黄芩素对喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用

目的：探讨黄芩素对人喉癌Hep-2细胞的增殖抑制作用。方法：Hep-2细胞在含黄芩素（10~80μmol/L）的培养基中,分别培养24 h及48 h,用MTT法检测对细胞增殖的影响;用台盼兰染色法检测对细胞活力的影响;用吖啶橙染色法（AO染色法）检测对细胞形态的影响。结果：黄芩素呈时间-剂量依赖性的抑制Hep-2细胞的增殖,并可使细胞活力明显降低;AO染色法显示,黄芩素可诱导Hep-2细胞形态发生明显变化,呈凋亡形态。结论：黄芩素可抑制喉癌Hep-2细胞增殖,降低细胞活力,诱导喉癌Hep-2细胞呈典型的凋亡形态。     

姜黄素对喉癌Hep-2细胞增殖及Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的探索姜黄素对喉癌细胞增殖的作用以及对细胞Bcl-2和Bax基因表达的影响。方法 Hep-2细胞暴露于含姜黄素(3-25μM)的培养基中,分别培养24h及48h,用MTT法检测对细胞增殖的影响;用RT-PCR法检测Bcl-2和Bax的mRNA表达水平。结果 MTT显示,姜黄素使Hep-2细胞增殖明显降低,并呈时间-剂量依赖性;RT-PCR结果显示,姜黄素使Bcl-2的mRNA表达水平降低,而使Bax的mRNA表达水平升高,并呈剂量和时间依赖性。结论姜黄素对人喉癌Hep-2细胞增殖具有显著的抑制作用。其作用机制可能与其下调Bcl-2基因表达水平及上调Bax基因表达水平,从而诱导细胞凋亡有关。     

黄芩素通过线粒体凋亡途径诱导体外培养喉癌细胞凋亡的机制

目的探索中药黄芩有效成分——黄芩素(BAI)通过线粒体凋亡途径诱导体外培养喉癌细胞凋亡的分子机制。方法体外培养的人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞,暴露于浓度递增的BAI培养液中,分别培养24、48 h,流式细胞术(FCM)检测诱导细胞凋亡作用;分光光度法检测对半胱天冬酶(caspase)-3及caspase-9的激活作用;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测对Bcl-2、Bax mRNA表达的影响;Western印迹检测对酶原蛋白(procaspase)-9、caspase-9,procaspase-3、caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。结果 BAI可诱导细胞凋亡,凋亡率增加;分光光度法表明BAI可以激活caspase-3、caspase-9活性;BAI可下调Bcl-2 mRNA表达,上调Bax mRNA表达;印迹BAI可上调Bax、caspase-9、caspase-3蛋白表达,下调Bcl-2、procaspase-9、procaspase-3蛋白表达,差异有统计学意义(P0.05)。结论 BAI通过上调Bax在mRNA和蛋白水平的表达,下调Bcl-2在mRNA和蛋白水平的表达及Bcl-2/Bax比,促进Bax在线粒体外膜处聚集成簇,降低线粒体跨膜电位,促进细胞色素(Cyt)C释放到胞质,进而与激活的caspase-9及Apaf-1形成凋亡小体,从而激活caspase-3及后续线粒体凋亡途径,诱导喉癌Hep-2细胞凋亡。     

FTY720对体外培养MCF-7细胞增殖及凋亡影响的研究

目的探讨FTY720对体外培养MCF-7细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养MCF-7细胞,将其培养液中加入不同浓度的FTY720,继续培养48小时,MTT法检测MCF-7细胞的增殖情况;瑞士-姬姆萨染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测FTY720对MCF-7细胞的细胞周期、凋亡率的影响。结果当FTY720浓度为6 400 ng/ml时,体外培养MCF-7细胞的增殖受到明显抑制,抑制率为62.0%（P〈0.05）,而且抑制率呈浓度依赖性;镜下可见细胞出现凋亡的形态;流式细胞仪检测分析显示FTY720可将MCF-7细胞阻滞于G1期,并促进其发生凋亡,凋亡率呈浓度依赖性。结论在体外培养的MCF-7细胞培养液中加入一定浓度的FTY720,能明显抑制该细胞的增殖,调节该细胞周期并诱导其凋亡。     

刍议模块教学模式下的生物化学案例教学

针对临床医学专业的基础课程生物化学进行教学模式及教学方法的探索。对生物化学理论及实验教学内容划分为基础理论模块、临床应用模块和技能模块三大模块,针对临床应用模块和技能模块结合临床案例采用＂案例教学法＂。通过对临床医学专业学生的教学成果评价显示,能显著提高学生的学习热情及教学效果。     

吲哚美辛对喉癌细胞Hep-2增殖与凋亡及COX-2蛋白表达的影响

目的探索吲哚美辛对喉癌细胞增殖与凋亡的作用以及对细胞COX-2蛋白表达的影响。方法Hep-2细胞暴露于含吲哚美辛（125，250，500μM）的培养基中，培养24小时，用MTT方法检测各组药物与溶剂对照组相比对细胞增殖的影响；用台盼蓝染色法检测吲哚美辛对细胞活力的影响；吖啶橙染色法观察吲哚美辛（250μM）对细胞形态的影响；流式细胞仪分析法检测吲哚美辛（250μM）对细胞周期和细胞凋亡的影响，Western blot检测吲哚美辛对细胞COX-2蛋白表达的影响。结果吲哚美辛使Hep-2细胞增殖及细胞活力明显降低，细胞形态发生明显变化，细胞质萎缩而细胞核相对较大，S期细胞分数明显增加，细胞出现凋亡峰，而COX-2蛋白表达量增加。结论吲哚美辛强烈抑制Hep-2细胞增殖与细胞活力，明显改变细胞初始形态，阻滞细胞从S期向G2／M期转化，并诱导其凋亡，吲哚美辛对Hep-2细胞的上述作用机制与COX-2的特异性抑制途径无关。     

