血液细菌16S rRNA基因检测的诊断价值

目的探索快速可靠的检测细菌感染的新方法。方法用PCR技术扩增实验室保留株10株的16SrRNA基因,以乙型肝炎病毒-DNA、白假丝酵母菌和人类基因组DNA为对照,检测该方法的特异性;采用10倍比稀释法进行该方法的灵敏度检测。结果对所测细菌株均获得475bp扩增产物,而与乙型肝炎病毒-DNA、白假丝酵母菌和人基因组DNA无交叉反应;PCR最低能检测1.5×104/L大肠埃希氏菌。结论16SrRN基因PCR检测细菌感染的方法具有特异性、快速性和敏感性高等特点。     

溶血葡萄球菌红霉素诱导克林霉素耐药的表型检测及耐药性分析

为了解溶血葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药率，特别是红霉素对克林霉素的诱导耐药作用，作收集各类标本分离的114株溶血葡萄球菌进行研究，现报道如下。     

黏质沙雷菌耐药性及碳青霉烯类抗生素耐药机制研究

目的 探讨黏质沙雷菌分离株的整体耐药特点,研究其对碳青霉烯类药物耐药的主要机制.方法 收集2007至2010年从宁波市第一医院不同病区分离(剔除重复菌株)黏质沙雷菌247株,用Vitek2 -Compact及配套革兰阴性杆菌药敏卡(GNS)检测其药敏情况,对筛选出的20株耐碳青霉烯类菌株进行PCR检测其耐药基因.结果 黏质沙雷菌对头孢曲松、氨曲南、环丙沙星的耐药率较高,分别为70.4％( 174/247)、64.8％ (160/247)、57.4％ (142/247)；对阿米卡星、庆大霉素、亚胺培南、美罗培南的耐药率较低,分别为:3.5％( 8/229)、5.4％( 13/241)、5.9％(14/237)、8.1％ (20/247).PCR检测20株对碳青霉烯类抗生素耐药的黏质沙雷菌中,1、7、12和16号的AmpC染色体基因表达是阴性参考菌株的98.3、102.3、121.5、87.3倍；共有12株黏质沙雷菌分离株同时携带CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和KPC-2型碳青霉烯类酶.黏质沙雷菌所携带的CTX-M以CTX-M1、CTX-M2、CTX-M9为主；2株菌携带有SHV基因；2株菌携带有SME基因；2株菌携带有TEM基因；5株菌膜孔蛋白基因ompC和ompF均缺失；仅1株ompC基因缺失；2株菌ompF基因缺失.结论 黏质沙雷菌对β内酰胺类药物耐药的原因比较复杂,以产β内酰胺酶为主.开展对耐药菌株的进化和多耐药基因的研究,有利于合理应用抗菌药物,降低抗生索对耐药菌的选择压力及控制耐药菌株的蔓延.     

副流感嗜血杆菌生物型在呼吸道感染中分布的初步研究

目的 了解副流感嗜血杆菌的各种生物型在呼吸道各种疾病中的分布情况。方法 自临床各呼吸道疾病病人选取分离菌析,经API NH进行菌种鉴定的194株副流感嗜血杆菌,按其对吲哚、尿素、鸟氨酸的利用情况进行分型。计算各种生物型在各种疾病中的百分率。结果 194株副流感嗜血杆菌中,副流感Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅵ,Ⅶ,Ⅷ型的分离率分别为39．7％、30．9％、13．4％、4．6％、7．2％、3．6％、0．5％。肺炎患者以副流感Ⅱ型为主52％（38／73）,其次为副流感Ⅰ型31．5％（23／73）;而上感患者、支气管炎患者、急性气管炎患者、其他疾病均以副流感Ⅰ型为主。结论 不同的疾病副流感嗜血杆菌的生物型分布各不相同,引起呼吸道感染的主要为副流感嗜血杆菌Ⅰ,Ⅱ型。     

聚合酶链反应对尖锐湿疣组织中HPV分型检测的意义

聚合酶链反应对尖锐湿疣组织中ＨＰＶ分型检测的意义吕火祥钱奕红刘建栋（浙江省人民医院，杭州３１００１４）人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６、１１、１６、１８型常引起人类生殖器感染，其中ＨＰＶ１６、１８型具有潜在的致癌性。国内外对ＨＰＶ的检测在尖锐湿疣组织中的型别...     

