阻断NHE1抑制人胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭的研究

目的分析Na⁺/H⁺交换蛋白1（NHE1）抑制剂对癌基因BRAF野生型（BRAF^WT）和激活型BRAF^V600E突变的胶质母细胞瘤（GBM）细胞生长和侵袭能力的影响。 方法NHE1抑制剂Cariporide分别处理U251（BRAF^WT）和AM38（BRAF^V600E）GBM细胞系，乙酰甲酯化的2’,7’-双（2-羧乙基）-5（6）-羧荧光素荧光探针处理细胞并采用紫外分光光度计检测细胞在440 nm与490 nm的荧光强度，计算荧光强度比值以反映NHE1的活性，MTT法检测细胞增殖活性，基质胶-Transwell实验检测细胞侵袭能力。 结果AM38细胞的NHE1活性、增殖和侵袭能力均显著高于U251细胞，差异均有统计学意义（P=0.006、0.010、0.047）；Cariporide处理的U251和AM38细胞的NHE1活性、增殖和侵袭能力均显著低于溶剂二甲基亚砜处理的U251和AM38细胞，差异均有统计学意义（U251：P=0.012、0.023、0.044；AM38：P=0.006、0.001、0.038）。 结论采用Cariporide阻断NHE1活性可有效抑制BRAF^WT和BRAF^V600E突变型GBM细胞的增殖和侵袭。     

microRNA-10a抑制结肠癌肝转移肿瘤相关成纤维细胞活性的研究

目的探讨microRNA-10a(miR-10a)对肝脏微环境中肿瘤相关成纤维细胞(TAFs)的增殖、迁移以及促炎性因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素1(IL-1)βmRNA表达水平的影响。方法收集同一结肠癌患者癌旁正常肝组织和转移至肝脏的病灶组织,采用组织块法建立原代人肝正常成纤维细胞(NFs)和原代TAFs。通过形态学观察和细胞免疫荧光染色对NFs和TAFs进行鉴定,并通过流式细胞术鉴定二者的纯度。用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NFs和TAFs中miR-10a的表达水平,并在低表达miR-10a的细胞中过表达miR-10a。随后采用CCK-8实验、划痕实验和RT-qPCR分别检测miR-10a对该细胞增殖、迁移能力以及IL-6、IL-8、IL-1βmRNA表达水平的影响。结果细胞免疫荧光染色显示人细胞角蛋白18(CK-18)在NFs和TAFs中均不表达;成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)在两细胞中均表达;α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在NFs中弱表达,在TAFs中强表达。流式细胞术显示NFs与TAFs中α-SMA阳性率为95.0%和95.3%。miR-10a在TAFs的表达水平为NFs的0.65倍(P<0.01)。过表达miR-10a后TAFs在第3、4和5天增殖能力显著低于同时期的阴性对照组细胞(P<0.05,P<0.05,P<0.01);TAFs的迁移能力在24 h和48 h分别较阴性对照组降低25%和15%(P<0.01,P<0.05),TAFs中IL-6、IL-8、IL-1β的表达水平分别较阴性对照组降低54%、27%和42%(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论miR-10a在TAFs中呈低表达,miR-10a过表达抑制了TAFs的增殖和迁移,并降低炎性因子IL-6、IL-8、IL-1βmRNA的表达,这可能是TAFs抑制肝脏形成转移灶的重要因素。     

穿透性颈部大血管伤的救治:附6例报道

目的:探讨穿透性颈部大血管伤的救治方法。方法:1999—2010年收治6例穿透性颈部大血管伤患者,损伤的重要血管结构中颈内动脉1例,颈内静脉2例,椎动脉5例。6例患者中,5例行手术探查,1例为外伤性椎动脉假性动脉瘤,采用覆膜支架介入治疗。结果:6例患者均获得成功救治,所有患者存活,止血彻底,无继发性出血,无因脑部供血不足产生的功能障碍;2例患者颈部伤口延期愈合,分泌物非脓性,细菌培养无致病菌。结论:开放性颈部大血管伤以手术探查止血为首要治疗手段,损伤血管首选吻合,闭合性血管损伤介入血管重建值得推荐,椎动脉损伤手术填塞止血是有效的止血措施。     

β-TrCP1和HAUSP影响胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭并调控UHRF1蛋白水平

