lncRNA 178030.2通过TRPS1对三阴性乳腺癌细胞紫杉醇耐药的影响与机制研究

目的:探讨lncRNA 178030.2通过TRPS1对三阴性乳腺癌细胞紫杉醇耐药的影响与机制。方法:采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导三阴性乳腺癌紫杉醇耐药细胞系并命名为MDA-MB-231/R。采用定量PCR和Western blot检测耐药细胞和亲本细胞中lncRNA 178030.2和TRPS1的表达；应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2高表达质粒pcmv-178030.2和对照质粒pcmv转染至MDA-MB-231细胞，分别为高表达组和对照组，定量PCR检测lncRNA 178030.2水平的变化，分别用定量PCR和Western blot检测TRPS1 mRNA及蛋白水平的变化；RIP实验检测lncRNA 178030.2是否与TRPS1相结合；MTT法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2小干扰RNA si178030.2和对照siNC转染至MDA-MB-231/R细胞，分别为干扰组和对照组，定量PCR检测lncRNA 178030.2水平的变化，分别用定量PCR和Western blot检测TRPS1 mRNA及蛋白水平的变化；MTT法检测MDA-MB-231/R细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000将TRPS1过表达质粒pcmv-TRPS1和对照质粒pcmv转染至MDA-MB-231细胞，分别为高表达组和对照组，分别用定量PCR和Western blot检测两组细胞中TRPS1 mRNA及蛋白水平的表达情况，然后再分别应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2高表达质粒pcmv-178030.2转染入两组细胞，MTT法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。结果:成功构建在3 μg/ml紫杉醇中稳定生长的三阴性乳腺癌耐药细胞系MDA-MB-231/R。定量PCR结果显示:lncRNA 178030.2在紫杉醇耐药细胞系MDA-MB-231/R中的表达明显高于在其亲本细胞MDA-MB-231中的表达；定量PCR和Western blot显示:TRPS1 mRNA和蛋白在紫杉醇耐药细胞系MDA-MB-231/R中的表达明显低于在其亲本细胞系MDA-MB-231中的表达；与对照组相比，高表达lncRNA 178030.2组的MDA-MB-231细胞中TRPS1表达下降，细胞对紫杉醇的敏感性降低，细胞增殖增强，且lncRNA 178030.2确实可以与TRPS1相结合；与对照组相比，低表达lncRNA 178030.2组的MDA-MB-231/R细胞中TRPS1表达升高，细胞对紫杉醇的敏感性升高，细胞增殖减弱；在MDA-MB-231细胞中过表达TRPS1后再过表达lncRNA 178030.2，其促进紫杉醇耐药、促进细胞增殖的作用也明显减弱。结论:lncRNA 178030.2促进三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的紫杉醇耐药，促进细胞增殖，其发生机制可能与下调TRPS1的表达有关。     

下肢力线在盘状半月板损伤应用的研究进展

盘状半月板损伤是一种常见的运动损伤,其治疗方法有在关节镜下行盘状半月板成形术、盘状半月板次全切术、盘状半月板全切术等,虽术后短期临床效果佳,但远期临床效果不理想。目前对于盘状半月板损伤手术方式的选择,不同的学者有不同的观点。近年来众多学者研究表明术式的选择及术后下肢力线的改变与盘状半月板损伤的治疗效果相关。本文主要总结了盘状半月板损伤的治疗现状及术后下肢力线的变化情况,阐述了下肢力线的评估在盘状半月板治疗中的作用,为临床个体化治疗盘状半月板损伤提供依据。     

胫骨近端关节内骨折治疗方案的选择

胫骨近端关节内骨折是常见的下肢骨折,随着现代交通事业的发展和运动损伤的增加,发生在胫骨近端的骨折数量有上升的趋势。尽管在全身骨折中,胫骨平台骨折发生率仅占1%,但是由于胫骨近端是膝关节的重要组成部分,解剖结构复杂,骨折常常合并关节内其他组     

全膝人工关节置换术髌骨置换与否相关问题的探讨

自20世纪70年代全膝人工关节置换术出现以来,对于是否进行髌骨置换这一问题,随着认识的发展而不断变化,至今仍有很多争议。最初的全膝人工关节置换术(total knee arthroplasty,TKA),无论髌骨是否存在病变或不稳都不进行置换。由于假体的活动在解剖方式上与自体髌骨不相匹配,导致很多的并发症如膝前疼痛的发生,因此人们开始研制髌骨假体。随着假体设计和外科技术的提高,手术效果得到肯定。虽然髌骨置换后膝前疼痛发生率明显降低,但与之相关     

肝外胆管乳头状腺瘤1例

<正>女,73岁。四肢麻木乏力伴发热5d,左肢无力半天。行颅脑CT检查,以中风、发热原因待诊收入院。查体:左下肢肌力Ⅳ级,全身皮肤及眼巩膜无黄染,肝脾肋下未触及,肝区轻叩痛。近2个月来纳差,体质量下降。实验室检查:WBC14.6×109/L,NEU 84.3%,ALT 46U/L,AST 46U/L,TBIL23.1U/L,DBIL 10.5U/L,ALP 204U/L,GGT 91U/L,ESR     