大肠癌的肿瘤坏死因子和白细胞介素-1基因多态性研究

大肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一，其发病机制仍不清楚。目前免疫遗传素质与大肠癌的关系越来越受到重视，肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素-1（IL-1）是体内具有多种生物活性的重要细胞因子，有抗肿瘤、抗病毒感染及免疫调节作用。因此，本文对浙江地区汉族人群TNF-α和IL-1基因多态性分布进行研究，并分析其与大肠癌的相关性，阐明TNF—α和IL-1基因多态性在大肠癌发病中的作用。     

孕妇血浆中胎儿游离DNA及抗DNA抗体与子痫前期的相关性研究

目的探讨孕妇血浆中胎儿游离DNA及抗DNA抗体与子痫前期的相关性。方法以Y染色体上性别决定基因（SRY基因）为基因标志，采用荧光定量PCR技术检测分娩后证实为男婴的34例子痫前期孕妇（观察组）和42例正常孕妇（对照组）血浆中胎儿游离DNA（fDNA）水平，采用ELISA法检测抗ss-DNA及抗ds-DNA抗体水平。结果观察组fDNA水平为（233.69±125.49），对照组为（67.83±43.70），两组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。观察组抗ss-DNA抗体水平为（0.110±0.141），对照组为（0.067±0.074），两组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。观察组抗ds-DNA抗体水平为（0.0267±0.0105），对照组为（0.0230±0.0102），两组比较，无统计学意义（P〉0.05）。fDNA与抗ss-DNA抗体无相关性（r=0．1275，P〉0．05），与抗ds-DNA抗体无相关性（r=0．245，P〉0．05）。结论监测孕妇血浆fDNA变化可作为预测子痫前期及诊断病情程度的一个指标。fDNA升高并非由抗DNA抗体所致。     

2003-2007年大肠埃希菌的临床分离及耐药趋势分析

目的了解2003年至2007年大肠埃希菌在临床标本中的分离情况及其耐药趋势，为临床感染的预防和治疗提供参考资料。方法回顾分析2003-2007年间所有标本中大肠埃希菌的分离率，标本和病区的分布构成情况以及对17种抗菌药物的耐药率。结果五年间大肠埃希菌的总分离率变化不明显，但其阳性分离率呈上升趋势。从2003年的5．02％增至2007年的6．26％；其在泌尿生殖道标本（尿液标本和尿道分泌物标本）的分离率最高（50．5％），其次是呼吸道标本（36．66％）；病区分布以重症监护室最高（20．7％），其次是普外科（18．3％）．所有内科病区（不合ICU）占46．6％；大肠埃希菌对12种抗菌药的耐药率大于50％，仅对其中5种的耐药率每年均低于50％。结论大肠埃希菌的临床总分离率没有明显变化，但阳性分离率有呈上升趋势，其对多数抗菌药物有较高的耐药性，所以感染的治疗应当依据抗菌药物的体外敏感试验。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分离率及耐药变迁观察

肺炎克雷伯菌是造成医院感染的重要病原菌,也是ESBLs最主要的携带菌之一.ESBLs检出率正在逐年上升,但各个国家的检出率不同.在肺炎克雷伯菌中ESBLs检出率为0～50%,多数国家平均在15%左右[1],美国和日本等发达国家的分离率低于10%,但是在国内耐药率较高,约在15%～50%之间,而且近年来呈现明显上升的趋势[2].了解产ESBLs肺炎克雷伯菌的分离及耐药情况的变迁,对减少ESBLs的产生及指导临床用药有重要的意义.     

大肠癌IFN-γ基因+874位点的单核苷酸多态性

目的：探讨中国浙江地区汉族人群中IFN-γ基因 874位点多态性分布,分析其与大肠癌的相关性.方法：应用突变特异性扩增系统(ARMS)- PCR对健康者132例和大肠癌患者92例IFN-γ基因 874位点多态性进行分析,并将PCR产物克隆及测序鉴定.结果：大肠癌患者IFN-γ 874位点AA基因型频率为70.6%,显著高于正常人中的57.6% (P＜0.05).进一步分析显示IFN-γ 874位点AA基因型与患者的年龄、性别、肿瘤部位、Dukes分期无关.结论：IFN-γ 874位点AA基因型可能与大肠癌的发生相关.