低强度聚焦超声刺激小鼠伏隔核的有效性

目的 使用低强度聚焦超声对正常小鼠的伏隔核进行超声刺激,从行为学、病理改变以及神经生物化学方面,探讨超声刺激进行神经调控的有效性.方法 100只C57BL/6小鼠随机分为实验组和对照组各50只,实验组给予经颅低强度聚焦超声对伏隔核进行超声刺激,每天2次,每次10 min,连续刺激7 d;对照组给予假刺激.干预结束后,2个大组内又随机分为行为学评估30只(分别进行强迫游泳、旷场和水迷宫实验)、电镜检测10只和神经递质检测10只,立刻进行相关检测.强迫游泳实验评估小鼠的抑郁程度,旷场实验评估小鼠的焦虑程度,水迷宫实验评估小鼠的学习记忆能力.透射电镜观察小鼠伏隔核神经元超微结构的改变,ELISA法测定小鼠NAc中单胺类神经递质(去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺)的含量.结果(1)行为学评价结果:与空白对照组比较,超声刺激组在强迫游泳实验中不动时间明显延长(P<0.001),在旷场中行进总距离、行进平均速度、中央区活动距离、中央区停留时间和中央区穿越次数均显著减少(P<0.05,P<0.01),在水迷宫实验中逃避潜伏时间明显延长,穿越平台次数明显减少,在目标象限停留时间明显缩短(P<0.05,P<0.001);(2)电镜结果:对照组NAc神经元超微结构基本正常,超声刺激组神经元肿胀,神经纤维溶解坏死,胞浆内细胞器减少或消失,线粒体空泡化,内质网扩张;(3)神经递质测定结果:与对照组比较,超声刺激组小鼠NAc单胺类神经递质去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺的含量均显著降低(P<0.0001).结论 低强度聚焦超声对小鼠可产生抑制性的神经调节作用,并造成NAc神经元形态学以及神经生物化学改变,这可能是超声神经调控的机制之一.     

微波消融联合免疫疗法治疗肿瘤的研究进展

微波消融作为一种热消融技术,可直接导致局部肿瘤组织的凝固性坏死及不可逆性损伤,同时可诱导机体产生特异性的抗肿瘤免疫反应,对肿瘤组织造成损害。联合免疫疗法可进一步增强微波消融诱导的抗肿瘤免疫反应,降低肿瘤的复发转移,提高患者生存率。简要介绍微波消融引起机体免疫反应的机制,同时对微波消融联合免疫疗法的应用及前景作简要总结及展望。     

Annexin V微泡对凋亡组织寻靶的试验研究

目的制备Annexin V靶向微泡,评价其理化性质,并进行初步体外寻靶试验探究。方法生物素-亲和素桥接法制备Annexin V靶向微泡,粒径分析仪、Malvern电位仪评价其理化性质,免疫荧光染色法评估靶向配体结合状况,用荧光显微镜观察其形态、大小及分布状态。建立人甲状腺未分化癌裸鼠模型,对其进行微波消融,诱导肿瘤组织凋亡。随机分组,A组为普通微泡,B组为Annexin V抗体预饱和+靶向微泡,C组为Annexin V靶向微泡,比较3组微泡与消融后凋亡肿瘤组织的结合情况。结果成功制备Annexin V靶向微泡,微泡形态大小一致,理化性质稳定;A组和B组,基本未见微泡与肿瘤组织切片稳定结合,而C组见Annexin V微泡与组织稳定结合。结论采用生物素-亲和素桥接法制成Annexin V靶向微泡;且在体外能与凋亡肿瘤组织稳定结合,即成功寻靶,从而实现识别检测凋亡组织的功能。     

超声刺激小鼠伏隔核后c-Fos蛋白及结构可塑性改变的实验

  目的  通过对超声刺激小鼠伏隔核（NAc）后c-Fos蛋白及结构可塑性的检测，观察超声刺激脑区后神经元激活和结构改变情况，初步探讨超声进行神经调控的机制。  方法  将C57 BL/6小鼠随机分为超声刺激组12只，假刺激组6只。超声刺激组使用低强度聚焦超声以固定参数刺激小鼠NAc区，连续刺激7 d后行NAc区免疫组化测定c-Fos蛋白表达、电镜下观察神经元结构可塑性改变情况；假刺激组同样以超声刺激探头照射，不开机无输出功率。  结果  超声刺激后NAc区神经元c-Fos的表达比例显著提高，差异有统计学意义（P < 0.001）。电镜下发现超声刺激组树突棘分布稀疏，数量显著减少，形态呈蘑菇型或矮树桩样，与假刺激组相比，超声刺激后树突棘密度显著降低，差异有统计学意义（P < 0.0001），树突长度显著缩短，差异有统计学意义（P < 0.0001）。  结论  低强度聚焦超声可显著激活NAc脑区神经元，同时可抑制性调节神经元的结构可塑性，这证明了超声刺激具备干预与治疗脑疾病的潜能。     