目的分析β-转导重复相容蛋白（β-TrCP1）和疱疹病毒相关性泛素特异性蛋白酶（HAUSP）对胶质母细胞瘤增殖和侵袭能力以及表观遗传调控因子UHRF1表达的影响。 方法胶质母细胞瘤U87细胞内分别转染N1空质粒（NC组）和β-TrCP1-N1过表达质粒（β-TrCP1组）,以及分别转染无意义siRNA序列（siRNA阴性对照,si-NC组）和靶向HAUSP mRNA的siRNA（si-HAUSP组）。RT-qPCR法和Western blot法分别检测各组细胞中β-TRCP1、HAUSP和UHRF1的mRNA以及蛋白水平。CCK8法和基质胶-transwell侵袭实验分别检测各组细胞的增殖和侵袭能力。 结果质粒转染后第4天和第5天,β-TrCP1组细胞的增殖能力显著低于同时期的NC组细胞（均P<0.05）;转染第4天,β-TrCP1组穿过基质胶的细胞数显著低于NC组细胞（P<0.05）。转染siRNA后第4天和第5天,si-HAUSP组细胞的增殖能力显著低于同时期si-NC组细胞（P<0.05）;转染si-HAUSP 4 d,si-HAUSP组穿过基质胶的细胞数显著低于si-NC组（P<0.05）。此外,过表达β-TrCP1和敲低HAUSP均不影响UHRF1的mRNA水平（均P>0.05）,但均可降低UHRF1蛋白水平（均P<0.05）。 结论过表达β-TrCP1和敲低HAUSP均可抑制胶质母细胞瘤U87细胞的增殖和侵袭能力,同时降低UHRF1蛋白水平。UHRF1蛋白水平改变可能是β-TrCP1和HAUSP影响胶质母细胞瘤增殖和侵袭能力的机制之一。     

胃大部切除后胃肠吻合术式的选择方法探讨

目的探讨胃大部切除后其吻合方式的选择。方法对2004年1月至2004年9月我院三例不同胃肠吻合方式的临床资料进行分析。结果不同的手术方式能影响患者肠道恢复及术后并发症发生的多少。结论胃肠吻合术式选择仍根据手术情况而定,但尽可能采用Roux—en—Y式吻合,尽量避免采用毕Ⅱ式吻合方式。     

miRNA-20a促进卵巢癌细胞OVCAR3的转移

目的 检测miRNA-20a对卵巢癌细胞系OVCAR3转移能力的影响.方法 通过实时定量RT-PCR验证反义寡核苷酸与小干扰RNA封闭与过表达的效果,然后利用MTT、软琼脂集落形成和transwell 侵袭实验检测封闭和过表达miRNA-20a对OVCAR3细胞增殖及转移能力的影响.结果 封闭内源性miRNA-20a后,细胞活性基本不受影响,但集落形成能力和细胞的转移能力明显降低.过表达miRNA-20a后,细胞活性基本不受影响,但集落形成能力和细胞的转移能力明显升高.结论 miRNA-20a可能参与了卵巢癌细胞OVCAR3的转移.     

牵张成骨修复火器伤性下颌骨缺损的临床应用

目的 探讨应用牵张成骨技术修复火器伤性下颌骨缺损的临床应用.方法 采用牵张成骨方法为3例火器伤致下颌骨缺损患者实施治疗,2例为牙槽突缺损修复,1例为升支缺损修复.结果 3例患者均顺利完成治疗,2例牙槽突缺损得到恢复,1例恢复了下颌升支高度和下颌骨完整性,并在后期接受了正颌治疗,患者对治疗效果满意.结论 牵张成骨技术可以...     

火器伤牙槽突缺损的牵张成骨治疗

目的：探讨牵张成骨技术治疗火器伤牙槽突缺损的临床应用。方法：2例患者分别因火枪和炸药爆炸导致下颌骨牙槽突缺损,一期经清创处理,遗留严重牙槽突缺损,影响义齿修复,接受牵张成骨治疗,其中1例行垂直骨牵张,另1例接受水平骨牵张。结果：2例患者均顺利完成治疗,垂直骨牵张升高牙槽突约7mm,水平骨牵张牙槽突恢复长度约16mm,X线显示成骨良好。结论：牵张成骨技术可以有效地修复火器伤牙槽突缺损,并为最终重建咬合关系和实现功能性修复提供了基础,为火器伤的救治提供了一条新的修复方法,值得临床借鉴和推广。     

甲胂酸钠致再生障碍性贫血

1　病例资料男 ,6岁。因口唇周围及面部出现小红丘疹伴发痒、脱皮 2周 ,在乡村卫生室诊为湿疹 ,予甲胂酸钠注射液10 0 mg/d,每日 1次肌内注射 ,共用 14天 ,其间未用其他药物。用药后次日 ,胸背部及四肢出现散在淤血斑 ,时有鼻出血 ,面色苍白 ,全身乏力。在某医科大学附属医院住院 ,经骨髓穿刺诊断为再生障碍性贫血 (再障 ) ,考虑为甲胂酸钠所致。经青霉素、一叶秋碱静脉滴注 ,司坦唑醇、左旋咪唑等口服 ,病情缓解 ,复查白细胞 3.9× 10 9/L,血红蛋白 88g/L,红细胞 3.2× 10 12 /L,血小板 2 19× 10 9/L ,均较前回升 ,2 2天后出院。出院后…     

左巨大肾盂源性囊肿1例报告

1临床资料 患者，女，38岁，因左腰腹部隐痛半年加重伴腹胀1周入院。患者半年来无明显诱因感左侧腰腹部隐痛，无畏寒、发热、腹泻、恶心、呕吐及便血。亦无尿频、尿急、尿痛及血尿，未予重视，近1周来感腰腹部疼痛明显加重并伴有腹胀到我院就诊。入院查体：体温37．2℃、呼吸20次／min、脉搏72次／min、血压16．8／11．2kPa。