伊立替康联合顺铂治疗广泛期小细胞肺癌的临床观察

目的观察周剂量伊立替康联合顺铂一线治疗广泛期小细胞肺癌(SCLC)的疗效及不良反应。方法 42例经病理或细胞学诊断为广泛期SCLC患者接受伊立替康60mg/m2第1、8、15天,顺铂25mg/m2第1-3天,每28天为1个周期,治疗2个周期评价疗效,每周期评价不良反应。结果 42例入选患者均可评价疗效。获完全缓解(CR)3例,部分缓解(PR)34例,总有效率(CR+PR)为88.09%。所有患者中位疾病进展时间为225d,中位生存时间401d。主要不良反应为Ⅲ/Ⅳ度中性粒细胞下降(19例,45.2%),腹泻(7例,16.7%)和恶心、呕吐(13例,31.0%)等。结论周剂量伊立替康联合顺铂一线治疗广泛期SCLC安全、有效,可作为一线化疗方案的选择。     

mTOR通路激活后上调SNCG表达水平抑制 乳腺癌细胞辐射 敏感性的研究

目的：探讨乳腺癌T47D细胞通过激活mTOR通路调控SNCG表达水平，从而抑制乳腺癌细胞辐射敏感性的分子机制。方法：检测不同剂量γ射线照射后的T47D乳腺癌细胞中mTOR蛋白表达水平。在细胞培养液中加入不用浓度磷脂酸（PA，mTOR通路激活剂）进行培养，以常规培养细胞为对照组，采用Western blot法检测对照组和激活剂组细胞SNCG蛋白的表达。对照组和激活组细胞采用4 Gy γ射线照射24 h，检测照射后SNCG mRNA和蛋白的表达情况，并采用平板细胞克隆形成实验检测克隆形成率。同时，将转染SNCG siRNA的乳腺癌T47D细胞株分成激活组和对照组，验证SNCG在乳腺癌细胞辐射敏感性抵抗中的生物学功能。结果：不同剂量射线照射后，mTOR蛋白表达水平显著升高。mTOR激活剂PA处理后的细胞对乳腺癌细胞放射敏感性具有明显的抑制作用，同时Western blot显示γ射线照射处理后的乳腺癌细胞中SNCG蛋白的表达水平异常。Western blot和qPCR方法检测发现，T47D对照组和干扰SNCG基因的T47D细胞实验组中，激活mTOR或γ射线照射均能引起SNCG蛋白和mRNA表达增加。克隆形成实验进一步证明，降低SNCG的表达可显著抑制T47D细胞克隆形成能力。结论：在乳腺癌细胞中，mTOR介导的SNCG表达调控对乳腺癌细胞抗辐射起着重要作用，降低SNCG的表达可提高辐射敏感性，提示在临床治疗中有可能通过使用SNCG抑制剂或mTOR抑制剂提高乳腺癌细胞在放化疗中的敏感性。     

小鼠间充质干细胞三系分化中SOX9与Ⅱ型胶原mRNA的定量

背景：研究表明，软骨中的主要成分Ⅱ型胶原的基因-Col2al在软骨细胞中的表达与SOX9的浓度呈剂量依赖正相关关系。目的：通过成骨、成软骨、成脂肪诱导干细胞分化，分析3种分化过程及不同时期的SOX9与II型胶原mRNA含量的变化，探讨SOX9在不同时空分布的表达规律及与Ⅱ型胶原的相关关系。方法：取4周龄昆明小鼠骨髓间充质细胞，体外培养得到间充质干细胞并传达至第3代，对间充质干细胞进行流式细胞仪鉴定细胞表型，共分3组每组设3个时间段，通过成骨、成软骨、成脂肪3种诱导培养液对3组细胞进行诱导，另设不进行诱导的细胞作为对照组。分别在诱导3，7，14d后收集提取细胞的总RNA，通过RT-PCR进行SOX9与Ⅱ型胶原的mRNA定量检测，同时对诱导后的细胞进行染色、免疫荧光染色，观察其分化状态及相关统计分析。结果与结论：第3代骨髓间充质干细胞生长良好，流式细胞仪鉴定细胞表型证实为干细胞，对诱导后细胞进行染色、免疫荧光染色结果证实细胞分化为骨、软骨、脂肪细胞。经RT-PCR检测，在3组诱导分化细胞中SOX9mRNA含量由高到低分别是成软骨、成骨、成脂肪，Ⅱ型胶原mRNA含量由高到低分别是成软骨、成脂肪、成骨。在成软骨分化中SOX9在3，7d表达不断升高，14d呈下降趋势。Ⅱ型胶原在3，7，14d均逐渐升高。在成骨分化中SOX9mRNA含量随着时间推移而增加，而Ⅱ型胶原则随着时间推移而不断降低。在成脂肪分化中SOX9mRNA表达与对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）；而Ⅱ型胶原的表达没有规律可循，时间点的延伸及检测未观察到。结果提示，SOX9在软骨分化中作用优于成骨、成脂肪组，且软骨分化中SOX9与Ⅱ型胶原存在相关性，可能在软骨分化的早期Ⅱ型胶原随着SOX9的变化而变化；且软骨分化和成骨分化过程中SOX9可能起到了一个互相协调促进平衡的关键作用。     

苏州市冷加工糕点安全性调查分析

目的了解全市冷加工糕点安全性。方法随机抽检47家市区销售冷加工糕点单位,采94件样品进行食品安全检验。结果细菌总数、大肠菌群超标达28.7%。冷加工糕点的合格率只有71.3%。结论冷加工糕点存在安全隐患,需加强安全监测管理。