超声监视下不同能级微波消融甲状腺肿瘤的疗效对比研究

目的筛选甲状腺肿瘤细胞凋亡的低能级微波消融参数,探讨低能级微波消融甲状腺肿瘤的安全性及有效性。方法建立裸鼠皮下甲状腺未分化癌模型,随机分为12组进行不同功率的微波消融。在消融前后分别进行超声造影,评估消融效果;术后24 h取肿瘤组织行HE染色观察病理变化,TUNEL及流式细胞仪凋亡检测法检测肿瘤组织凋亡坏死情况。结果HE染色显示微波消融可诱导肿瘤组织发生凋亡与坏死,随着消融功率的增加,肿瘤组织中凝固性坏死区域增加。TUNEL结果示8W组凋亡指数明显高于0W、5W、6W、7W组(P<0.01);8W组与9W、10W、11W、12W、13W、14W、15W组凋亡指数相比无差异(P>0.05)。流式细胞仪检测结果示,8W组存活率明显低于0W、5W、6W、7W组(P<0.01),而8W组与9W、10W、11W、12W、13W、14W、15W组存活率相比无差异(P>0.05)。结论超声引导下低能级微波消融治疗甲状腺肿瘤是有效及安全。     

膜联蛋白Ⅴ微泡体外高特异性靶向识别凋亡细胞

目的制备可识别细胞凋亡的膜联蛋白Ⅴ(annexinⅤ)超声靶向微泡(MB),观察其体外寻靶能力。方法利用生物素-亲和素系统制备靶向MB,并评价其理化性质及靶向配体结合状况。将人甲状腺未分化癌细胞株传代培养至对数期,随机分为3份,以微波消融其中2份,以1份作为对照,获得凋亡细胞并进行验证。于荧光显微镜下观察3组annexinⅤ靶向MB与普通MB:A组,凋亡细胞+普通MB;B组,正常细胞+annexinⅤ靶向MB;C组,凋亡细胞+annexinⅤ靶向MB。结果仅凋亡细胞可与annexinⅤ靶向MB稳定结合。结论 annexinⅤ靶向MB可在体外靶向结合凋亡细胞。     

低强度聚焦超声刺激小鼠伏隔核的有效性

目的 使用低强度聚焦超声对正常小鼠的伏隔核进行超声刺激,从行为学、病理改变以及神经生物化学方面,探讨超声刺激进行神经调控的有效性.方法 100只C57BL/6小鼠随机分为实验组和对照组各50只,实验组给予经颅低强度聚焦超声对伏隔核进行超声刺激,每天2次,每次10 min,连续刺激7 d;对照组给予假刺激.干预结束后,2个大组内又随机分为行为学评估30只(分别进行强迫游泳、旷场和水迷宫实验)、电镜检测10只和神经递质检测10只,立刻进行相关检测.强迫游泳实验评估小鼠的抑郁程度,旷场实验评估小鼠的焦虑程度,水迷宫实验评估小鼠的学习记忆能力.透射电镜观察小鼠伏隔核神经元超微结构的改变,ELISA法测定小鼠NAc中单胺类神经递质(去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺)的含量.结果(1)行为学评价结果:与空白对照组比较,超声刺激组在强迫游泳实验中不动时间明显延长(P<0.001),在旷场中行进总距离、行进平均速度、中央区活动距离、中央区停留时间和中央区穿越次数均显著减少(P<0.05,P<0.01),在水迷宫实验中逃避潜伏时间明显延长,穿越平台次数明显减少,在目标象限停留时间明显缩短(P<0.05,P<0.001);(2)电镜结果:对照组NAc神经元超微结构基本正常,超声刺激组神经元肿胀,神经纤维溶解坏死,胞浆内细胞器减少或消失,线粒体空泡化,内质网扩张;(3)神经递质测定结果:与对照组比较,超声刺激组小鼠NAc单胺类神经递质去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺的含量均显著降低(P<0.0001).结论 低强度聚焦超声对小鼠可产生抑制性的神经调节作用,并造成NAc神经元形态学以及神经生物化学改变,这可能是超声神经调控的机制之一.     

