩增32个TRAV基因和24个TRBV基因家族的CDR3区,FQ—PCR溶解曲线技术分析CDR3谱系特征,并测序分析单克隆家族CDR3区氨基酸序列的组成。结果4例健康志愿者PBMC中（α／βT细胞的CDR3谱系FQ-PCR溶解曲线峰型图,均表现为多峰图;而15例白血病患者PBMC中α／βT细胞CDR3谱系FQ—PCR溶解曲线峰型图,多数患者出现寡或偏峰型图、低或无峰型图、典型的单峰型图;不同白血病患者异常峰的频率不一致;单峰型图TRAV和TRBVPCR产物基因测序,未发现不同患者存在完全相同的CDR3区。结论FQ-PCR溶解曲线技术能很好的分析白血病患者PBMC中TCRα／βCDR3谱系的单、寡、多克隆性增殖;非T细胞白血病患者PBMC中TCRα／βCDR3的单峰（或寡峰）家族T细胞,可能来源于机体对肿瘤应答的T细胞,而在T细胞白血病患者,可能为肿瘤T细胞或机体抗肿瘤T细胞。本实验可为进一步研究白血病的免疫应答机制和个体化治疗提供基础。     

一例弥漫性大B淋巴细胞瘤组织样本T细胞TCR α/β CDR3谱序的初步分析

目的 FQ-PCR溶解曲线法初步分析1例弥漫性大B淋巴细胞瘤患者组织标本中T细胞TRAV和TRBV基因各家族CDR3谱序.方法 提取4例淋巴结增生组织和1例弥漫性大B淋巴细胞瘤患者的mRNA,逆转录成cDNA,FQ-PCR扩增32个TRAV基因和24个TRBV基因的CDR3区,利用FQ-PCR技术了解其克隆性,溶解曲线单峰家族基因测序分析CDR3区基因和氨基酸序列.结果 该例淋巴瘤患者淋巴结组织T细胞FQ-PCR溶解曲线分别在TRAV10、TRAV18和TRBV6、TRBV24家族中出现单峰表现,其CDR3区氨基酸序列为CAGANFGNEKLTFGTGTCR、CAPSFSGYSTLTFGKGTM、CASSERGQPQHFGDGTCR、CATTPAGEYYGYTFGSGTCR,4例增生淋巴结组织FQ-PCR溶解曲线均为寡峰和多峰.结论 该例淋巴瘤组织中FQ-PCR溶解曲线单峰家族的T细胞可能为高应答T细胞,本实验为进一步研究淋巴溜的免疫应答机制和个体化治疗提供了研究基础.     

白细胞介素2联合顺铂治疗恶性胸腔积液有效性及安全性的Meta分析

目的：系统评价白细胞介素2联合顺铂治疗恶性胸腔积液的有效性及安全性,为临床治疗策略提供依据。方法系统检索中国生物医学文献数据库（BM）、中国学术期刊网络出版总库（CNKI）、维普（VIP）、万方、ISI、Pubmed、Embase 及 Co-chrane library 临床试验注册数据库,采用 Cochrane 协作网 RCT 质量评价标准评价纳入研究质量,Meta 分析提取数据。结果（1）纳入34个 RCT,2037例恶性胸腔积液患者,纳入研究质量一般;（2）与单独使用顺铂比较,Meta 分析合并相对危险度（RR）值：ORR[RR＝1．45,95％CI （1．36～1．54）,P ＜0．01]及发热[RR ＝2．37,95％CI （1．53～3．66）,P ＜0．05]比较差异有统计学意义;白细胞减少症[RR＝0．81,95％CI （0．61～1．07）,P ＝0．14];骨髓抑制[RR ＝0．83,95％CI （0．62～1．11）,P ＝0．21]及胸痛[RR＝1．04,95％CI （0．84～1．29）,P ＝0．69]在两组间差异无统计学意义。结论本研究表明 IL-2联合顺铂能显著改善恶性胸腔积液患者近期疗效,但存发热等不良反应,纳入研究质量一般。