过氧化氢诱导大鼠主动脉内皮细胞氧化损伤模型的建立

目的采用过氧化氢(H2O2)诱导大鼠主动脉内皮细胞(SVAREC)氧化损伤,建立SVAREC氧化损伤模型。方法体外培养SVAREC细胞,绘制细胞生长曲线,用不同浓度的H2O2刺激细胞,并在不同时间点用MTS法测定细胞存活率,以确定SVAREC氧化损伤模型条件。倒置显微镜下观察细胞形态学变化,微孔酶标法测乳酸脱氢酶(LDH)活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,WB检测细胞中半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)的表达情况。结果与空白对照组细胞比较,当H2O2浓度为100μM,作用时间为2 h时,造成细胞损伤,其细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达量明显高于空白对照组。结论该实验条件下H2O2浓度为100μmol/L,作用时间为2 h是模型的最佳复制条件。