超声引导下甲状腺结节细针穿刺活检的6种操作方法的比较

  目的  比较超声引导下甲状腺结节细针穿刺活检6种操作方法的检验准确性并分享穿刺经验。  方法  纳入1903例行甲状腺结节细针穿刺活检，并经甲状腺外科手术证实，且手术前后都有明确病理结果的患者资料。按照FNA进针角度及取材手法将上述患者资料共分6组:A1～A3，B1～B3组，A类为端侧式，B类为边侧式；1类为负压抽吸法，2类为常压抽吸法，3类为闭压进出法。在传统的评价指标基础上，采用Bowker加权检验对比其差异性， Kappa线性加权检验其一致性。最终评价6种不同操作方法的优缺点。  结果  灵敏度:A类高于B类,A3组最高，为96.47%，最低为B2组87.69%；特异度:均为100%；准确度:A类高于B类，A3组最高，为97.69%，最低为B2组 91.20%；阳性预测率:均为100%；阴性预测率:A类高于B类，最高为A3组95.65%，最低为B2组78.57%；约登指数:A类高于B类，最高为A3组96.47%，最低为B2组87.69%；Bowker加权检验结果:P值由高至低排列为:A3 > A1 > A2 > B3 = B1 = B2；A1、A2、B1、B2、B3组P < 0.01，与术后组织病理学结果有显著统计学差异；A3组P值最高，为0.072，P > 0.05，与术后组织病理学结果无统计学差异；Kappa一致性检验（线性加权）结果:A3 > A1 > A2 > B3 > B1 > B2；A3组最高，为0.959，最低为B2组为0.821。  结论  基于传统评价指标、配对卡方及Kappa检验结果，端侧式入路配合闭压进出取材法（A3组）的细胞学病理结果与术后组织学病理结果最为接近，是取材质量非常高的FNA方式。     

基于FNA-Tg和血清Tg的二元Logit回归模型对甲状腺癌淋巴结转移或复发的判定价值

  目的  通过二元Logit回归分析患者淋巴结细针细胞学穿刺洗脱液甲状腺球蛋白测定值（FNA-Tg值）、血清甲状腺球蛋白值（血清Tg值）及其比值,建立对甲状腺癌淋巴结转移、复发情况的预测模型。  方法  （1）收集术前为分化型甲状腺癌伴可疑淋巴结转移患者64例。（2）通过ROC曲线初步评估FNA-Tg值、血清Tg值及其比值对淋巴结良恶性鉴别的诊断价值。（3）使用二元Logit回归分析进一步评价上述3项指标的诊断价值并建立预测模型。  结果  （1）ROC曲线:淋巴结FNA-Tg对应的AUC值为0.998（95% CI 99.27%～100.34%）,切点值为0.82;血清Tg对应的AUC值为0.824（95% CI 70.64%～94.14%）,切点值为18.27;淋巴结FNA-Tg/血清Tg对应的AUC值为1.000（95% CI 100.00%～100.00%）,切点值为0.461。（2）二元Logit回归全进入法3项自变量同时存在,二元Logit回归全进入法3项自变量同时存在,FNA-Tg值、血清Tg值及其比值3项P值均 > 0.05,模型3项自变量同时存在对淋巴结良恶性无诊断价值;二元Logit回归全进入法淋巴结FNA-Tg单一变量。淋巴结FNA-Tg可以解释88%淋巴结良恶性的变化,P = 0.038 < 0.05,回归系数2.68,OR值14.587,预测模型公式为:In（p/1-p） = -4.122 + 2.680*淋巴结FNA-Tg,似然比检验P = 0.000 < 0.001,AIC值14.386,BIC值18.704,总体预测准确率为95.31%;二元Logit回归全进入法血清Tg单一变量,血清Tg能解释淋巴结良恶性27.8%的变化原因,P = 0.000 < 0.001,回归系数0.164,OR值1.179,预测模型公式为:In（p/1-p） = -2.466 + 0.164*血清Tg,似然比检验P = 0.000 < 0.001,AIC值67.33,BIC值71.648,总体预测准确率为75%。  结论  术前FNA-Tg、血清Tg及其比值在判定甲状腺结节良恶性有很好的诊断价值。基于FNA-Tg、血清Tg的二元Logit回归模型公式能较好的预测甲状腺癌患者淋巴结转移、复发的情况。