RNAi抑制HIF-1α基因逆转卵巢癌多药耐药的实验研究

目的 探讨靶向缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)载体表达的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)逆转卵巢癌细胞多药耐药的可行性.方法 构建靶向HIF-1α短发夹状siRNA 基因表达载体,脂质体介导转染人卵巢癌COC1/DDP细胞.Western blot法检测HIF-1α蛋白和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达;实时定量PCR(real time PCR)检测HIF-1α和多耐药基因1(mdr-1)mRNA的表达;MTT法检测COC1/DDP细胞对化疗药物顺铂的抗性.结果 转染HIF-1α短发夹状siRNA真核表达载体的COC1/DDP细胞,低氧条件下HIF-1α蛋白及mRNA表达水平下降,同时mdr-1基因的mRNA及其编码的P-gp蛋白水平也明显下降,对顺铂的药物敏感性增加.结论 HIF-1α短发夹状siRNA真核表达载体可有效地抑制卵巢癌COC1/DDP细胞HIF-1α和mdr-1基因的表达,逆转卵巢癌细胞的多药耐药.     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷调控RASSF1A基因表达对子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR）对人子宫内膜癌（Hu－man endometrial cancer,HEC）-1-B细胞增殖和凋亡的作用及其可能机制。方法：应用不同浓度的 5-Aza-CdR处理HEC-1-B细胞,甲基化特异 PCR（Methylation-specific polymerase chain reaction,MSP）法检测处理前后RAS相关域家族1A（RAS association domain family 1A,RASSF1A）基因甲基化状态,应用 RT-PCR方法检测 RASSF1A基因 mRNA表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：HEC-1-B细胞 RASSF1A基因启动子区呈高甲基化状态,经过 5-Aza-CdR处理后,RASSF1A基因启动子区呈去甲基化状态,其 mRNA重新表达,细胞生长受到抑制,细胞凋亡增加。结论：5-Aza-CdR能够逆转RASSF1A基因甲基化状态,调控RASSF1A基因表达,并能有效地抑制HEC-1-B细胞的增殖和诱导细胞调亡。     

曲古霉素A对人子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖和凋亡的作用及相关机制

【目的】探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(trichostatin A,TSA)对人子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖和凋亡的作用及其可能机制。【方法】应用不同浓度的TSA处理子宫内膜癌HEC-1B细胞72 h,Western blotting法检测细胞内组蛋白H4乙酰化水平及p21蛋白,荧光定量PCR方法检测p21基因mRNA表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率。【结果】经TSA作用后,人子宫内膜癌HEC-1B细胞内组蛋白H4乙酰化水平增加,p21基因mRNA及蛋白表达增加;同时细胞生长受到抑制,细胞凋亡增加。【结论】TSA通过提高组蛋白乙酰化水平,增加p21基因表达,抑制子宫内膜癌HEC-1B细胞的增殖和诱导细胞凋亡。     

下调microRNA-214表达对人卵巢癌SKOV-3细胞迁移及侵袭的影响

目的:探讨下调microRNA-214 (miR-214)表达对人卵巢癌SKOV-3细胞迁移和侵袭的作用及其可能机制.方法:采用脂质体介导法将miR-214抑制剂转染人卵巢癌SKOV-3细胞,Real-time PCR法检测miR-214、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和尿激酶型纤溶酶原激活剂(uridylyl phosphate adenosine,uPA)基因mRNA的表达,Western blotting法检测细胞NF-κB和uPA蛋白表达.划痕试验检测细胞迁移能力,Transwell小室法检测细胞侵袭能力.结果:经转染miR-214抑制剂后,人卵巢癌SKOV-3细胞miR-214表达降低,细胞迁移和侵袭能力降低.同时NF-κB和uPA mRNA和蛋白表达也降低.结论:下调人卵巢癌SKOV-3细胞miR-214表达可抑制细胞迁移和侵袭能力,下凋NF-κB和uPA基因表达可能是其作用机制.     

前置胎盘36例剖宫产手术体会

前置胎盘是严重威胁孕妇及胎儿生命的一种高危妊娠。国内报道发生率为0.83%～1.8%。其主要分娩方式为剖宫产,剖宫产率达70%～90%。为讨论前置胎盘剖宫产手术的特点。现将我科近10年因前置胎盘而行剖宫产手术36例报告如下。1 一般资料本组36例均为单胎,年龄24～37岁,平均27.4岁。初孕妇21例,第二胎9例,第3胎6例。有剖宫产手术史2例。36例术前均有阴道流血症状,术前血红蛋白低于90g/L     

宫外孕误诊1例报告

患者王某，女，29岁。于1991年10月23日17时劳累后，突然右下腹坠痛难忍。服止痛药后腹痛缓解。此后胸闷、心悸、气短、恶心呕吐、四肢厥冷、头昏眼花、口渴，烦躁。于1991年10月28日4时30分经门诊诊断心原性休克、心律失常，急性胃肠炎收入内科。即给以多巴胺、阿拉明升压，低分子右旋精辟扩容。经3h抗体党治疗无效。血压6．66／5．33kPa。急情外、妇科会诊。追问病史：阴道不规则流血1个月余，量时多时少。于27日晚突然腹痛，并放射至肛门。上述症状加重。查体：病人吴重症贫血貌，意识清楚、表情淡漠，血压6．66／5．33kPa，脉搏140／mi…     

子痫前期患者血清瘦素及可溶性瘦素受体水平变化及临床意义

目的:探讨子痫前期血清瘦素及可溶性瘦素受体水平与子痫前期发病之间的关系及其临床意义. 方法:40例子痫前期孕妇及43例正常妊娠孕妇,取术前及术后7 d外周静脉血,应用放射免疫法检测瘦素水平,应用ELISA法检测可溶性瘦素受体水平,并与子痫前期的血压值进行相关分析. 结果:子痫前期组和正常妊娠组术后瘦素水平均低于术前;子痫前期组术前瘦素水平高于正常妊娠组,可溶性瘦素受体水平低于正常妊娠组;子痫前期组术前瘦素水平与可溶性瘦素受体水平呈负相关,与收缩压和舒张压呈正相关;子痫前期组术前可溶性瘦素受体水平与收缩压和舒张压均呈负相关. 结论:子痫前期升高的瘦素可能来源于胎盘,并可能参与子痫前期的病理生理过程. 血清中瘦素及可溶性瘦素受体水平可作为反映疾病程度的临床指标.     

化疗对肝癌患者T淋巴细胞内IL-2、IFN-γ的影响

目的探讨化疗对肝癌患者T淋巴细胞内的白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)的影响.方法应用单克隆抗体和流式细胞术(FCM)分析31例肝癌患者化疗前后T淋巴细胞内IL-2、IFN-γ水平的变化.结果肝癌患者化疗后T淋巴细跑内IL-2和IFN-γ均较化疗前降低(P＜0.05);静脉化疗组与介入化疗组化疗前后T淋巴细胞内IL-2及IFN-γ改变差值均无显著性差异(P＞0.05);不同临床分期化疗前后IL-2及IFN-γ改变差值均无显著性差异(P＞0.05).结论化疗药物可通过降低T淋巴细胞内的IL-2、IFN-γ水平而影响细胞免疫功能,导致机体免疫功能降低.