黄芩素抗肿瘤作用机制的研究进展

黄芩素是传统中药黄芩的主要有效成分,近年来国内外研究表明,黄芩素可抑制多种肿瘤细胞增殖,特异性地诱导肿瘤细胞凋亡,阻滞肿瘤细胞周期,抑制端粒酶活性及肿瘤血管生成、侵袭、转移等。本研究对黄芩素的抗肿瘤研究现状及以上几方面的作用机制进行综述,为其在抗肿瘤方面的临床应用提供理论基础。     

吲哚美辛对喉癌Hep-2细胞增殖与iNOS活性的影响

目的：探讨吲哚美辛对喉癌细胞增殖与诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性的影响,为喉癌的预防和治疗提供理论依据。方法： Hep-2细胞培养于含吲哚美辛（30、60、125和250 μmol•L^-1）的培养基中,分别培养24 h和48 h;用MTT方法检测吲哚美辛组细胞增殖的抑制率,用台盼蓝染色法检测吲哚美辛组细胞活力的抑制作用,并与溶剂对照组进行比较;吲哚美辛（125、250和500 μmol•L^-1）与脂多糖（LPS,10 μmol•L^-1）同时处理细胞16　h,同时设只加LPS对照组,采用酶法和分光光度法检测细胞培养上清液中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的活性。结果：与对照组比较,不同浓度的吲哚美辛（30、60、125和250 μmol•L^-1）组Hep-2细胞增殖的抑制率均显著增加（P<0.05）。相同浓度的吲哚美辛,随作用时间延长,Hep-2细胞增殖的抑制率显著降低（P<0.05）;与对照组比较,不同浓度的吲 哚美辛（30、60、125和250 μmol•L^-1）随剂量增加,Hep-2细胞活力的抑制程度均显著增加（P<0.05）。相同浓度的吲哚美辛,随作用时间延长,Hep-2细胞活力的抑制程度显著降低（P<0.05）;与LPS对照组比较,吲哚美辛在125、250及500 μmol•L^-1浓度时, LPS诱导的细胞培养上清液中iNOS的活性显著降低（P<0.05）。结论：吲哚美辛在30～250 μmol•L^-1浓度范围内显著抑制Hep-2细胞的细胞增殖与细胞活力,明显降低LPS诱导的细胞 iNOS的活性升高。     

姜黄素对喉癌Hep-2细胞的诱导凋亡作用及细胞周期的影响

目的 探讨姜黄素对人喉癌Hep-2细胞的诱导凋亡作用及其对细胞形态及细胞周期各时相的影响.方法 Hep-2细胞暴露于含姜黄素(0～25 μmol/L)的培养基中,分别培养24 h及48 h,用吖啶橙染色法(AO染色法)检测对细胞形态的影响;用流式细胞术检测对细胞周期各时相及凋亡率的影响.结果 AO染色法显示,姜黄素可诱导Hep-2细胞形态发生明显变化,呈时间-剂量依赖性;FCM结果显示,姜黄素可使Hep-2细胞S期细胞数明显减少,并诱导细胞出现典型的凋亡峰,凋亡率呈时间-剂量依赖性.结论 姜黄素可诱导喉癌Hep-2细胞呈典型的凋亡形态,诱发凋亡峰,使Hep-2细胞阻滞在G2/M期.     

吗啡对C6神经胶质瘤细胞Glu和Gln含量及其代谢关键酶转录活性的影响

目的：研究吗啡对C6神经胶质瘤细胞谷氨酸(Glu)-谷氨酰胺（Gln）循环代谢产物含量及其相关酶基因转录的影响,探讨吗啡依赖与耐受的作用机制。 方法： 传代培养的C6神经胶质瘤细胞,随机分为4组：对照组( C组),吗啡组（M组）,纳洛酮加吗啡组（N+M组）和纳洛酮组（N组）,应用比色法测定C6神经胶质瘤细胞培养上清液中Glu及Gln的含量,应用半定量RT-PCR法测定C6神经胶质瘤细胞Glu-Gln 循环关键酶谷氨酰胺合成酶（GS)及谷氨酸脱氢酶（GDH) mRNA相对含量的变化。 结果： 与C组比较,M组细胞外Glu含量显著性增加(P<0.01)。与M组比较,N+M组细胞外Glu含量显著性降低(P<0.01);与C组比较,M组、N组以及N+M组细胞外Gln含量均降低,但差异无显著性(P>0.05)。与C组比较,M组、N组细胞GS mRNA转录活性均显著降低(P<0.01)。与M组比较,N+M组细胞GS mRNA转录活性显著升高(P<0.01);与C组比较,M组细胞GDH mRNA转录活性升高(P<0.05)。与M组比较,N+M组细胞GDH mRNA转录活性显著性升高（P<0.01）。 结论：吗啡可能通过对Glu-Gln 循环关键酶GS和GDH基因转录活性的影响调节细胞外Gln和Glu浓度,其机制可能与吗啡依赖等作用相关。