慢性牙周炎龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白A的水平与牙周病变程度关系的研究

目的检测慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)患者龈下菌斑标本中牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白A(porphyromonas gingivalis outer membrane protein A,PgmA),了解PgmA水平与牙周病变程度的关系。方法采用SDS-PAGE检测原核表达系统重组PgmA(rPgmA)表达和Ni-NTA亲和层析法提取的rPgmA纯度,rPgmA免疫家兔获得抗血清,建立ELISA检测56例CP患者209个龈下菌斑标本中的PgmA,并分析PgmA水平与牙周病变程度的关系。结果rPgmA表达产量约为细菌总蛋白的50%。提纯的rPgmA SDS-PAGE后仅见单一的蛋白条带。90.0%的龈下菌斑标本(188/209)PgmAELISA阳性。重度CP龈下菌斑标本中PgmA含量明显高于轻度CP标本(P<0.05),但轻度和中度、中度和重度CP标本之间PgmA含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢性牙周炎病变程度与龈下PgmA水平有关,PgmA可能是Pg毒力因子之一。     

聚合酶链式反应在3种牙周病原菌检测中的应用

应用聚合酶链式反应检测临床标本中的Pg、Aa与Fn具有很高的敏感性和特异性。聚合酶链式反应及其扩增产物测序结果以及AP-PCR指纹图分析提示不同标本分离的Pg与Aa菌株所携带的毒力基因有差异。分析不同Pg、Aa与Fn等牙周致病菌基因型与其致病力之间的关系,对于阐明牙周炎的发病机制、改善诊断方法、采取更有效的治疗措施等方面具有重要意义。     

聚合酶链式反应在3种牙周病原菌检测中的应用

应用聚合酶链式反应检测临床标本中的Pg、Aa与Fn具有很高的敏感性和特异性。聚合酶链式反应及其扩增产测结果以及AP－PCR指纹图分析提示不同标本分离的Pg与Aa菌株所携带的毒力基因有差异。分析了不同Pg、Aa与Fn等牙周致病菌基因型与其致病力之间的。对于阐明牙周炎的发病机制、改善诊断方法、采取更有效的治疗措施等方面具有重要意义。     

PCR检测龈下菌斑中齿垢密螺旋体与牙周组织破坏的关系

目的　建立龈下菌斑标本中齿垢密螺旋体PCR临床快速检测方法 ,了解齿垢密螺旋体感染与慢性牙周炎牙周组织破坏程度之间的关系。方法　 81例慢性牙周炎患者每例采取 2个不同患牙牙位的龈下菌斑标本 ,用终浓度为 1%的TritonX 10 0 10 0℃水浴 10min处理标本以制备DNA模板 ,用PCR检测标本中齿垢密螺旋体特有的相对分子质量 (Mr)为 5 3× 10 3 外膜蛋白基因 (tdpA)扩增片段。结果　 6 7例患者 ( 82 .7% )的 2份龈下菌斑标本齿垢密螺旋体tdpAPCR均为阳性 ,9例患者( 11.1% )的其中 1份龈下菌斑标本可见目的扩增片段 ,5例患者 ( 6 .2 % )的 2份龈下菌斑标本PCR均为阴性 ,16 2例龈下菌斑PCR检测总阳性率为 88.3% ( 143 16 2 )。牙槽骨吸收 >2 3和牙周袋深度≥7mm患牙龈下标本的PCR阳性率较高 (P <0 .0 5 ) ,牙龈指数与PCR阳性率无明显关系 (P >0 .0 5 )。结论　PCR检测tdpA基因可用于慢性牙周炎龈下标本中齿垢密螺旋体的临床快速诊断 ,齿垢密螺旋体感染与牙周组织破坏密切相关。     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人单核细胞株THP-1前列腺素E2合成通路的影响

