HZ818树脂在紫杉醇初分离工艺中的应用

采用HZ818大孔吸附树脂对红豆杉浸膏中的紫杉醇成分进行吸附和洗脱试验，同时利用液质联用进行分析检测，确定了其最佳工艺参数。结果表明，HZ818树脂对紫杉醇有良好的吸附分离效果。优化工艺条件为：样品溶于体积分数40％甲醇，以1．5mL／min过柱，体积分数75％甲醇淋洗，体积分数85％甲醇以0．5mL／min洗脱，紫杉醇的质量分数从原浸膏中的1．02％提高到8．1％，回收率达98．6％。     

产紫杉醇内生真菌Fusarium maire的原生质体制备和再生

通过正交设计等实验方法,详细的研究了培养基成分、酶系组成、菌龄、渗透压缓冲剂、pH、酶解温度、时间和再生培养方式等多种因素对Fusarium maire原生质体制备和再生的影响。实验结果表明:将Fusarium maire通过先静止2 d再以180 r/min震摇2 d后,以0.6 mol/L的KCl配制的pH为5的复合酶(3 mg/dL溶壁酶、2.5 mg/dL蜗牛酶1、mg/dL溶菌酶和0.5 mg/dL纤维素酶)中,32℃恒温酶解4 h,原生质体制备产量达3.2×107个/mL;纯化后的原生质体在25℃,以0.6 mol/L的蔗糖配制的YCM再生培养基上单层培养,其再生率达8.9%。为今后的通过原生质体融合和诱变研究,构建紫杉醇工程菌奠定了基础。