目的 探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(1ipopolysaccharide of Porphyromonas gingivalis,Pg-LPS)在诱导细胞前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)合成通路上是否具有不同于大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide of Escherichia coli,Ec-LPS)的特点.方法 用Pg-LPS和Ec-LPS分别作用于人单核细胞株THP-1,用酶免疫法检测PGE2的浓度.用液闪计数法观察花生四烯酸释放水平的变化.用反转录聚合酶链反应和Western blotting法分别检测胞质磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)、环氧化酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)和微粒体前列腺素E合成酶1(microsomal prostaglandinE synthase-1,mPGES-1)的mRNA和蛋白表达水平.结果 Pg-LPS诱导PGE:合成和释放花生四烯酸的水平明显弱于Ec-LPS(P<0.05).PGE2水平增高在Pg-LPS作用6 h出现,24 h达峰值,为(221.40±29.46)rig/L;或Ec-LPS作用1～48 h,为(161.80±17.31)一(379.80±37.35)ng/L.COX-2和mPGES-1的最高表达出现在Pg-LPS作用16 h,或Ec-LPS作用8 h和16 h时.cPLA2的抑制剂AACOCF3町降低LPs诱导的花生四烯酸释放水平的增高,但对PGE2的合成无明显作用.COX-2阻断剂NS-398可显著减少PGE2产生.结论 Pg-LPS对PGE2合成通路的作用弱于Ec-LPS.Pg-LPS作用下PGE2的合成卡要是COX-2和mPGES-1表达增高所致,与cPLA2关系不大.     

载生长因子有机/有机核壳微球的促成骨作用

有机/有机核壳微球是由有机粒子核表面包覆一层或多层有机壳层而形成的复合材料,因其易调控的结构和多元化的性能作为载体系统发挥关键作用。有机/有机核壳微球系统通过控制包封在内的生长因子(GF)的有效释放,发挥抗感染、利凝血、促成骨等作用,在骨修复领域具有广阔的应用前景。本文就目前载GF有机/有机核壳微球的促成骨作用的研究进展作一综述,以期为发展高效率的骨缺损修复策略提供新视角。     

应用PCR检测慢性牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌及感染菌株基因型的分析

目的建立慢性牙周炎(CP)龈下标本中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis, Pg)的PCR检测方法,了解不同患牙龈下菌斑中Pg基因型的差异. 方法采用培养法分离不同患牙龈下菌斑中Pg,同时采用 PCR进行Pg 16S rDNA基因、prtC基因和fimA基因的检测.部分扩增产物T-A克隆后测定核苷酸序列. 结果 61例患者122个龈下菌斑标本中,Pg 16S rDNA、prtC和fimA分别扩增的阳性率依次为 90.6%、81.9%和78.0%,联合扩增的阳性率高达98.4%,培养法阳性率仅为 31.1%.30.0%(18/60)患者不同牙位龈下菌斑中的Pg基因型不一致.Pg 16S rDNA、prtC和fimA扩增片段与文献报道的核苷酸序列比较,同源性为98.62%～100%. 结论所建Pg PCR检测方法具有较高的敏感性和特异性,可用于慢性牙周炎龈下标本中Pg的快速临床诊断.部分CP患者可被不同基因型的Pg菌株同时感染.     

环戊烯酮类前列腺素的生理功能及其在牙周病治疗中应用的研究进展

牙周病是一种发生于牙齿支持组织的慢性炎症性疾病,可累及牙周上皮组织、结缔组织以及骨组织,造成软组织的破坏和牙槽骨的吸收。环戊烯酮类前列腺素（15d-PGJ₂）是花生四烯酸经环氧合酶2（COX-2）途径代谢的终产物之一,具有潜在的抗炎和调节骨代谢等作用。本文作者围绕15d-PGJ₂的生理功能、作用机制及其在牙周病治疗中应用的相关研究和前景进行综述。     

慢性牙周炎患者龈下菌斑中伴放线放线杆菌基因型的分析

目的：建立龈下菌斑标本中伴放线放线杆菌（Actinobacillus actinomycetemcomitans，Aa）PCR检测方法，了解慢性牙周炎患者不同牙位的龈下菌斑中Aα 的感染率及其优势基因型。方法：61例慢性牙周炎患者每例采取2个不同牙位共122份龈下菌斑标本，采用培养法分离Aα菌株，以PCR或多重PCR检测16SrDNA基因、lktA基因和fap基因，部分扩增产物克隆后测序。结果：在11例患者的11份龈下菌斑标本中分离到Aα菌株。122份龈下菌斑中Aα16SrDNA、lktA、和fap检测阳性率分别为84.4%、75.4%、和50.0%。38.8%的患者（19/49）不同牙位龈下菌斑中检出的Aα基因型不一致。Aα有4种基因型，其优势基因型是16SrDNA^ /lktA^ /fap^ ，其次为16SrDNA^ /lktA^ /fap^-。部分标本上述3种基因的扩增片段与文献报道核苷酸序列的同源性为93.75%-100%。结论：建立的PCR或多重PCR有较高的敏感性和特异性，适用于龈下菌斑标本中Aα的快速检测。慢性牙周炎患者Aα感染率较高，并存在优势基因型，部分患者可被不同基因型的菌株同时感染。